Fluorophore Characteristics

Fluorophore Characteristics

JIR biedt een breed scala aan fluorescerende conjugaten, die de meest gebruikte excitatiebronnen en filtersets van blauwe tot infrarode emissies omvatten. De volgende informatie beschrijft enkele kenmerken van fluorescerende kleurstoffamilies en waar zij het best kunnen worden toegepast. Informatie over individuele kleurstoffen kan worden gevonden door de kleurstof uit onderstaande tabel te selecteren.

Meer informatie over het selecteren van een fluorofoor voor uw toepassing is beschikbaar op de fluorofoor selectie pagina.

Alexa Fluor® Fluorescerende Kleurstoffen

Alexa Fluor® fluorescerende kleurstoffen worden algemeen erkend als superieure fluorescerende kleurstoffen, gerespecteerd om hun helderheid en fotostabiliteit. Ze zijn goed oplosbaar in water en blijven fluorescerend van pH 4 tot pH 10.

Lees meer over Alexa Fluor® conjugaten.

IF beeld van rat retinaal weefsel gevisualiseerd met JIR Alexa Fluor®-geconjugeerde secundaire antilichamen
Rat retinaal weefsel, gevisualiseerd met Cy™5 Streptavidine (016-170-084) en Alexa Fluor® 488 Geit Anti-Muis IgG (H+L) (115-545-003). Afbeelding met dank aan Mansour et al (2008).

Brilliant Violet™ kleurstoffen

JIR biedt twee BD Brilliant Violet kleurstoffen, BV421 en BV480 (deze kleurstoffen zijn genoemd naar hun emissiemaxima, terwijl veel fluoroforen zijn genoemd naar de excitatiemaxima). BV-kleurstoffen zijn polymeerketens en kunnen worden beschouwd als een verzameling optische segmenten die elk licht kunnen absorberen en een fluorescentiesignaal kunnen afgeven. Dit resulteert in kleurstoffen met een helder fluorescentiesignaal voor een superieure resolutie en gevoeligheid.

Lees meer over Brilliant Violet™ conjugaten.

Cyaninekleurstoffen (Cy™2, Cy™3 en Cy™5)

Van de momenteel beschikbare fluorescente kleurstoffen zijn de cyaninekleurstoffen beter bestand tegen de ruwe dehydratatie- en inbeddingsomstandigheden die vereist zijn voor het inbedden van coupes in niet-polaire plastic inbedmedia zoals DPX en Permount™. De cyaninekleurstoffen zijn helderder in de apolaire omgeving dan in waterige media, waardoor de opnametijd korter is dan bij DyLight™- en Alexa Fluor®-kleurstoffen, ook al zijn deze helderder in waterige inbedmedia.

Lees meer over Cyanine conjugaten.

Fluorescente proteïnen – Phycoerythrine, PerCP en Allophycocyanine

Jackson ImmunoResearch biedt 3 fluorescerende proteïnen, Phycoerythrine (R-PE), Allophycocyanine (APC), en Peridinine-Chlorofyl-Proteïne (PerCP). R-PE en APC zijn licht-oogstende fycobiliproteïnen die voorkomen in rode, blauwgroene en cryptomonadische algen. Jackson ImmunoResearch biedt R-PE aan in de vorm die wordt aangetroffen in rode macrofytische algen (zeewier). APC wordt geïsoleerd uit de blauwgroene alg Spirulina. PerCP is een fluorescerend peridinine-chlorofyl-eiwitcomplex geïsoleerd uit dinoflagellaten. R-PE, PerCP en APC kunnen worden geëxciteerd door licht in een breed spectrum van het zichtbare spectrum, zijn goed oplosbaar in water, hebben een betrekkelijk laag isoëlektrisch punt en bevatten geen mogelijk kleverige koolhydraten. Er zij op gewezen dat het betrekkelijk hoge molecuulgewicht van deze fluorescente proteïnen het gebruik ervan kan uitsluiten voor procedures waarbij een goede penetratie in cellen en weefsels is vereist. Zij zijn voornamelijk bedoeld voor oppervlakte-labeling van cellen voor flowcytometry.

Lees meer over secundaire antilichamen voor flowcytometry.

Fluorescente Conjugaten Beschikbaar bij Jackson ImmunoResearch

De volgende zeventien fluorescente probes zijn momenteel beschikbaar bij Jackson ImmunoResearch. Klik op elke fluorofoor in de tabel voor meer informatie.

Fluorofoor Excitatiepiek (nm) Emissiepiek (nm)
DyLight™ 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Aminomethylcoumarine Acetaat, AMCA 350 450
Brilliant Violet 480™ 436 478
Cyanine, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluoresceïne, FITC/DTAF 492 520
Indocarbocyanine, Cy™3 550 570
R-Phycoerythrin, R-PE many, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allophycocyanin, APC many, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodicarbocyanine, Cy™5 650 670
Peridinin-Chlorophyll-Protein, PerCP veel, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Download tekstbestanden voor alle fluorescente kleurstofconjugaten om excitatie- en emissiespectra te vergelijken

Fluorescente probes verkrijgbaar bij Jackson ImmunoResearch. We hebben ook TRITC-conjugaten en een beperkte voorraad DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 en Texas Red®-conjugaten.

Spectra Viewer

Fluorescente probes of fluoroforen (fluorescerende kleurstoffen of eiwitten) zijn gekoppeld aan een secundair antilichaam of streptavidine om visualisatie van een analyt mogelijk te maken. Elke fluorofoor heeft zijn eigen spectrale kenmerken, met excitatie- en emissiespectra die eigen zijn aan het molecuul. Gebruik de spectraviewer om kleurstofpanels samen te stellen en de geschiktheid van kleurstoffen voor uw toepassing te vergelijken. Vier kleurstoffen die gewoonlijk worden aanbevolen voor meervoudige labeling zijn vooraf geladen, deze kunnen naar behoefte worden gewijzigd.

Lees onze blog over het selecteren van fluoroforen met behulp van de Spectra Viewer.

Top

Leave a Reply