Fluorofoorien ominaisuudet

Fluorofoorien ominaisuudet

JIR tarjoaa laajan valikoiman fluoresoivia konjugaatteja, jotka kattavat yleisimmin käytetyt herätelähteet ja suodatinsarjat sinisestä infrapunasäteilyyn. Seuraavissa tiedoissa kuvataan joitakin fluoresoivien väriaineperheiden ominaisuuksia ja sitä, missä niitä voidaan parhaiten käyttää. Tietoa yksittäisistä väriaineista löytyy valitsemalla väriaine alla olevasta taulukosta.

Lisätietoa fluoresenssiväriaineen valitsemisesta sovellukseesi on saatavilla fluoresenssiväriaineen valintasivulta.

Alexa Fluor® -fluoresenssiväriaineet

Alexa Fluor® -fluoresenssiväriaineet

Alexa Fluor® -fluoresenssiväriaineet ovat laajalti tunnustetusti ylivertaisia fluoresenssiväriaineita, ja ne ovat arvostettu kirkkautensa ja fotonkestävyytensä vuoksi. Ne ovat hyvin vesiliukoisia ja pysyvät fluoresoivina pH 4:stä pH 10:een.

Lue lisää Alexa Fluor® -konjugaateista.

IF-kuva rotan verkkokalvokudoksesta, joka on visualisoitu JIR:n Alexa Fluor®-konjugoiduilla sekundäärisillä vasta-aineilla
Rotan verkkokalvokudos, joka on visualisoitu Cy™5-streptavidiinilla (016-170-084) ja Alexa Fluor® 488-vuohen antihiiri-igg:llä (H+L) (115-545-003). Image courtesy of Mansour et al (2008).

Brilliant Violet™ -väriaineet

JIR tarjoaa kahta BD:n Brilliant Violet -väriainetta, BV421:tä ja BV480:tä (nämä väriaineet on nimetty emissiomaksimiensa mukaan, kun taas monet fluorofoorit on nimetty eksitaatiomaksimiensa mukaan). BV-väriaineet ovat polymeeriketjuja, ja niitä voidaan pitää optisten segmenttien kokoelmana, joilla kullakin on kyky absorboida valoa ja lähettää fluoresenssisignaalia. Näin saadaan väriaineita, joilla on kirkas fluoresenssisignaali, joka takaa erinomaisen resoluution ja herkkyyden.

Lue lisää Brilliant Violet™ -konjugaateista.

Syaniiniväriaineet (Cy™2, Cy™3 ja Cy™5)

Tänään saatavilla olevista fluoresenssiväriaineista syaniiniväriaineet kestävät paremmin ankarat dehydraatio- ja upotusolosuhteet, joita vaaditaan leikkeiden kiinnittämisessä ei-polaarisiin muovisiin kiinnitysalustoihin, kuten DPX:iin ja Permountiin. Syaniiniväriaineet ovat kirkkaampia poolittomassa ympäristössä kuin vesipitoisissa väliaineissa, mikä lyhentää kuvausaikaa verrattuna DyLight™- ja Alexa Fluor® -väriaineisiin, vaikka nämä väriaineet ovat kirkkaampia vesipitoisissa kiinnitysmedioissa.

Lue lisää syaniinikonjugaateista.

Fluoresoivia proteiineja – Phycoerythrin, PerCP ja Allophycocyanin

Jackson ImmunoResearch tarjoaa kolme fluoresoivaa proteiinia, Phycoerythrin (R-PE), Allophycocyanin (APC) ja Peridinin-Chlorophyll-Protein (PerCP). R-PE ja APC ovat valoa kerääviä fykobiliproteiineja, joita esiintyy puna-, sini- ja kryptomonadilevissä. Jackson ImmunoResearch tarjoaa R-PE:tä punaisissa makrofyyttisissä levissä (merilevissä) esiintyvässä muodossa. APC on eristetty sinilevä Spirulinasta. PerCP on fluoresoiva peridiini-klorofylli-proteiinikompleksi, joka on eristetty dinoflagellaateista. R-PE:tä, PerCP:tä ja APC:tä voidaan virittää valolla laajalla näkyvän spektrin alueella, ne ovat hyvin vesiliukoisia, niiden isoelektriset pisteet ovat suhteellisen alhaiset ja niistä puuttuvat mahdollisesti tahmeat hiilihydraatit. On huomattava, että näiden fluoresoivien proteiinien suhteellisen suuri molekyylipaino saattaa estää niiden käytön menetelmissä, jotka edellyttävät hyvää tunkeutumista soluihin ja kudoksiin. Ne on tarkoitettu pääasiassa solujen pintamerkintään virtaussytometriaa varten.

Lue lisää virtaussytometriassa käytettävistä sekundäärisistä vasta-aineista.

Fluoresoivia konjugaatteja saatavana Jackson ImmunoResearchilta

Jackson ImmunoResearchilta on tällä hetkellä saatavana seuraavat seitsemäntoista fluoresoivaa koetinta. Klikkaa kutakin fluorofooria taulukossa saadaksesi lisätietoja.

.

Fluorofori Exkitaatiopiikki (nm) Emissiopiikki (nm)
DyLight™. 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Aminometyylikumariiniasetaatti, AMCA 350 450
Brilliant Violet 480™ 436 478
Cyanine, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluoresceiini, FITC/DTAF 492 520
Indokarbosyaniini, Cy™3 550 570
R-Fykoerythriini, R-PE moni, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allofykosyaniini, APC many, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodikarbosyaniini, Cy™5 650 670
Peridiini-klorofylli-proteiini, PerCP moni, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Lataa kaikkien fluoresoivien väriainekonjugaattien tekstitiedostot, jotta voit verrata heräte- ja emissiospektrejä

Fluoresoivia koettimia on saatavana Jackson ImmunoResearchilta. Meillä on myös TRITC-konjugaatteja ja rajoitettu varasto DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649- ja Texas Red® -konjugaatteja.

Spectra Viewer

Fluoresoivia koettimia tai fluorofooreja (fluoresoivia väriaineita tai proteiineja) kytketään sekundääriseen vasta-aineeseen tai streptavidiiniin analyytin visualisoinnin mahdollistamiseksi. Jokaisella fluorofoorilla on omat spektriominaisuutensa, joissa on molekyylille ominaiset heräte- ja emissiospektrit. Käytä spektrien katseluohjelmaa väriainepaneelien muodostamiseen ja väriaineiden soveltuvuuden vertailemiseen sovellukseesi. Neljä väriainetta, joita tyypillisesti suositellaan useiden merkintöjen tekemiseen, on valmiiksi ladattu, ja niitä voidaan vaihtaa tarpeen mukaan.

Lue blogimme fluorofoorien valitsemisesta Spectra Viewer -ohjelman avulla.

Alkuun

Leave a Reply