Fluorophore karakteristika

Fluorophore karakteristika

JIR tilbyder et bredt udvalg af fluorescerende konjugater, der dækker de mest almindeligt anvendte excitationskilder og filtersæt fra blå til infrarød emission. Nedenstående oplysninger beskriver nogle af egenskaberne ved de fluorescerende farvestoffamilier, og hvor de bedst kan anvendes. Oplysninger om de enkelte farvestoffer kan findes ved at vælge farvestoffet i tabellen nedenfor.

Flere oplysninger om valg af en fluorofore til din anvendelse findes på siden om valg af fluorofore.

Alexa Fluor® Fluorescerende farvestoffer

Alexa Fluor® fluorescerende farvestoffer er bredt anerkendt som overlegne fluorescerende farvestoffer, der er respekteret for deres lysstyrke og fotostabilitet. De er meget vandopløselige og forbliver fluorescerende fra pH 4 til pH 10.

Læs mere om Alexa Fluor®-konjugater.

IF-billede af nethindevæv fra rotte visualiseret med JIR Alexa Fluor®-konjugerede sekundære antistoffer
Rat nethindevæv, visualiseret med Cy™5 Streptavidin (016-170-084) og Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (115-545-003). Billedet er venligst udlånt af Mansour et al (2008).

Brilliant Violet™-farvestoffer

JIR tilbyder to BD Brilliant Violet-farvestoffer, BV421 og BV480 (disse farvestoffer er navngivet efter deres emissionsmaksima, mens mange fluorophorer er navngivet efter excitationsmaksima). BV-farvestoffer er polymerkæder og kan betragtes som en samling af optiske segmenter, der hver især har evnen til at absorbere lys og udsende et fluorescenssignal. Dette resulterer i farvestoffer, der har et lyst fluorescenssignal for overlegen opløsning og følsomhed.

Læs mere om Brilliant Violet™-konjugater.

Cyaninfarvestoffer (Cy™2, Cy™3 og Cy™5)

Af de i øjeblikket tilgængelige fluorescerende farvestoffer er cyaninfarvestofferne bedre i stand til at modstå de barske dehydrerings- og indlejringsbetingelser, der kræves til indstøbning af sektioner i upolære plastindstøbningsmedier som DPX og Permount™. Cyaninfarvestofferne er lysere i det upolære miljø end i vandige medier, hvilket resulterer i en kortere optagelsestid sammenlignet med DyLight™- og Alexa Fluor®-farvestoffer, selv om disse farvestoffer er lysere i vandige indstøbningsmedier.

Læs mere om Cyaninkonjugater.

Fluorescerende proteiner – Phycoerythrin, PerCP og Allophycocyanin

Jackson ImmunoResearch tilbyder 3 fluorescerende proteiner, Phycoerythrin (R-PE), Allophycocyanin (APC) og Peridinin-Chlorophyll-Protein (PerCP). R-PE og APC er lyshøstende phycobiliproteiner, der findes i røde, blågrønne og kryptomonadealger. Jackson ImmunoResearch tilbyder R-PE i den form, der findes i røde makrofytiske alger (tang). APC er isoleret fra den blågrønne alge Spirulina. PerCP er et fluorescerende peridinin-chlorophyll-proteinkompleks, der er isoleret fra dinoflagellater. R-PE, PerCP og APC kan ophidses af lys i et bredt område af det synlige spektrum, er meget vandopløselige, har et relativt lavt isoelektrisk punkt og mangler potentielt klæbende kulhydrater. Det skal bemærkes, at den relativt høje molekylvægt af disse fluorescerende proteiner kan udelukke deres anvendelse i procedurer, der kræver god indtrængning i celler og væv. De er overvejende beregnet til overflademærkning af celler til flowcytometri.

Læs mere om sekundære antistoffer til flowcytometri.

Fluorescerende konjugater, der er tilgængelige fra Jackson ImmunoResearch

Følgende sytten fluorescerende prober er i øjeblikket tilgængelige fra Jackson ImmunoResearch. Klik på hver fluorofore i tabellen for at få flere oplysninger.

Fluorofore Excitation Peak (nm) Emission Peak (nm)
DyLight™ 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Aminomethylcumarinacetat, AMCA 350 450
Brilliant Violet 480™ 436 478
Cyanin, Cy™2 492 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluorescein, FITC/DTAF 492 520
Indocarbocyanin, Cy™3 550 570
R-Phycoerythrin, R-PE mangfoldigt, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allofycocyanin, APC mange, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodicarbocyanin, Cy™5 650 670
Peridinin-Chlorophyll-Protein, PerCP mange, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Download tekstfiler for alle konjugater af fluorescerende farvestoffer for at sammenligne excitations- og emissionsspektre

Fluorescerende sonder fås fra Jackson ImmunoResearch. Vi har også TRITC-konjugater og et begrænset lager af DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 og Texas Red®-konjugater.

Spectra Viewer

Fluorescerende sonder eller fluorophorer (fluorescerende farvestoffer eller proteiner) er koblet til et sekundært antistof eller streptavidin for at muliggøre visualisering af en analysand. Hver fluorofore har sine egne spektrale egenskaber med excitations- og emissionsspektrer, der er specifikke for molekylet. Brug spektralviseren til at opbygge farvestofpaneler og sammenligne farvestoffernes egnethed til din anvendelse. Fire farvestoffer, der typisk anbefales til multipel mærkning, er forudindlæst, disse kan ændres efter behov.

Læs vores blog om valg af fluoroforer ved hjælp af spektralfremviseren.

Top

Leave a Reply