Caractéristiques des fluorophores

Caractéristiques des fluorophores

JIR propose une large gamme de conjugués fluorescents, couvrant les sources d’excitation et les jeux de filtres les plus couramment utilisés, des émissions bleues aux émissions infrarouges. Les informations suivantes décrivent certaines des caractéristiques des familles de colorants fluorescents et les endroits où ils sont le mieux employés. Des informations sur les colorants individuels peuvent être trouvées en sélectionnant le colorant dans le tableau ci-dessous.

Des informations supplémentaires sur la sélection d’un fluorophore pour votre application sont disponibles sur la page de sélection des fluorophores.

Colorants fluorescents Alexa Fluor®

Les colorants fluorescents Alexa Fluor® sont largement reconnus comme des colorants fluorescents supérieurs, respectés pour leur brillance et leur photostabilité. Ils sont très solubles dans l’eau et restent fluorescents de pH 4 à pH 10.

En savoir plus sur les conjugués Alexa Fluor®.

Image IF de tissu rétinien de rat visualisé avec des anticorps secondaires conjugués à l'Alexa Fluor® de JIR
Tissu rétinien de rat, visualisé avec de la streptavidine Cy™5 (016-170-084) et de l’IgG anti-souris de chèvre (H+L) (115-545-003) Alexa Fluor® 488. Image reproduite avec l’aimable autorisation de Mansour et al (2008).

Colorants Brilliant Violet™

JIR propose deux colorants BD Brilliant Violet, BV421 et BV480 (ces colorants sont nommés pour leurs maxima d’émission, alors que de nombreux fluorophores sont nommés pour les maxima d’excitation). Les colorants BV sont des chaînes de polymères et peuvent être considérés comme une collection de segments optiques, chacun ayant la capacité d’absorber la lumière et d’émettre un signal de fluorescence. Il en résulte des colorants qui ont un signal de fluorescence lumineux pour une résolution et une sensibilité supérieures.

En savoir plus sur les conjugués Brilliant Violet™.

Cyanine dyes (Cy™2, Cy™3 et Cy™5)

Parmi les colorants fluorescents actuellement disponibles, les colorants cyanine sont mieux à même de résister aux conditions difficiles de déshydratation et d’inclusion requises pour le montage des sections dans des milieux de montage en plastique non polaire tels que DPX et Permount™. Les colorants cyanine sont plus brillants dans l’environnement non polaire que dans les milieux aqueux, ce qui permet de réduire le temps d’acquisition par rapport aux colorants DyLight™ et Alexa Fluor®, même si ces colorants sont plus brillants dans les milieux de montage aqueux.

Lire plus sur les conjugués de cyanine.

Protéines fluorescentes – Phycoérythrine, PerCP et Allophycocyanine

Jackson ImmunoResearch propose 3 protéines fluorescentes, la Phycoérythrine (R-PE), l’Allophycocyanine (APC) et la Peridinine-Chlorophylle-Protéine (PerCP). La R-PE et l’APC sont des phycobiliprotéines qui captent la lumière et que l’on trouve dans les algues rouges, bleues-vertes et cryptomonades. Jackson ImmunoResearch propose le R-PE sous la forme trouvée dans les algues macrophytes rouges (algues marines). APC est isolé de l’algue bleu-vert Spirulina. Le PerCP est un complexe péridinine-chlorophylle-protéine fluorescent isolé des dinoflagellés. Le R-PE, le PerCP et l’APC peuvent être excités par la lumière dans une large gamme du spectre visible, sont très solubles dans l’eau, ont des points isoélectriques relativement bas et sont dépourvus de glucides potentiellement collants. Il convient de noter que les poids moléculaires relativement élevés de ces protéines fluorescentes peuvent empêcher leur utilisation dans des procédures nécessitant une bonne pénétration dans les cellules et les tissus. Elles sont principalement destinées au marquage de surface des cellules pour la cytométrie en flux.

Lire plus sur les anticorps secondaires pour la cytométrie en flux.

Conjugués fluorescents disponibles chez Jackson ImmunoResearch

Les dix-sept sondes fluorescentes suivantes sont actuellement disponibles chez Jackson ImmunoResearch. Cliquez sur chaque fluorophore dans le tableau pour plus d’informations.

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Fluorophore Pic d’excitation (nm) Pic d’émission (nm)
DyLight™ 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Acétate d’aminométhylcoumarine, AMCA 350 450
Brilliant Violet 480™ 436 478
Cyanine, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluorescéine, FITC/DTAF 492 520
Indocarbocyanine, Cy™3 550 570
R-Phycoérythrine, R-PE multiples, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allophycocyanine, APC nombreux, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodicarbocyanine, Cy™5 650 670
Péridinine-Chlorophylle-Protéine, PerCP nombreux, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Télécharger les fichiers texte de tous les conjugués de colorants fluorescents pour comparer les spectres d’excitation et d’émission

Sondes fluorescentes disponibles chez Jackson ImmunoResearch. Nous disposons également de conjugués TRITC et d’un stock limité de conjugués DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 et Texas Red®.

Spectra Viewer

Les sondes fluorescentes ou fluorophores (colorants ou protéines fluorescents) sont couplés à un anticorps secondaire ou à la streptavidine pour permettre la visualisation d’un analyte. Chaque fluorophore possède ses propres caractéristiques spectrales, avec des spectres d’excitation et d’émission propres à la molécule. Utilisez le visualiseur de spectres pour construire des panels de colorants et comparer l’adéquation des colorants à votre application. Quatre colorants généralement recommandés pour le marquage multiple sont préchargés, ils peuvent être modifiés selon les besoins.

Lisez notre blog sur la sélection des fluorophores à l’aide du Spectra Viewer.

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