Fluorophore Characteristics

Fluorophore Characteristics

JIR erbjuder ett brett utbud av fluorescerande konjugat som täcker de vanligaste excitationskällorna och filteruppsättningarna från blå till infraröd emission. Följande information beskriver några av egenskaperna hos fluorescerande färgämnesfamiljer och var de bäst används. Information om enskilda färgämnen finns genom att välja färgämnet i tabellen nedan.

Fördjupad information om hur du väljer en fluorofor för din tillämpning finns på sidan för val av fluorofor.

Alexa Fluor® fluorescerande färgämnen

Alexa Fluor® fluorescerande färgämnen är allmänt erkända som överlägsna fluorescerande färgämnen, respekterade för sin ljusstyrka och fotostabilitet. De är mycket vattenlösliga och förblir fluorescerande från pH 4 till pH 10.

Läs mer om Alexa Fluor®-konjugat.

IF-bild av näthinnevävnad från råtta visualiserad med JIR Alexa Fluor®-konjugerade sekundära antikroppar
Näthinnevävnad från råtta, visualiserad med Cy™5 Streptavidin (016-170-084) och Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (115-545-003). Bilden är en artighet av Mansour et al (2008).

Brilliant Violet™ Färgämnen

JIR erbjuder två BD Brilliant Violet-färgämnen, BV421 och BV480 (dessa färgämnen är namngivna efter sina emissionsmaxima, medan många fluoroforer är namngivna efter sina excitationsmaxima). BV-färgämnen är polymerkedjor och kan betraktas som en samling optiska segment, vart och ett med förmåga att absorbera ljus och avge fluorescenssignal. Detta resulterar i färgämnen som har en ljus fluorescenssignal för överlägsen upplösning och känslighet.

Läs mer om Brilliant Violet™-konjugat.

Cyaninfärgämnen (Cy™2, Cy™3 och Cy™5)

Av de fluorescerande färgämnen som för närvarande finns tillgängliga har cyaninfärgämnena bättre förmåga att motstå de hårda dehydratiserings- och inbäddningsförhållanden som krävs för montering av sektioner i opolära plastmonteringsmedier, såsom DPX och Permount™. Cyaninfärgämnena är ljusare i den opolära miljön än i vattenhaltiga medier, vilket resulterar i minskad förvärvstid jämfört med DyLight™- och Alexa Fluor®-färgämnena, även om dessa färgämnen är ljusare i vattenhaltiga monteringsmedier.

Läs mer om cyaninkonjugat.

Fluorescerande proteiner – Phycoerythrin, PerCP och Allophycocyanin

Jackson ImmunoResearch erbjuder 3 fluorescerande proteiner, Phycoerythrin (R-PE), Allophycocyanin (APC) och Peridinin-Chlorophyll-Protein (PerCP). R-PE och APC är ljusskördande fykobiliproteiner som finns i röda, blågröna och kryptomonadalger. Jackson ImmunoResearch erbjuder R-PE i den form som finns i röda makrofytiska alger (tång). APC är isolerad från den blågröna algen Spirulina. PerCP är ett fluorescerande peridininklorofyllproteinkomplex isolerat från dinoflagellater. R-PE, PerCP och APC kan exciteras av ljus över ett brett område av det synliga spektrumet, är mycket vattenlösliga, har relativt låga isoelektriska punkter och saknar potentiellt klibbiga kolhydrater. Det bör noteras att den relativt höga molekylvikten hos dessa fluorescerande proteiner kan hindra dem från att användas i förfaranden som kräver god penetration i celler och vävnader. De är främst avsedda för ytmärkning av celler för flödescytometri.

Läs mer om sekundära antikroppar för flödescytometri.

Fluorescerande konjugat som finns tillgängliga från Jackson ImmunoResearch

Följande sjutton fluorescerande prober finns för närvarande tillgängliga från Jackson ImmunoResearch. Klicka på varje fluorofor i tabellen för mer information.

Fluorophore Excitation Peak (nm) Emission Peak (nm)
DyLight™. 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Aminometylkumarinacetat, AMCA 350 450
Brilliant Violet 480™ 436 478
Cyanin, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluorescein, FITC/DTAF 492 520
Indokarbocyanin, Cy™3 550 570
R-fykoerythrin, R-PE många, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allofykocyanin, APC många, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodikarbocyanin, Cy™5 650 670
Peridinin-khlorofyll-protein, PerCP många, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Ladda ner textfiler för alla fluorescerande färgämneskonjugat för att jämföra excitations- och emissionsspektra

Fluorescerande prober finns tillgängliga från Jackson ImmunoResearch. Vi har också TRITC-konjugat och ett begränsat lager av DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 och Texas Red®-konjugat.

Spectra Viewer

Fluorescerande prober eller fluoroforer (fluorescerande färgämnen eller proteiner) kopplas till en sekundär antikropp eller streptavidin för att möjliggöra visualisering av en analyt. Varje fluorofor har sina egna spektrala egenskaper, med excitations- och emissionsspektra som är specifika för molekylen. Använd spektrumvisaren för att bygga färgämnespaneler och jämföra färgämnenas lämplighet för din tillämpning. Fyra färgämnen som vanligtvis rekommenderas för multipel märkning är förinstallerade, dessa kan ändras efter behov.

Läs vår blogg om att välja fluorophorer med hjälp av Spectra Viewer.

Top

Leave a Reply