Charakterystyka fluoroforów

Charakterystyka fluoroforów

JIR oferuje szeroki zakres koniugatów fluorescencyjnych, obejmujący najczęściej używane źródła wzbudzenia i zestawy filtrów od emisji niebieskiej do podczerwonej. Poniższe informacje opisują niektóre z cech rodzin barwników fluorescencyjnych oraz miejsca ich najlepszego zastosowania. Informacje na temat poszczególnych barwników można znaleźć, wybierając barwnik z poniższej tabeli.

Dalsze informacje na temat wyboru fluoroforu do danego zastosowania są dostępne na stronie poświęconej wyborowi fluoroforu.

Barwniki fluorescencyjne Alexa Fluor®

Barwniki fluorescencyjne Alexa Fluor® są powszechnie uznawane za najwyższej jakości barwniki fluorescencyjne, cenione za jasność i fotostabilność. Są one wysoce rozpuszczalne w wodzie i pozostają fluorescencyjne od pH 4 do pH 10.

Dowiedz się więcej o koniugatach Alexa Fluor®.

 ObrazIF tkanki siatkówki szczura wizualizowanej za pomocą przeciwciał drugorzędowych JIR sprzężonych z Alexa Fluor®
Tkanka siatkówki szczura, wizualizowana za pomocą Cy™5 Streptawidyny (016-170-084) i Alexa Fluor® 488 koziej anty-mysiej IgG (H+L) (115-545-003). Obraz dzięki uprzejmości Mansour et al (2008).

Brilliant Violet™ Dyes

JIR oferuje dwa barwniki BD Brilliant Violet, BV421 i BV480 (barwniki te są nazwane dla ich maksimów emisji, podczas gdy wiele fluoroforów jest nazwanych dla maksimów wzbudzenia). Barwniki BV są łańcuchami polimerowymi i mogą być traktowane jako zbiór segmentów optycznych, z których każdy ma zdolność do absorbowania światła i emitowania sygnału fluorescencyjnego. Dzięki temu uzyskuje się barwniki, które mają jasny sygnał fluorescencyjny, zapewniający doskonałą rozdzielczość i czułość.

Czytaj więcej o koniugatach Brilliant Violet™.

Barwniki cyjaninowe (Cy™2, Cy™3 i Cy™5)

Pośród obecnie dostępnych barwników fluorescencyjnych, barwniki cyjaninowe lepiej znoszą trudne warunki odwodnienia i osadzania wymagane do montażu sekcji w niepolarnych plastikowych mediach montażowych, takich jak DPX i Permount™. Barwniki cyjaninowe są jaśniejsze w środowisku niepolarnym niż w środowisku wodnym, co powoduje skrócenie czasu akwizycji w porównaniu z barwnikami DyLight™ i Alexa Fluor®, mimo że te barwniki są jaśniejsze w wodnych mediach montażowych.

Czytaj więcej o koniugatach cyjaniny.

Białka fluorescencyjne – fikoerytryna, PerCP i allofykocyjanina

Jackson ImmunoResearch oferuje 3 białka fluorescencyjne, fikoerytrynę (R-PE), allofykocyjaninę (APC) i białko perydyny-chlorofilu (PerCP). R-PE i APC są zbierającymi światło fitobiliproteinami występującymi w czerwonych, niebiesko-zielonych i kryptomonadowych algach. Jackson ImmunoResearch oferuje R-PE w postaci występującej w czerwonych makrofitowych algach (wodorostach). APC jest izolowany z niebiesko-zielonej algi Spirulina. PerCP jest fluorescencyjnym kompleksem perydyna-chlorofil-białko wyizolowanym z dinoflagellatów. R-PE, PerCP i APC mogą być wzbudzane przez światło w szerokim zakresie spektrum widzialnego, są wysoce rozpuszczalne w wodzie, mają stosunkowo niskie punkty izoelektryczne i nie zawierają potencjalnie lepkich węglowodanów. Należy zauważyć, że stosunkowo duża masa cząsteczkowa tych białek fluorescencyjnych może wykluczać ich zastosowanie w procedurach wymagających dobrej penetracji do komórek i tkanek. Są one głównie przeznaczone do znakowania powierzchni komórek do cytometrii przepływowej.

Czytaj więcej o przeciwciałach drugorzędowych do cytometrii przepływowej.

Koniugaty fluorescencyjne dostępne w Jackson ImmunoResearch

Następujące siedemnaście sond fluorescencyjnych jest obecnie dostępnych w Jackson ImmunoResearch. Kliknij na każdy fluorofor w tabeli, aby uzyskać więcej informacji.

.

Fluorofor Szczyt wzbudzenia (nm) Szczyt emisji (nm)
DyLight™ 405 400 421
Fiolet brylantowy 421™ 407 421
Octan amometylokumaryny, AMCA 350 450
Fiolet brylantowy 480™ 436 478
Cyjanina, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluoresceina, FITC/DTAF 492 520
Indokarbocyjanina, Cy™3 550 570
R-Fykoerytryna, R-PE many, 488 580
Rhodamine Red™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Alofiocyjanina, APC many, 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodikarbocyjanina, Cy™5 650 670
Peridin-Chlorophyll-Protein, PerCP many, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Pobierz pliki tekstowe dla wszystkich koniugatów barwników fluorescencyjnych, aby porównać widma wzbudzenia i emisji

Sondy fluorescencyjne dostępne w Jackson ImmunoResearch. Mamy również koniugaty TRITC i ograniczone zapasy koniugatów DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 i Texas Red®.

Spectra Viewer

Sondy fluorescencyjne lub fluorofory (barwniki fluorescencyjne lub białka) są sprzężone z przeciwciałem wtórnym lub streptawidyną, aby umożliwić wizualizację analitu. Każdy fluorofor ma swoją własną charakterystykę spektralną, z widmami wzbudzenia i emisji charakterystycznymi dla danej cząsteczki. Użyj przeglądarki widm, aby zbudować panele barwników i porównać ich przydatność w danym zastosowaniu. Cztery barwniki typowo zalecane do wielokrotnego znakowania są wstępnie załadowane, można je zmienić zgodnie z wymaganiami.

Przeczytaj nasz blog o wyborze fluoroforów za pomocą Spectra Viewer.

Top

Leave a Reply