Charakterystyka fluoroforów
Charakterystyka fluoroforów
JIR oferuje szeroki zakres koniugatów fluorescencyjnych, obejmujący najczęściej używane źródła wzbudzenia i zestawy filtrów od emisji niebieskiej do podczerwonej. Poniższe informacje opisują niektóre z cech rodzin barwników fluorescencyjnych oraz miejsca ich najlepszego zastosowania. Informacje na temat poszczególnych barwników można znaleźć, wybierając barwnik z poniższej tabeli.
Dalsze informacje na temat wyboru fluoroforu do danego zastosowania są dostępne na stronie poświęconej wyborowi fluoroforu.
Barwniki fluorescencyjne Alexa Fluor®
Barwniki fluorescencyjne Alexa Fluor® są powszechnie uznawane za najwyższej jakości barwniki fluorescencyjne, cenione za jasność i fotostabilność. Są one wysoce rozpuszczalne w wodzie i pozostają fluorescencyjne od pH 4 do pH 10.
Dowiedz się więcej o koniugatach Alexa Fluor®.
Brilliant Violet™ Dyes
JIR oferuje dwa barwniki BD Brilliant Violet, BV421 i BV480 (barwniki te są nazwane dla ich maksimów emisji, podczas gdy wiele fluoroforów jest nazwanych dla maksimów wzbudzenia). Barwniki BV są łańcuchami polimerowymi i mogą być traktowane jako zbiór segmentów optycznych, z których każdy ma zdolność do absorbowania światła i emitowania sygnału fluorescencyjnego. Dzięki temu uzyskuje się barwniki, które mają jasny sygnał fluorescencyjny, zapewniający doskonałą rozdzielczość i czułość.
Czytaj więcej o koniugatach Brilliant Violet™.
Barwniki cyjaninowe (Cy™2, Cy™3 i Cy™5)
Pośród obecnie dostępnych barwników fluorescencyjnych, barwniki cyjaninowe lepiej znoszą trudne warunki odwodnienia i osadzania wymagane do montażu sekcji w niepolarnych plastikowych mediach montażowych, takich jak DPX i Permount™. Barwniki cyjaninowe są jaśniejsze w środowisku niepolarnym niż w środowisku wodnym, co powoduje skrócenie czasu akwizycji w porównaniu z barwnikami DyLight™ i Alexa Fluor®, mimo że te barwniki są jaśniejsze w wodnych mediach montażowych.
Czytaj więcej o koniugatach cyjaniny.
Białka fluorescencyjne – fikoerytryna, PerCP i allofykocyjanina
Jackson ImmunoResearch oferuje 3 białka fluorescencyjne, fikoerytrynę (R-PE), allofykocyjaninę (APC) i białko perydyny-chlorofilu (PerCP). R-PE i APC są zbierającymi światło fitobiliproteinami występującymi w czerwonych, niebiesko-zielonych i kryptomonadowych algach. Jackson ImmunoResearch oferuje R-PE w postaci występującej w czerwonych makrofitowych algach (wodorostach). APC jest izolowany z niebiesko-zielonej algi Spirulina. PerCP jest fluorescencyjnym kompleksem perydyna-chlorofil-białko wyizolowanym z dinoflagellatów. R-PE, PerCP i APC mogą być wzbudzane przez światło w szerokim zakresie spektrum widzialnego, są wysoce rozpuszczalne w wodzie, mają stosunkowo niskie punkty izoelektryczne i nie zawierają potencjalnie lepkich węglowodanów. Należy zauważyć, że stosunkowo duża masa cząsteczkowa tych białek fluorescencyjnych może wykluczać ich zastosowanie w procedurach wymagających dobrej penetracji do komórek i tkanek. Są one głównie przeznaczone do znakowania powierzchni komórek do cytometrii przepływowej.
Czytaj więcej o przeciwciałach drugorzędowych do cytometrii przepływowej.
Koniugaty fluorescencyjne dostępne w Jackson ImmunoResearch
Następujące siedemnaście sond fluorescencyjnych jest obecnie dostępnych w Jackson ImmunoResearch. Kliknij na każdy fluorofor w tabeli, aby uzyskać więcej informacji.
Fluorofor | Szczyt wzbudzenia (nm) | Szczyt emisji (nm) |
---|---|---|
DyLight™ 405 | 400 | 421 |
Fiolet brylantowy 421™ | 407 | 421 |
Octan amometylokumaryny, AMCA | 350 | 450 |
Fiolet brylantowy 480™ | 436 | 478 |
Cyjanina, Cy™2 | 492 | 510 |
Alexa Fluor® 488 | 493 | 519 |
Fluoresceina, FITC/DTAF | 492 | 520 |
Indokarbocyjanina, Cy™3 | 550 | 570 |
R-Fykoerytryna, R-PE | many, 488 | 580 |
Rhodamine Red™-X, RRX | 570 | 590 |
Alexa Fluor® 594 | 591 | 614 |
Alofiocyjanina, APC | many, 650 | 660 |
Alexa Fluor® 647 | 651 | 667 |
Indodikarbocyjanina, Cy™5 | 650 | 670 |
Peridin-Chlorophyll-Protein, PerCP | many, 488 | 675 |
Alexa Fluor® 680 | 684 | 702 |
Alexa Fluor® 790 | 792 | 803 |
Pobierz pliki tekstowe dla wszystkich koniugatów barwników fluorescencyjnych, aby porównać widma wzbudzenia i emisji
Sondy fluorescencyjne dostępne w Jackson ImmunoResearch. Mamy również koniugaty TRITC i ograniczone zapasy koniugatów DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 i Texas Red®.
Spectra Viewer
Sondy fluorescencyjne lub fluorofory (barwniki fluorescencyjne lub białka) są sprzężone z przeciwciałem wtórnym lub streptawidyną, aby umożliwić wizualizację analitu. Każdy fluorofor ma swoją własną charakterystykę spektralną, z widmami wzbudzenia i emisji charakterystycznymi dla danej cząsteczki. Użyj przeglądarki widm, aby zbudować panele barwników i porównać ich przydatność w danym zastosowaniu. Cztery barwniki typowo zalecane do wielokrotnego znakowania są wstępnie załadowane, można je zmienić zgodnie z wymaganiami.
Przeczytaj nasz blog o wyborze fluoroforów za pomocą Spectra Viewer.
Top
Leave a Reply