Caratteristiche dei fluorofori

Caratteristiche dei fluorofori

JIR offre una vasta gamma di coniugati fluorescenti, che copre le fonti di eccitazione e i set di filtri più comunemente usati, dal blu alle emissioni infrarosse. Le seguenti informazioni descrivono alcune delle caratteristiche delle famiglie di coloranti fluorescenti e dove sono meglio impiegate. Le informazioni sui singoli coloranti possono essere trovate selezionando il colorante dalla tabella sottostante.

Ulteriori informazioni sulla selezione di un fluoroforo per la vostra applicazione sono disponibili nella pagina di selezione dei fluorofori.

Coloranti fluorescenti Alexa Fluor®

I coloranti fluorescenti Alexa Fluor® sono ampiamente riconosciuti come coloranti fluorescenti superiori, rispettati per la loro luminosità e fotostabilità. Sono altamente solubili in acqua e rimangono fluorescenti da pH 4 a pH 10.

Leggi di più sui coniugati Alexa Fluor®.

Immagine IF di tessuto retinico di ratto visualizzato con anticorpi secondari coniugati con Alexa Fluor® di JIR
Tessuto retinico di ratto, visualizzato con Cy™5 Streptavidin (016-170-084) e Alexa Fluor® 488 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) (115-545-003). Immagine per gentile concessione di Mansour et al (2008).

Coloranti Brilliant Violet™

JIR offre due coloranti BD Brilliant Violet, BV421 e BV480 (questi coloranti sono chiamati per i loro massimi di emissione, mentre molti fluorofori sono chiamati per i massimi di eccitazione). I coloranti BV sono catene polimeriche e possono essere considerati come un insieme di segmenti ottici, ciascuno con la capacità di assorbire la luce ed emettere un segnale di fluorescenza. Questo si traduce in coloranti che hanno un segnale di fluorescenza luminoso per una risoluzione e una sensibilità superiori.

Leggi di più sui coniugati Brilliant Violet™.

Coloranti cianinici (Cy™2, Cy™3 e Cy™5)

Tra i coloranti fluorescenti attualmente disponibili, i coloranti cianinici sono in grado di resistere meglio alle dure condizioni di disidratazione e incorporazione richieste per il montaggio di sezioni in supporti plastici non polari come DPX e Permount™. I coloranti cianina sono più luminosi in ambiente non polare che in mezzi acquosi, con conseguente riduzione del tempo di acquisizione rispetto ai coloranti DyLight™ e Alexa Fluor®, anche se questi coloranti sono più luminosi in mezzi di montaggio acquosi.

Leggi di più sui coniugati di cianina.

Proteine fluorescenti – Phycoerythrin, PerCP e Allophycocyanin

Jackson ImmunoResearch offre 3 proteine fluorescenti, Phycoerythrin (R-PE), Allophycocyanin (APC), e Peridinin-Chlorophyll-Protein (PerCP). R-PE e APC sono ficobiliproteine che raccolgono la luce e si trovano nelle alghe rosse, blu-verdi e criptomonadi. Jackson ImmunoResearch offre R-PE nella forma trovata nelle alghe rosse macrofite (alghe marine). L’APC è isolato dall’alga blu-verde Spirulina. PerCP è un complesso peridina-clorofilla-proteina fluorescente isolato dai dinoflagellati. R-PE, PerCP e APC possono essere eccitati dalla luce in un’ampia gamma dello spettro visibile, sono altamente solubili in acqua, hanno punti isoelettrici relativamente bassi e non hanno carboidrati potenzialmente appiccicosi. Va notato che i pesi molecolari relativamente alti di queste proteine fluorescenti possono precludere il loro uso in procedure che richiedono una buona penetrazione in cellule e tessuti. Essi sono prevalentemente destinati all’etichettatura superficiale delle cellule per la citometria a flusso.

Leggi di più sugli anticorpi secondari per la citometria a flusso.

Coniugati fluorescenti disponibili da Jackson ImmunoResearch

Le seguenti diciassette sonde fluorescenti sono attualmente disponibili da Jackson ImmunoResearch. Clicca su ogni fluoroforo nella tabella per ulteriori informazioni.

Fluoroforo Picco di eccitazione (nm) Picco di emissione (nm)
DyLight™ 405 400 421
Brilliant Violet 421™ 407 421
Aminomethylcoumarin Acetate, AMCA 350 450
Viola brillante 480™ 436 478
Cianina, Cy™2 492 510
Alexa Fluor® 488 493 519
Fluoresceina, FITC/DTAF 492 520
Indocarbocianina, Cy™3 550 570
R-ficoeritrina, R-PE molti, 488 580
Rosso di Rodamina™-X, RRX 570 590
Alexa Fluor® 594 591 614
Allophycocyanin, APC molto 650 660
Alexa Fluor® 647 651 667
Indodicarbocianina, Cy™5 650 670
Peridinin-Chlorophyll-Protein, PerCP molti, 488 675
Alexa Fluor® 680 684 702
Alexa Fluor® 790 792 803

Scaricare i file di testo per tutti i coniugati di coloranti fluorescenti per confrontare gli spettri di eccitazione ed emissione

Sonde fluorescenti disponibili da Jackson ImmunoResearch. Abbiamo anche coniugati TRITC e uno stock limitato di coniugati DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 e Texas Red®.

Spectra Viewer

Sonde fluorescenti o fluorofori (coloranti o proteine fluorescenti) sono accoppiati a un anticorpo secondario o streptavidina per consentire la visualizzazione di un analita. Ogni fluoroforo ha le sue caratteristiche spettrali, con spettri di eccitazione ed emissione particolari alla molecola. Utilizzare il visualizzatore di spettri per costruire pannelli di coloranti e confrontare l’idoneità dei coloranti per la vostra applicazione. Quattro coloranti tipicamente raccomandati per l’etichettatura multipla sono precaricati, questi possono essere cambiati come richiesto.

Leggi il nostro blog sulla selezione dei fluorofori usando il visualizzatore di spettri.

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