Charakteristika fluoroforu
Charakteristika fluoroforu
JIR nabízí širokou škálu fluorescenčních konjugátů, které pokrývají nejčastěji používané excitační zdroje a sady filtrů od modré až po infračervenou emisi. Následující informace popisují některé vlastnosti rodin fluorescenčních barviv a místa jejich nejlepšího použití. Informace o jednotlivých barvivech naleznete výběrem barviva z níže uvedené tabulky.
Další informace o výběru fluoroforu pro vaši aplikaci naleznete na stránce výběru fluoroforu.
Fluorescenční barviva Alexa Fluor®
Fluorescenční barviva Alexa Fluor® jsou všeobecně uznávána jako vynikající fluorescenční barviva, respektovaná pro svůj jas a fotostabilitu. Jsou dobře rozpustná ve vodě a zůstávají fluorescenční od pH 4 do pH 10.
Přečtěte si více o konjugátech Alexa Fluor®.
Barviva Brilliant Violet™
JIR nabízí dvě barviva BD Brilliant Violet, BV421 a BV480 (tato barviva jsou pojmenována podle svých emisních maxim, zatímco mnoho fluoroforů je pojmenováno podle excitačních maxim). Barviva BV jsou polymerní řetězce a lze je považovat za soubor optických segmentů, z nichž každý má schopnost absorbovat světlo a emitovat fluorescenční signál. Výsledkem jsou barviva, která mají jasný fluorescenční signál pro vynikající rozlišení a citlivost.
Přečtěte si více o konjugátech Brilliant Violet™.
Cyaninová barviva (Cy™2, Cy™3 a Cy™5)
Mezi v současnosti dostupnými fluorescenčními barvivy jsou cyaninová barviva schopna lépe odolávat náročným podmínkám dehydratace a zakládání, které jsou nutné pro montáž řezů do nepolárních plastových montážních médií, jako jsou DPX a Permount™. Kyaninová barviva jsou v nepolárním prostředí jasnější než ve vodných médiích, což vede ke zkrácení doby akvizice ve srovnání s barvivy DyLight™ a Alexa Fluor®, i když jsou tato barviva ve vodných montážních médiích jasnější.
Přečtěte si více o kyaninových konjugátech.
Fluorescenční proteiny – fykoerythrin, PerCP a alophycocyanin
Jackson ImmunoResearch nabízí 3 fluorescenční proteiny: fykoerythrin (R-PE), alophycocyanin (APC) a peridinin-chlorofyl-protein (PerCP). R-PE a APC jsou fykobiliproteiny sbírající světlo, které se nacházejí v červených, modrozelených a kryptomonádových řasách. Společnost Jackson ImmunoResearch nabízí R-PE ve formě, která se nachází v červených makrofytních řasách (mořské řasy). APC je izolován ze sinice Spirulina. PerCP je fluorescenční peridinin-chlorofyl-proteinový komplex izolovaný z dinoflagelátů. R-PE, PerCP a APC mohou být excitovány světlem v širokém rozsahu viditelného spektra, jsou dobře rozpustné ve vodě, mají relativně nízký izoelektrický bod a postrádají potenciálně lepivé sacharidy. Je třeba poznamenat, že relativně vysoká molekulová hmotnost těchto fluorescenčních proteinů může bránit jejich použití v postupech vyžadujících dobrý průnik do buněk a tkání. Jsou určeny převážně pro povrchové značení buněk pro průtokovou cytometrii.
Přečtěte si více o sekundárních protilátkách pro průtokovou cytometrii.
Fluorescenční konjugáty dostupné od společnosti Jackson ImmunoResearch
V současné době je od společnosti Jackson ImmunoResearch k dispozici následujících sedmnáct fluorescenčních sond. Pro více informací klikněte na jednotlivé fluorofory v tabulce.
Fluorofor | Excitační pík (nm) | Emisní pík (nm) |
---|---|---|
DyLight™. 405 | 400 | 421 |
Brilantní fialová 421™ | 407 | 421 |
Aminometylkumarin acetát, AMCA | 350 | 450 |
Brilantní fialová 480™ | 436 | 478 |
Cyanin, Cy™2 | 492 | 510 |
Alexa Fluor® 488 | 493 | 519 |
Fluorescein, FITC/DTAF | 492 | 520 |
Indokarbocyanin, Cy™3 | 550 | 570 |
R-fykoerytrin, R-PE | mnoho, 488 | 580 |
Rhodaminová červeň™-X, RRX | 570 | 590 |
Alexa Fluor® 594 | 591 | 614 |
Allophycocyanin, APC | mnoho, 650 | 660 |
Alexa Fluor® 647 | 651 | 667 |
Indodikarbocyanin, Cy™5 | 650 | 670 |
Peridinin-chlorofyl-protein, PerCP | mnoho, 488 | 675 |
Alexa Fluor® 680 | 684 | 702 |
Alexa Fluor® 790 | 792 | 803 |
Stáhněte si textové soubory pro všechny konjugáty fluorescenčních barviv pro porovnání excitačních a emisních spekter
Fluorescenční sondy dostupné od společnosti Jackson ImmunoResearch. Máme také konjugáty TRITC a omezené zásoby konjugátů DyLight™ 488 / 549 / 594 / 649 a Texas Red®.
Prohlížeč spekter
Fluorescenční sondy nebo fluorofory (fluorescenční barviva nebo proteiny) jsou spojeny se sekundární protilátkou nebo streptavidinem, aby umožnily vizualizaci analytu. Každý fluorofor má své vlastní spektrální charakteristiky s excitačním a emisním spektrem specifickým pro danou molekulu. Pomocí prohlížeče spekter můžete sestavit panely barviv a porovnat vhodnost barviv pro vaši aplikaci. Předinstalována jsou čtyři barviva obvykle doporučovaná pro vícenásobné značení, která lze podle potřeby měnit.
Přečtěte si náš blog o výběru fluoroforů pomocí prohlížeče spekter.
Nahoru
Leave a Reply