Un kit de herramientas «Brainbow» ampliado para el etiquetado fluorescente de células en ratones

La complejidad del cerebro y otros órganos hace que la identificación de las conexiones entre las células individuales sea un reto desalentador. El desarrollo de la tecnología «Brainbow» ha permitido grandes avances en la obtención de imágenes al explotar el sistema Cre/lox para asignar aleatoriamente a cada célula una combinación única de proteínas fluorescentes rojas, amarillas y azules (Livet et al. 2007). El sistema funciona de forma similar a los tubos de rayos catódicos, que combinan luz roja, verde y azul para generar todo el espectro de colores en una pantalla de televisión. Los ratones Brainbow desarrollados recientemente por el laboratorio de Joshua Sanes en Harvard amplían el conjunto de herramientas con mejores cepas para estudiar cómo se interrelacionan las neuronas (Cai et al. 2013), mientras que otras cepas relacionadas llevan la tecnología Brainbow a todo el ratón (Snippert et al. 2010; Tabansky et al. 2013).

Las nuevas líneas Brainbow (denominadas Brainbow 3.1 y 3.2) ofrecen varias ventajas sobre los modelos Brainbow originales:

• A diferencia de las cepas originales, no hay fluorescencia antes de la recombinación de Cre que pueda complicar la obtención de imágenes.
• La orientación de las proteínas fluorescentes a las membranas permite una mejor visualización de los procesos neuronales y las espinas dendríticas.
• La fluorescencia es más brillante, especialmente en los ratones Brainbow 3.2.

El Jackson Laboratory distribuye dos cepas diferentes de Brainbow 3.1, STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)3Jrs/J (021225) y STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)18Jrs/J (021226), que se dirigen a muchos tipos de neuronas . Una cepa Brainbow 3.2, con expresión mejorada de la proteína fluorescente, está disponible como STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.2)7Jrs/J (021227).

Brainbow ya no es sólo para cerebros. La tecnología se ha adaptado para su uso general en cualquier parte del ratón. Cepas como «Confetti», B6.129P2-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-Brainbow2.1)Cle/J (017492), llevan una inserción de un transgén Brainbow en el locus Rosa26 que se expresa en todo el ratón (Snippert et al. 2010). Ahora se pueden etiquetar células individuales en prácticamente cualquier tipo de tejido mediante el apareamiento de ratones Confetti con ratones transgénicos Cre que se dirigen a tejidos específicos. Los ratones Confetti se han utilizado para comprender cómo se dividen las células madre en los intestinos, los pulmones, la médula ósea y otros tejidos. B6(D2)-Tg(CAG-Brainbow1.0)2Eggn/J (021011) es una cepa similar que utiliza el promotor de la actina para etiquetar células en cualquier parte del ratón con uno de hasta 21 colores diferentes tras la recombinación Cre (Tabansky, et al. 2013).

El conjunto de herramientas ampliado de Brainbow contiene ahora un conjunto diverso de cepas para obtener imágenes de diferentes tejidos en todo el ratón y para apoyar la disección de funciones y arquitecturas celulares complejas.

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