Egy kibővített “Brainbow” eszközkészlet sejtek fluoreszcens jelölésére egerekben

Az agy és más szervek összetettsége miatt az egyes sejtek közötti kapcsolatok azonosítása nagy kihívást jelent. A “Brainbow” technológia kifejlesztése nagy előrelépést tett lehetővé a képalkotásban azáltal, hogy a Cre/lox rendszert kihasználva minden egyes sejthez véletlenszerűen hozzárendelhető a vörös, sárga és kék fluoreszcens fehérjék egyedi kombinációja (Livet és mtsai. 2007). A rendszer hasonlóan működik, mint a katódsugárcsövek, amelyek a vörös, zöld és kék fényt kombinálva a teljes színspektrumot hozzák létre a televízió képernyőjén. A Harvardon Joshua Sanes laboratóriumában nemrégiben kifejlesztett Brainbow egerek jobb törzsekkel bővítik az eszköztárat az idegsejtek egymáshoz való viszonyának tanulmányozására (Cai és mtsai. 2013), míg más rokon törzsek a Brainbow technológiát az egér egészére kiterjesztik (Snippert és mtsai. 2010; Tabansky és mtsai. 2013).

Az új Brainbow-vonalak (Brainbow 3.1 és 3.2 néven) számos előnyt kínálnak az eredeti Brainbow-modellekhez képest:

• Az eredeti törzsekkel ellentétben a Cre-rekombináció előtt nincs fluoreszcencia, ami megnehezítheti a képalkotást.
• A fluoreszcens fehérjék membránokra történő célzása lehetővé teszi a neuronális folyamatok és a dendritikus gerincek jobb vizualizálását.
• A fluoreszcencia fényesebb, különösen a Brainbow 3.2 egereknél.

A Jackson Laboratory két különböző Brainbow 3.0 vonalú egeret forgalmaz.1 törzsek, a STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)3Jrs/J (021225) és a STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)18Jrs/J (021226), amelyek számos neuron-típust céloznak meg. A fokozott fluoreszcens fehérje expresszióval rendelkező Brainbow 3.2 törzs STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.2)7Jrs/J (021227) néven áll rendelkezésre.

A Brainbow már nem csak az agyak számára készült. A technológiát általános felhasználásra adaptálták bárhol az egérben. Az olyan törzsek, mint a “Confetti”, B6.129P2-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-Brainbow2.1)Cle/J (017492), egy olyan Brainbow transzgént hordoznak a Rosa26 lókuszban, amely az egész egérben kifejeződik (Snippert et al. 2010). A Confetti egerek és a specifikus szöveteket célzó Cre transzgénikus egerek párosításával most már gyakorlatilag bármilyen szövettípusban jelölhetők egyes sejtek. A Confetti egereket arra használták, hogy megértsék, hogyan osztódnak az őssejtek a belekben, a tüdőben, a csontvelőben és más szövetekben. A B6(D2)-Tg(CAG-Brainbow1.0)2Eggn/J (021011) egy hasonló törzs, amely az aktin promótert használja arra, hogy Cre-rekombinációt követően az egérben bárhol lévő sejteket akár 21 különböző színnel jelölje (Tabansky, et al. 2013).

A kibővített Brainbow eszközkészlet most már sokféle törzset tartalmaz a különböző szövetek egérszerte történő leképezéséhez és az összetett sejtfunkciók és architektúrák feltárásának támogatásához.