ReviewGUV-förberedelse och avbildning: Minimering av artefakter

Komponenterna i biologiska membran finns i en fysisk blandning. De icke slumpmässiga sätt på vilka molekylerna av lipider och proteiner blandas samman kan starkt påverka proteinernas förening med varandra och de kemiska reaktioner som sker i membranet eller som medieras av membranet. En särskild typ av icke slumpmässig blandning är separationen av sammansättningsmässigt skilda faser. En sådan fasseparation skulle leda till att vissa proteiner och lipider fördelas mellan de existerande faserna, vilket skulle påverka vilka proteiner som kan komma i kontakt med varandra och om ett protein kan hitta sitt mål. Fasuppdelningen i ett plasmamembran skulle också påverka bindningen av molekyler utanför cellen till membranet, inklusive igenkänningsproteiner på virus, bakterier och andra celler. Begreppet dessa och andra händelser som är förknippade med membranens fasseparation grupperas ibland som ”raftmodellen” för biologiska membran. Flera typer av experiment syftar till att upptäcka och karakterisera membranfasseparation. Visualisering av fasseparation har ett särskilt värde, både för att omblandbarheten är så avgörande bestämd och för att typen av fas ofta kan identifieras. Fluorescensmikroskopet har visat sig vara unikt användbart för att ge bilder av separerade faser, både i vissa cellpreparat och särskilt i modeller av cellmembran. Här diskuterar vi sätt att förbereda användbara modellmembran för bildstudier och hur man undviker några av de artefakter som kan plåga dessa studier.