RevisiónPreparación e imagen de la GUV: Minimizando los artefactos

Los componentes de las membranas biológicas están presentes en una mezcla física. Las formas no aleatorias en que se mezclan las moléculas de lípidos y proteínas pueden influir fuertemente en la asociación de las proteínas entre sí, y en las reacciones químicas que ocurren en la membrana, o que son mediadas por la membrana. Un tipo particular de mezcla no aleatoria es la separación de fases de composición distinta. Cualquier separación de fases de este tipo daría lugar a una partición preferencial de algunas proteínas y lípidos entre las fases coexistentes, y por lo tanto influiría en qué proteínas podrían estar en contacto, y si una proteína podría encontrar su objetivo. La separación de fases en una membrana plasmática también influiría en la unión de moléculas de fuera de la célula a la membrana, incluidas las proteínas de reconocimiento de virus, bacterias y otras células. El concepto de estos y otros acontecimientos asociados a la separación de fases de la membrana se agrupa a veces como el «modelo de balsa» de las membranas biológicas. Hay varios tipos de experimentos destinados a detectar y caracterizar la separación de fases de las membranas. La visualización de la separación de fases tiene un valor especial, tanto porque la inmiscibilidad se determina de forma decisiva, como porque a menudo se puede identificar el tipo de fase. El microscopio de fluorescencia ha demostrado ser especialmente útil para obtener imágenes de las fases separadas, tanto en ciertas preparaciones celulares, como especialmente en modelos de membranas celulares. Aquí discutimos las formas de preparar membranas modelo útiles para los estudios de imagen, y cómo evitar algunos de los artefactos que pueden plagar estos estudios.

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