ReviewGUV preparation and imaging: Minimizing artifacts

Biologisten kalvojen komponentit ovat fyysisessä seoksessa. Epäsäännölliset tavat, joilla lipidien ja proteiinien molekyylit sekoittuvat keskenään, voivat vaikuttaa voimakkaasti proteiinien assosiaatioon toistensa kanssa ja kemiallisiin reaktioihin, jotka tapahtuvat kalvossa tai joita kalvo välittää. Erityinen ei-sattumanvaraisen sekoittumisen tyyppi on koostumukseltaan erilaisten faasien erottuminen toisistaan. Tällainen faasierottelu johtaisi joidenkin proteiinien ja lipidien ensisijaiseen jakautumiseen rinnakkaisten faasien välillä ja vaikuttaisi siten siihen, mitkä proteiinit voivat olla kosketuksissa keskenään ja voiko proteiini löytää kohteensa. Plasmakalvon faasierottelu vaikuttaisi myös solun ulkopuolelta tulevien molekyylien, kuten virusten, bakteerien ja muiden solujen tunnistusproteiinien, sitoutumiseen kalvoon. Nämä ja muut kalvon faasierotteluun liittyvät tapahtumat ryhmitellään joskus biologisten kalvojen ”lauttamalliksi”. Monenlaisilla kokeilla pyritään havaitsemaan ja luonnehtimaan kalvojen vaiheiden erottumista. Faasierotuksen visualisoinnilla on erityistä arvoa sekä siksi, että sekoittumattomuus määräytyy niin ratkaisevasti, että myös siksi, että faasityyppi voidaan usein tunnistaa. Fluoresenssimikroskooppi on osoittautunut ainutlaatuisen käyttökelpoiseksi erottuneiden faasien kuvien saamiseksi sekä tietyissä soluvalmisteissa että erityisesti solukalvomalleissa. Tässä käsitellään tapoja valmistaa käyttökelpoisia mallikalvoja kuvatutkimuksia varten ja sitä, miten voidaan välttää joitakin näitä tutkimuksia vaivaavia artefakteja.

Leave a Reply