ReviewGUV preparation and imaging: Minimizarea artefactelor

Componentele membranelor biologice sunt prezente într-un amestec fizic. Modurile nealeatorii în care se amestecă moleculele de lipide și proteine pot influența puternic asocierea proteinelor între ele, precum și reacțiile chimice care au loc în membrană sau care sunt mediate de membrană. Un tip particular de amestecare nealeatorie este separarea unor faze distincte din punct de vedere al compoziției. Orice astfel de separare a fazelor ar duce la împărțirea preferențială a unor proteine și lipide între fazele coexistente și, astfel, ar influența ce proteine ar putea fi în contact și dacă o proteină ar putea să-și găsească ținta. Separarea fazelor într-o membrană plasmatică ar influența, de asemenea, legarea moleculelor din afara celulei la membrană, inclusiv a proteinelor de recunoaștere de pe viruși, bacterii și alte celule. Conceptul acestor evenimente și al altor evenimente asociate cu separarea fazelor membranare sunt uneori grupate împreună sub denumirea de „modelul raft” al membranelor biologice. Mai multe tipuri de experimente au ca scop detectarea și caracterizarea separării fazelor membranare. Vizualizarea separării fazelor are o valoare deosebită, atât pentru că imiscibilitatea este determinată în mod decisiv, cât și pentru că tipul de fază poate fi adesea identificat. Microscopul cu fluorescență s-a dovedit deosebit de util pentru obținerea de imagini ale fazelor separate, atât în anumite preparate celulare, cât mai ales în modele de membrane celulare. Aici discutăm modalitățile de a pregăti membrane model utile pentru studii de imagine și cum să evităm unele dintre artefactele care pot afecta aceste studii.

.