ReviewGUV preparação e imagem: Minimização de artefatos

Os componentes das membranas biológicas estão presentes em uma mistura física. As formas não convencionais em que as moléculas de lipídios e proteínas se misturam podem influenciar fortemente a associação de proteínas entre si, e as reações químicas que ocorrem na membrana, ou que são mediadas pela membrana. Um tipo particular de mistura não-randomial é a separação de fases compostas de forma distinta. Qualquer separação de fases desse tipo resultaria na divisão preferencial de algumas proteínas e lipídios entre as fases coexistentes, e assim influenciaria quais proteínas poderiam estar em contato, e se uma proteína poderia encontrar seu alvo. A separação de fases em uma membrana plasmática também influenciaria a ligação de moléculas do exterior da célula à membrana, incluindo proteínas de reconhecimento em vírus, bactérias e outras células. O conceito destes e de outros eventos associados à separação de fases da membrana são às vezes agrupados como o “modelo de jangada” das membranas biológicas. Vários tipos de experimentos têm como objetivo detectar e caracterizar a separação de fases da membrana. A visualização da separação de fases tem um valor especial, tanto porque a imiscibilidade é tão decisivamente determinada, como também porque o tipo de fase pode muitas vezes ser identificado. O microscópio de fluorescência provou ser de utilidade única para produzir imagens de fases separadas, tanto em certas preparações celulares, como especialmente em modelos de membranas celulares. Aqui discutimos formas de preparar modelos de membranas úteis para estudos de imagem, e como evitar alguns dos artefatos que podem atormentar esses estudos.