Centro de Microscopia Integrado

Similar a um micrótomo padrão, um criostato funciona para obter seções finas (1-10 mm de espessura) de um pedaço de tecido, mas enquanto um micrótomo padrão realiza a operação à temperatura ambiente, o criostato permite ao operador seccionar o tecido a baixa temperatura (-20 a -30 C). Em um criostato, a lâmina e a amostra estão localizadas dentro de um freezer/câmara estacionária vertical, enquanto a roda para girar o suporte da amostra está localizada externamente.

Os tecidos para o seccionamento do criostato não precisam ser fixados em formalina durante horas ou dias, como é o caso da histologia de rotina. Em vez disso, os tecidos são imediatamente criofixados após a amostragem. Para criofixação, os pedaços de tecido são colocados em um meio viscoso, semelhante a um gel (OCT) e são mergulhados em isopentano resfriado com gelo seco ou nitrogênio líquido.

Para a seccionamento, os blocos de tecido OCT congelados são colocados em uma placa metálica que leva sua temperatura a -20 a -30 C. Uma vez atingida essa temperatura, a amostra é montada no mandril do micrótomo e seccionada. Uma vez obtidas seções de qualidade satisfatória, elas são montadas em uma lâmina de vidro à temperatura ambiente (~20 C). A temperatura mais elevada da lâmina de vidro em relação à da secção do tecido faz com que a secção derreta instantaneamente e adere ao vidro.

O processo completo desde a criofixação até à obtenção das secções das lâminas de vidro pode demorar apenas 10 a 20 minutos, permitindo uma análise rápida da amostra.

Aplicações

O seccionamento do criostato oferece duas vantagens principais sobre o seccionamento de micrótomo histológico padrão. Primeiro, o tempo de retorno da fixação à secção do tecido é muito menor. Segundo, a antigenicidade da proteína é melhor preservada e, portanto, as secções do criostato são bem adequadas para a coloração por imunofluorescência de várias proteínas na mesma secção tecidual.

A desvantagem da secção do criostato em relação à secção do micrótomo histológico padrão é que as características citológicas da hematoxilina-eosina (H&E) corada cortes de tecido incrustados em parafina são superiores àquelas da H&E corada cortes do criostato. Isso ocorre porque cristais de gelo podem se formar durante o processo de criofixação, o que distorcerá a citoarquitetura. Além disso, os tecidos criofixados embutidos na TOC tendem a secar por congelamento e, idealmente, devem ser seccionados imediatamente após a criofixação ou armazenados sob condições que minimizem a secagem por congelamento.

Especificações do criostato Shandon FE

• Tela de toque para configuração dos parâmetros de seccionamento
• Ajuste da espessura da seção 1-20 μm em 1μm ajustes e 20-60 μm em 5μm ajustes
• Curso de corte vertical 57mm
• Ajuste da amostra horizontal de 25 mm
• Controle de temperatura criobar de 0° a -35°C
• Cryobar e sistema de refrigeração criobar ajustável dedicado até -55°C. O sistema de refrigeração criobar arrefece a amostra em apenas duas horas enquanto evita o congelamento

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• Ciclo de fumigação automática para desinfectar a câmara

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• Dispositivo de bloqueio do volante para evitar lesões enquanto trabalha em torno da lâmina e da amostra

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• Ciclo de fumigação automática para desinfectar a câmara
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• Utiliza CFC-isolamento livre de refrigerantes e espuma
• Sistema de compressores duplos para garantir a integridade das amostras, mantendo as amostras congeladas se a criobar falhar
• Concepção ergonómica incluindo um apoio para os pés ajustável em três níveis para ajudar a reduzir a fadiga enquanto sentado ou em pé e uma área de corte elevada para ajudar a evitar o esforço das costas durante a secção