ReviewGUV preparation and imaging: Minimizing artifacts

Składniki błon biologicznych są obecne w fizycznej mieszaninie. Nielosowe sposoby, w jakie cząsteczki lipidów i białek mieszają się ze sobą mogą silnie wpływać na asocjację białek ze sobą i reakcje chemiczne, które zachodzą w błonie, lub w których pośredniczy błona. Szczególnym rodzajem nielosowego mieszania się jest rozdzielanie się faz różniących się składem. Każdy taki rozdział faz spowodowałby preferencyjny podział niektórych białek i lipidów pomiędzy współistniejącymi fazami, a tym samym wpłynąłby na to, które białka mogłyby się ze sobą kontaktować i czy białko mogłoby znaleźć swój cel. Rozdzielenie faz w błonie plazmatycznej miałoby również wpływ na wiązanie się cząsteczek spoza komórki z błoną, w tym białek rozpoznających na wirusach, bakteriach i innych komórkach. Koncepcja tych i innych zdarzeń związanych z rozdzielaniem faz w błonie jest czasami grupowana jako „model tratw” błon biologicznych. Kilka rodzajów eksperymentów ma na celu wykrycie i scharakteryzowanie separacji faz membranowych. Wizualizacja separacji faz ma szczególną wartość, zarówno ze względu na to, że niemieszalność jest tak zdecydowanie określona, jak również dlatego, że rodzaj fazy może być często zidentyfikowany. Mikroskop fluorescencyjny okazał się wyjątkowo przydatny do uzyskiwania obrazów rozdzielonych faz, zarówno w niektórych preparatach komórkowych, jak i szczególnie w modelach błon komórkowych. Tutaj omawiamy sposoby przygotowania przydatnych membran modelowych do badań obrazowych, i jak uniknąć niektórych artefaktów, które mogą plagą tych badań.

.