ReviewGUV preparation and imaging: Minimizing arifacts

De componenten van biologische membranen zijn aanwezig in een fysisch mengsel. De niet-willekeurige manieren waarop de moleculen van lipiden en proteïnen zich vermengen kan de associatie van proteïnen met elkaar sterk beïnvloeden, en de chemische reacties die in het membraan optreden, of die door het membraan worden bemiddeld. Een bijzonder type van niet-willekeurige menging is de scheiding van qua samenstelling verschillende fasen. Een dergelijke fasescheiding zou leiden tot een preferentiële verdeling van sommige eiwitten en lipiden tussen de naast elkaar bestaande fasen, en zou dus van invloed zijn op welke eiwitten met elkaar in contact kunnen komen, en of een eiwit zijn doel kan vinden. Fasescheiding in een plasmamembraan zou ook van invloed zijn op de binding van moleculen van buiten de cel aan het membraan, met inbegrip van herkenningseiwitten op virussen, bacteriën en andere cellen. Het concept van deze en andere gebeurtenissen die verband houden met de fasescheiding van het membraan worden soms gegroepeerd als het “vlottenmodel” van biologische membranen. Verschillende soorten experimenten zijn gericht op het opsporen en karakteriseren van membraanfasescheiding. Het zichtbaar maken van fasescheiding heeft een bijzondere waarde, zowel omdat de onmengbaarheid zo doorslaggevend wordt bepaald, als omdat het type fase vaak kan worden geïdentificeerd. De fluorescentiemicroscoop is bij uitstek geschikt gebleken om beelden te verkrijgen van gescheiden fasen, zowel in bepaalde celpreparaten, als in het bijzonder in modellen van celmembranen. Hier bespreken we manieren om bruikbare modelmembranen voor beeldstudies voor te bereiden, en hoe sommige artefacten die deze studies kunnen plagen, kunnen worden vermeden.