Integrated Microscopy Center

標準ミクロトームと同様に組織の一部から薄い（厚さ1-10mm）セクションを得るために機能するが、標準ミクロトームは室温で操作を行うのに対し、低温（-20〜-30度）で組織を切り出すことができるクライオスタットを提供します。 クライオスタットでは、刃と試料は直立した固定式の冷凍庫/チャンバーの中にあり、試料ホルダーを回転させるホイールは外部に設置されています。

クライオスタットで切開する組織は、通常の組織検査のように数時間から数日間ホルマリンで固定する必要はありません。 その代わり、組織はサンプリング後すぐに凍結固定されます。 凍結固定は、組織片を粘性のあるゲル状の媒体（OCT）に入れ、ドライアイスや液体窒素で冷却したイソペンタン中に突っ込みます。

切片作成は、凍結したOCT組織ブロックを金属板の上に置き、温度を-20～-30℃にした後、ミクロトームチャックに取り付け、切片を作成します。 満足のいく品質の切片が得られたら、室温（～20℃）でスライドグラスにマウントする。 組織切片の温度に対してスライドグラスの温度が高いため、切片は瞬時に溶けてガラスに付着する。

凍結固定からスライドグラス上の切片を得るまでの全工程を10～20分程度で行うことができ、迅速なサンプル分析が可能となります。

Applications

クライオスタットセクショニングは、標準的な組織学のミクロトームセクショニングと比較して、主に2つの利点があります。 まず、固定から組織の切り出しまでの時間が大幅に短縮されます。 第二に、タンパク質の抗原性がよりよく保存されるため、クライオスタット切片は同じ組織切片内の複数のタンパク質の免疫蛍光染色によく適している。

標準的な組織学的ミクロトーム切片に比べ、クライオスタット切片の欠点は、ヘマトキシリン・エオジン（H&E）染色パラフィン包埋組織切片の細胞学的特徴がH&E染色クライオスタット切片より優れている点である。 これは、凍結融解の過程で氷晶が生成され、それが細胞構造を歪めてしまうからである。 また、OCTに包埋された凍結固定組織は凍結乾燥しやすいので、理想的には凍結固定後すぐに切片化するか、凍結乾燥を最小限に抑える条件下で保存する必要があります。

Shandon FE Cryostatの仕様

• Sectioning parameters設定用タッチスクリーンディスプレイ
• Section thickness adjustment 1-.1μm調整で20μm、5μm調整で20-60μm
• 垂直切断ストローク57mm

水平試験片前進25mm

• クライオ室温度制御0°〜-35℃

専用調整クライオバーと-55℃冷却装置です。 クライオバー冷却システムは、凍結を防ぎながら、わずか2時間で試料を冷却します

• 試料ホルダー温度コントロール 0°～40°（チャンバー温度の±10°）
• ポジティブロックフライホイールにより、刃や試料周りの作業中の怪我を防止
• 自動燻蒸サイクルでチャンバーを消毒
• CFC-50 を使用
• Director’s Manual

デュアルコンプレッサーシステムにより、クライオバーが故障した場合でも試料を冷凍保存し、試料の完全性を確保

• 3段階に調節できるフットレストにより、座ったり立ったりしている時の疲労を軽減し、カットエリアを高くすることにより切断時の腰痛を防ぐなど人間工学に基づいたデザイン