ReviewGUV preparazione e imaging: Minimizzare gli artefatti

I componenti delle membrane biologiche sono presenti in una miscela fisica. I modi non casuali in cui le molecole di lipidi e proteine si mescolano possono influenzare fortemente l’associazione delle proteine tra loro e le reazioni chimiche che avvengono nella membrana o che sono mediate dalla membrana. Un tipo particolare di miscelazione non casuale è la separazione di fasi compositivamente distinte. Una tale separazione di fase comporterebbe la partizione preferenziale di alcune proteine e lipidi tra le fasi coesistenti, e quindi influenzerebbe quali proteine potrebbero essere in contatto, e se una proteina potrebbe trovare il suo bersaglio. La separazione delle fasi in una membrana plasmatica influenzerebbe anche il legame di molecole dall’esterno della cellula alla membrana, comprese le proteine di riconoscimento su virus, batteri e altre cellule. Il concetto di questi e altri eventi associati alla separazione di fase della membrana sono talvolta raggruppati come il “modello della zattera” delle membrane biologiche. Diversi tipi di esperimenti sono volti a rilevare e caratterizzare la separazione di fase delle membrane. La visualizzazione della separazione di fase ha un valore speciale, sia perché l’immiscibilità è così decisamente determinata, sia perché il tipo di fase può spesso essere identificato. Il microscopio a fluorescenza si è dimostrato particolarmente utile per produrre immagini di fasi separate, sia in alcuni preparati cellulari, sia soprattutto in modelli di membrane cellulari. Qui discutiamo i modi per preparare modelli di membrane utili per gli studi di immagine, e come evitare alcuni degli artefatti che possono affliggere questi studi.