ReviewPréparation et imagerie GUV : Minimiser les artefacts
Les composants des membranes biologiques sont présents dans un mélange physique. Les façons non aléatoires dont les molécules de lipides et de protéines se mélangent peuvent fortement influencer l’association des protéines entre elles, et les réactions chimiques qui se produisent dans la membrane, ou qui sont médiées par la membrane. Un type particulier de mélange non aléatoire est la séparation de phases distinctes sur le plan de la composition. Une telle séparation de phases entraînerait une partition préférentielle de certaines protéines et de certains lipides entre les phases coexistantes, et influencerait donc les protéines qui pourraient être en contact, et la possibilité pour une protéine de trouver sa cible. La séparation des phases dans une membrane plasmique influencerait également la liaison des molécules extérieures à la cellule à la membrane, y compris les protéines de reconnaissance des virus, des bactéries et d’autres cellules. Le concept de ces événements et d’autres associés à la séparation des phases de la membrane sont parfois regroupés sous le nom de « modèle du radeau » des membranes biologiques. Plusieurs types d’expériences visent à détecter et à caractériser la séparation de phase des membranes. La visualisation de la séparation de phases a une valeur particulière, à la fois parce que l’immiscibilité est déterminée de manière décisive, et aussi parce que le type de phase peut souvent être identifié. Le microscope à fluorescence s’est avéré particulièrement utile pour obtenir des images de phases séparées, à la fois dans certaines préparations cellulaires et surtout dans des modèles de membranes cellulaires. Nous discutons ici des moyens de préparer des membranes modèles utiles pour les études d’images, et comment éviter certains des artefacts qui peuvent nuire à ces études.
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