ReviewGUV forberedelse og billeddannelse: Minimering af artefakter
Komponenterne i biologiske membraner er til stede i en fysisk blanding. De ikke tilfældige måder, hvorpå molekylerne af lipider og proteiner blandes sammen, kan i høj grad påvirke proteinernes association med hinanden og de kemiske reaktioner, der finder sted i membranen, eller som medieres af membranen. En særlig type ikke-tilfældige blandinger er adskillelse af sammensætningsmæssigt forskellige faser. En sådan faseadskillelse vil resultere i en præferentiel fordeling af nogle proteiner og lipider mellem de sameksisterende faser og vil således påvirke, hvilke proteiner der kan være i kontakt, og om et protein kan finde sit mål. Faseadskillelse i en plasmamembran vil også påvirke bindingen af molekyler udefra til membranen, herunder genkendelsesproteiner på vira, bakterier og andre celler. Begrebet om disse og andre hændelser i forbindelse med membranens faseseparation bliver undertiden samlet under betegnelsen “raft-modellen” for biologiske membraner. Der findes flere typer eksperimenter, der har til formål at påvise og karakterisere membranfaseseparation. Visualisering af faseseparation har særlig værdi, både fordi uforblandeligheden er så afgørende bestemt, og også fordi fasetypen ofte kan identificeres. Fluorescensmikroskopet har vist sig at være enestående nyttigt til at give billeder af adskilte faser, både i visse cellepræparater og især i modeller af cellemembraner. Her diskuterer vi, hvordan man kan forberede nyttige modelmembraner til billedstudier, og hvordan man undgår nogle af de artefakter, der kan plage disse undersøgelser.
Leave a Reply