ReviewGUV preparation and imaging: Minimalizace artefaktů

Složky biologických membrán jsou přítomny ve fyzikální směsi. Nenáhodné způsoby, jakými se molekuly lipidů a proteinů mísí, mohou silně ovlivnit vzájemnou asociaci proteinů a chemické reakce, které v membráně probíhají nebo které jsou membránou zprostředkovány. Zvláštním typem náhodného míchání je oddělení složením odlišných fází. Každé takové oddělení fází by vedlo k přednostnímu rozdělení některých proteinů a lipidů mezi koexistující fáze, a tím by ovlivnilo, které proteiny mohou být v kontaktu a zda protein může najít svůj cíl. Rozdělení fází v plazmatické membráně by také ovlivnilo vazbu molekul z vnějšku buňky na membránu, včetně rozpoznávacích proteinů virů, bakterií a jiných buněk. Koncepce těchto a dalších dějů spojených s fázovou separací membrán se někdy sdružuje jako „raftový model“ biologických membrán. Na detekci a charakterizaci separace membránových fází je zaměřeno několik typů experimentů. Vizualizace separace fází má zvláštní hodnotu jednak proto, že se tak rozhodujícím způsobem určuje nemísitelnost, a také proto, že lze často identifikovat typ fáze. Fluorescenční mikroskop se ukázal jako jedinečně užitečný pro získání obrazů oddělených fází, a to jak u některých buněčných preparátů, tak zejména u modelů buněčných membrán. Zde se zabýváme způsoby, jak připravit užitečné modelové membrány pro obrazové studie a jak se vyhnout některým artefaktům, které mohou tyto studie sužovat.