An expanded ‘Brainbow’ tool kit for fluorescently labelling cells in mice
脳やその他の器官は複雑で、個々の細胞間のつながりを特定することは困難な課題である。 Brainbow」技術の開発により、Cre/loxシステムを利用して、各細胞に赤、黄、青の蛍光タンパク質をランダムに割り当てることで、イメージングが大きく進歩した(Livet et al.2007)。 このシステムは、赤、緑、青の光を組み合わせてテレビ画面上のフルスペクトルの色を生成するブラウン管と同様の働きをする。 ハーバード大学のJoshua Sanes教授の研究室が最近開発したBrainbowマウスは、神経細胞の相互関係を研究するためのより優れた系統でツールキットを拡張し(Cai et al.2013)、他の関連系統はBrainbow技術をマウス全体に導入した(Snippert et al.2010、Tabansky et al.2013)。
新しいBrainbow系統(Brainbow 3.1および3.2と呼ばれる)は、オリジナルのBrainbowモデルと比べていくつかの利点がある:
- オリジナル系統とは異なり、イメージングを複雑にする可能性のあるCre組み換え前の蛍光がない。
- 蛍光タンパク質を膜にターゲティングすることで、神経細胞のプロセスや樹状突起をよりよく可視化することができる。
- 特にBrainbow 3.2マウスでは蛍光がより明るくなる。
The Jackson Laboratory distributed two different Brainbow 3.0 line L. Transgenic mouse from offspring, Dentage gyrus image from the children of Brainbow 1.0 line L. Transgenic mouse, CAGGS-CreERT2 transgenic mouse.The Jackson Laboratory has been two different Brainbow 3.1系統、STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)3Jrs/J (021225)とSTOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)18Jrs/J (021226)は多くの種類のニューロンをターゲットにしている。 Brainbow 3.2 株は、蛍光タンパク質の発現を強化したもので、STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.2)7Jrs/J (021227)として入手できます。 この技術は、マウスのどこにでも一般的に使用できるように適応されています。 Confetti」、B6.129P2-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-Brainbow2.1)Cle/J(017492)などの系統は、マウス全体にわたって発現するRosa26遺伝子座にBrainbowトランスジーンを挿入している (Snippert et al. 2010)。 現在では、Confettiマウスと特定の組織を標的にしたCreトランスジェニックマウスを交配させることにより、事実上あらゆる組織において単一細胞を標識することが可能である。 Confettiマウスは、腸、肺、骨髄などの組織で幹細胞がどのように分裂するかを理解するために使われてきた。 B6(D2)-Tg(CAG-Brainbow1.0)2Eggn/J (021011)は、Cre組換え後にマウスの任意の場所に細胞を最大21色のうちの1色でラベルするアクチンプロモーターを使用する類似系統です(Tabansky、他、2013年)。
拡張されたBrainbowツールキットには、マウス全体のさまざまな組織をイメージングし、複雑な細胞機能や構造の解剖をサポートするための多様な系統が含まれるようになった
Leave a Reply