Un kit d’outils ‘Brainbow’ élargi pour le marquage fluorescent des cellules chez la souris

La complexité du cerveau et d’autres organes fait de l’identification des connexions entre les cellules individuelles un défi de taille. Le développement de la technologie « Brainbow » a permis de grandes avancées en imagerie en exploitant le système Cre/lox pour attribuer de manière aléatoire à chaque cellule une combinaison unique de protéines fluorescentes rouges, jaunes et bleues (Livet et al. 2007). Le système fonctionne de la même manière que les tubes cathodiques, qui combinent la lumière rouge, verte et bleue pour générer le spectre complet des couleurs sur un écran de télévision. Des souris Brainbow récemment développées par le laboratoire de Joshua Sanes à Harvard élargissent la boîte à outils avec de meilleures souches pour étudier la façon dont les neurones interagissent (Cai et al. 2013), tandis que d’autres souches apparentées apportent la technologie Brainbow à la souris entière (Snippert et al. 2010 ; Tabansky et al. 2013).

Les nouvelles lignées Brainbow (appelées Brainbow 3.1 et 3.2) offrent plusieurs avantages par rapport aux modèles Brainbow originaux :

• Contrairement aux souches originales, il n’y a pas de fluorescence avant la recombinaison Cre qui pourrait compliquer l’imagerie.
• Le ciblage des protéines fluorescentes sur les membranes permet une meilleure visualisation des processus neuronaux et des épines dendritiques.
• La fluorescence est plus brillante, notamment chez les souris Brainbow 3.2.

Le laboratoire Jackson distribue deux souches Brainbow 3.1, STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)3Jrs/J (021225) et STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.1)18Jrs/J (021226), qui ciblent de nombreux types de neurones . Une souche Brainbow 3.2, avec une expression améliorée de la protéine fluorescente, est disponible sous la forme STOCK Tg(Thy1-Brainbow3.2)7Jrs/J (021227).

Brainbow n’est plus seulement destinée aux cerveaux. La technologie a été adaptée pour une utilisation générale partout dans la souris. Des souches comme  » Confetti « , B6.129P2-Gt(ROSA)26Sortm1(CAG-Brainbow2.1)Cle/J (017492), portent une insertion d’un transgène Brainbow dans le locus Rosa26 qui est exprimé dans toute la souris (Snippert et al. 2010). Il est désormais possible de marquer des cellules uniques dans pratiquement tous les types de tissus en accouplant les souris Confetti à des souris transgéniques Cre qui ciblent des tissus spécifiques. Les souris Confetti ont été utilisées pour comprendre comment les cellules souches se divisent dans les intestins, les poumons, la moelle osseuse et d’autres tissus. B6(D2)-Tg(CAG-Brainbow1.0)2Eggn/J (021011) est une souche similaire qui utilise le promoteur de l’actine pour marquer les cellules n’importe où dans la souris avec l’une des 21 couleurs différentes après recombinaison Cre (Tabansky, et al. 2013).

La boîte à outils Brainbow élargie contient maintenant un ensemble diversifié de souches pour l’imagerie de différents tissus dans toute la souris et pour soutenir la dissection de fonctions et d’architectures cellulaires complexes.

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