PLOS ONE

Material och metoder

Studieupplägg

Denna studie använde sig av en kvasiexperimentell enarmad tidsseriedesign.

Deltagare och miljö

Denna forskning var en genomförbarhetsstudie. Urvalsstorleken baserades på tidigare forskning som rapporterade om OT-nivån i saliv från 11 ammande kvinnor . Tidigare studier som rapporterar om OT-nivån i plasma hos gravida kvinnor omfattade cirka 10 till 20 försökspersoner . Kriterierna för att komma i fråga var följande: planerat att föda ett enda barn genom spontan cefalisk förlossning; mellan 38 och 40 veckors graviditet; asiatisk och kan läsa och skriva japanska; fått tillåtelse från förlossningsläkaren eller barnmorskan att delta. Uteslutningskriterierna var följande: tar mediciner i samband med graviditeten, har medicinska komplikationer eller graviditetskomplikationer och psykisk sjukdom, har en medicinsk historia av behandling med assisterad reproduktionsteknik, BMI > 25 före graviditeten, planerad framkallad förlossning, har upplevt förlängd graviditet, har haft tidigare kejsarsnitt, ammar barn. Ett flödesschema som visar rekryteringen av studiedeltagarna visas i figur 1.

Expand

När berättigade gravida kvinnor som befann sig i 34 veckors graviditet besökte öppenvårdsavdelningen för en prenatal kontroll, förklarade vi muntligen vår forskning på en plats utan sjuksköterska eller obstetriker. Efter att ha inhämtat samtycke bestämde vi tillsammans med deltagaren den första interventionsdagen efter 38 veckors graviditet. Kvinnorna fick också en vägransblankett vid den tidpunkten med en förklaring om att de kan dra sig ur när som helst utan några nackdelar. På datainsamlingsanläggningen i denna studie utförs en bäckenundersökning för alla gravida kvinnor efter 37 veckors kontroll. Membransvepning kan utföras efter en förlossningsläkares bedömning efter 39 graviditetsveckor.

Experimenten hölls på sjukhuset under tre på varandra följande dagar. Det fanns några försökspersoner som hade perinatala kontroller av förlossningsläkare före och efter experimentet. Data samlades in på ett enda förlossningssjukhus i Kanagawa, Japan mellan juni 2015 och augusti 2015.

Studieprotokollet godkändes av Institutional Review Board of St. Luke’s International University, Tokyo, Japan (nr 15-011). Studien registrerades i Clinical Trials Registry of University Hospital Medical Information Network i Japan (UMIN000017911).

Procedurer

Interventionstiden för bröststimulering var 3 dagar. Samma tid på dygnet användes för att kontrollera dygnseffekter. Saliv samlades in inom perioden 10:00 till 16:00. Deltagarna ombads att avstå från samlag och att dricka alkohol före interventionsdagen. De uppmanades också att avsluta sin måltid, borsta sina tänder och att inte röka en timme före interventionen. De ombads också att inte använda läppstift. Försöket påbörjades 30 minuter efter intag av 100 mL vatten.

I början av studien utvärderades cervix score för cervikal mognad (Fig 2; cervical check) med hjälp av en modifierad Bishop Score. Cervikal mognad kan vara ett möjligt alternativ för att utvärdera interventionen i förhållande till slutpunkten. Utvärderarna bestod av 3 barnmorskor som har 10 års erfarenhet för att standardisera bedömningen.

Expandera

Deltagarna utförde bröststimulering under 3 dagar tillsammans med en medföljande barnmorska på sjukhuset. För att standardisera interventionstekniken visade en barnmorska hur man utförde bröststimulering i 10 minuter med hjälp av en bröstmodell som förberetts av ull och ett tryckmätningsinstrument (Perineometer, OWOMED, Gyeonggido, Sydkorea). Det rekommenderade stimuleringstrycket var mellan 20 och 50 mmHg, vilket är ett skonsamt tryck som inte skadar bröstvårtan. För att uppnå en stimuleringsrytm på 69 slag per minut användes en elektrisk metronom med belysning (SQ50V, Seiko Watch Corporation, Tokyo, Japan) utan ljud som vägledning. Varje bröst stimulerades i 15 minuter, med början på höger sida, och man alternerade mellan brösten för att förhindra hyperstimulering av livmodern, under sammanlagt 1 timme per dag. Bröststimuleringen utfördes genom att man med tummen, pekfingret och långfingret nypade bröstet så mycket att det inte gjorde ont med början från den yttre areolen till bröstvårtan. Direkt självstimulering av bröstet utfördes med antingen vänster eller höger hand med ren hästolja (Sonbahyu; Yakushido, Fukuoka, Japan). För att hantera oro eller bekymmer med avseende på andras närvaro under bröststimulering användes ett amningsskydd. Vi förvaltade tiden och meddelade deltagarna.

Kardiotokografi (CTG)-avläsningar gjordes under interventionen för att registrera livmoderaktiviteten och kontrollera fostrets hjärtfrekvens. Adekvat uteruskontraktion definierades som att ha minst 3 kontraktioner som varade i 40 sekunder vardera och som inträffade inom 10 minuter. Frekvensen av uteruskontraktioner kan också vara ett möjligt alternativ för att utvärdera interventionen i förhållande till slutpunkten. Deltagarna tittade på en förberedd film (dvs. tågresor genom Europa) för att kontrollera externa faktorer som kan påverka försöksmiljön. Efter interventionen besvarade deltagarna ett frågeformulär om genomförbarheten av den experimentella interventionen. Cervikal mognad bedömdes på nytt i slutet av interventionen.

Efter den experimentella interventionen fick alla deltagare en avgift via banköverföring för att delta i studien (\3 000 eller cirka 30 dollar).

Interventionen utfördes av tre barnmorskor som bestod av förste författaren och två forskningsassistenter. De hade adekvat CTG-läsningsförmåga som de fått genom mer än 5 års klinisk erfarenhet och över 100 fall av att leda förlossningsledningar för denna genomförbarhetsstudie. För standardiseringen av interventionen var förklaringarna för deltagarna och interventionsdetaljerna enhetliga. Dessutom deltog den första författaren konsekvent i experimenten två gånger i början för att säkerställa att forskningsassistenterna kan genomföra interventionsförfarandet korrekt. Forskningsassistent A ansvarade för 30,3 % av experimenten, B för 3,0 % och försteförfattaren för resten av experimenten. Dessutom var försteförfattaren på 40 % av de dagar då forskningsassistent A ansvarade för experimenten på sjukhuset och bekräftade standardiseringen av experimenten.

Salivinsamlingsprocedur

Salivinsamlingsprocedurer är relativt enkla att utföra och är minimalt invasiva för gravida kvinnor. En måttlig korrelation (r = 0,41-0,59) har rapporterats mellan OT-nivån i saliv och OT-nivån i plasma . Dessutom har en positiv korrelation (r = 0,89) visats mellan OT i saliv och OT i plasma hos patienter utan historia av självframkallad kräkning vid anorexia nervosa .

Salivprover samlades in 10 minuter före och 15, 30, 60, 75 och 90 minuter efter bröststimuleringsinterventionen för totalt 18 prover per deltagare. En milliliter saliv samlades in genom ostimulerad passiv dregling för mätning av OT-nivån genom enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA; ENZO Life Sciences, NY, USA). Enligt ELISA-manualen är variabilitetskoefficienterna inom och mellan testerna 12,6 % – 13,3 % respektive 11,9 % – 20,9 %.

För att standardisera salivinsamlingsförfarandet ombads deltagarna att samla ihop sin saliv i munnen i tre minuter. Därefter samlade deltagarna cirka 1,0 ml av sin saliv för varje prov i ett 1,5 ml polypropenrör (Eppendorf, NY, USA) med hjälp av ett salivinsamlingshjälpmedel (Salimetrics, PA, USA). Om denna volym inte kunde samlas upp efter 3 minuter upprepade deltagarna salivinsamlingsproceduren. De insamlade proverna förvarades omedelbart i en frys (Cryo Porter CS-80C, Scinics Corp., Tokyo, Japan) vid -80 °C. OT-nivån bestämdes med hjälp av Carter et al:s metod. För andra experimentella processer tillsatte vi 500 KIU/μL aprotinin efter upptining för att förhindra proteolytisk nedbrytning.

Polymorfismer av oxytocinreceptorn

OT-receptorns singelnukleotidpolymorfism har rapporterats minska känsligheten för OT . Särskilt kvinnor med GG homozygota typer på OT-receptorgenen rs53576 rapporterades övergå till sent aktivt arbete. I den här studien erhölls buccalslemhinneprover för analys av 3 OT-receptorgenpolymorfismer (dvs. rs53576, rs2254298 och rs1042778) genom genotypning med hjälp av TaqMan SNP-analys (Applied Biosystems, Thermo Fisher, MA, USA).

Förmåga när det gäller praktisk genomförbarhet och godtagbarhet

Vi utvärderade genomförbarheten av interventionsprotokollet för bröststimulering när det gäller praktisk genomförbarhet och godtagbarhet . När det gäller den experimentella metodens praktiska användbarhet beaktades andelen analyserbara prover och förekomsten av biverkningar. För acceptansen av den experimentella metoden beaktades bortfallet efter interventionen. Den visuella analoga skalan (VAS), som är ett av de mest giltiga, tillförlitliga och ofta använda mätverktygen för självrapportering, användes i denna studie för att bedöma trötthet och smärta . Kvinnorna svarade på följande kommentarer och frågor med hjälp av följande skalor eller : ”Vänligen ge din feedback om bröstmassagen; 1) blev dina armar och fingrar trötta? 2) hade du någon smärta i bröstvårtan?” och ”Vänligen ge din feedback om salivinsamlingen; 1) upplevde du trötthet från salivinsamlingen?”. En fyrgradig Likertskala användes vid besvarandet av följande frågor: 1) ”Var det obekvämt att röra bröstvårtan?”, 2) ”Var instruktionen för stimuleringsmetoden lätt att förstå?”, 3) ”Vill du göra om det här ingreppet vid nästa graviditet?” och 4) ”Skulle du vilja ge information om den här tekniken till dina vänner?”. Med tanke på östasiaternas kulturella bakgrund som tenderar att välja mittpunkten användes en Likertskala med fyra nivåer för att mäta attityden för att undvika tvetydighet i dessa frågor. När det gäller stimuleringens rytm och intensitet användes däremot en 5-gradig Likertskala, där ”måttligt” ingår som ett mellanalternativ. Dessutom svarade deltagarna på frågor om miljön där interventionen utfördes.

Dataanalys

Medelvärden (M), standardavvikelser (SD), standardfel (SE) och medianer för alla variabler beräknades. Vi använde en linjär blandad modell med AR (1) kovariansstruktur med OT-nivån som beroende variabel och dag och tidpunkt för interventionen som fasta effekter. Littles MCAR-test utfördes. Förutom alla OT-nivåer inkluderades ålder, gestationsveckor vid interventionen, obstetrisk historia, civilstånd, boende med partner och utbildning ≥ 12 år i imputeringsproceduren som faktorer som påverkade OT-nivån. Resultatet blev p = 0,980 och nollhypotesen förkastades inte. Huvudorsaken till de saknade uppgifterna var otillräcklig salivvolym och inte saknade uppgifter på grund av OT-värdet, så de saknade uppgifterna i den här studien återspeglade helt slumpmässigt saknad (MCAR). Vi använde förfarandet för multipel imputering i SPSS Missing Values för att imputera de saknade uppgifterna. Fem imputerade dataset skapades. Uppgifterna hade en icke-normal fördelning. Spearmans korrelationskoefficient användes för att testa korrelationen mellan OT-nivån i saliven och cervikal poäng eller egenskaper. Statistiska analyser utfördes med hjälp av IBM SPSS Statistics (version 22.0; Static Base and Advanced Statistics, IBM Japan, Tokyo, Japan).