Gemensam användning av HPLC och FZCE för klusteranalys av Triticum spp och för identifiering av T. durum-förfalskning
Kriterierna för vetekvalitet utvecklas kontinuerligt som svar på marknadstryck och konsumenternas preferenser. Karaktärisering av spannmålsodlingar för kvalitet och agronomiska egenskaper har i stor utsträckning visat på proteininnehållets betydelse för att säkerställa produkter av god kvalitet. Syftet med detta arbete är att jämföra omvänd fas-vätskekromatografi med hög prestanda (RP-HPLC) och kapillärelektrofores i frizon (FZCE) vid identifiering av italienska vetesorter och upptäckt av förfalskning av durumvetemjöl. Protein som huvudsakligen är lösligt i alkohol (gliadiner) och vattenlösligt (albuminer) extraherades från 14 vanliga vetekultivarer och 9 durumvetekultivarer. I RP-HPLC-kromatogrammen eluerades vetealbuminer och gliadiner mellan 3 och 9 minuter respektive mellan 10 och 42 minuter. Även om de valda kromatografiska förhållandena (omvänd fas) inte möjliggjorde en fullständig upplösning av hydrofila proteiner som albuminer, observerades en god reproducerbarhet för både albuminer och gliadiner. I FZCE-elektroherogrammen migrerade vetealbuminer och gliadiner mellan 8 och 14 minuter respektive 16-25 minuter. En god reproducerbarhet konstaterades för vetealbuminer, medan den relativt dåliga reproducerbarheten för gliadinfraktioner var en följd av de valda separationsförhållandena som syftade till att i samma körning separera antingen hydrofila (albuminer) och alkohollösliga (gliadiner) proteiner. Huvudkomponentanalysen (PCA) av HPLC- och FZCE-data visade att båda teknikerna möjliggjorde en entydig identifiering av en stor del av de undersökta vetekultiverna. Tre toppar upptäcktes uteslutande i RP-HPLC-kromatogrammen för vanliga veteodlingar, medan tre unika toppar hittades i FZCE-elektroherogrammen för vanliga veteodlingar. Dessa toppar undersöktes som en grund för att upptäcka och uppskatta förfalskning av durumvetemjöl med mjöl från vanligt vete. Det direkta sambandet mellan topparnas area och förfalskningsnivån gjorde det möjligt att konstruera standardkurvor. Standardkurvorna visade att förfalskningen kan kvantifieras antingen med RP-HPLC eller FZCE.
Leave a Reply