PLOS ONE

Materiale și metode

Designul studiului

Acest studiu a folosit un design cvasi-experimental cu un singur braț cu serii temporale.

Participanți și context

Acest studiu a fost un studiu de fezabilitate. Dimensiunea eșantionului s-a bazat pe o cercetare anterioară care a raportat nivelul de OT din salivă de la 11 femei care alăptează . Studiile anterioare care au raportat nivelul de OT în plasmă la femeile însărcinate au implicat aproximativ 10 până la 20 de subiecți . Criteriile de eligibilitate au fost următoarele: au planificat să nască un singur copil prin naștere cefalică spontană; între 38 și 40 de săptămâni de gestație; asiatice și pot citi și scrie în limba japoneză; au primit permisiunea de participare din partea obstetricianului sau a moașei. Criteriile de excludere au fost următoarele: să ia orice medicamente legate de gestația lor; să aibă complicații medicale sau de sarcină și boli mintale; să aibă un istoric medical de tratament de Tehnologie de Reproducere Asistată; un IMC > 25 înainte de sarcină; travaliu indus planificat; să fi experimentat o sarcină prelungită; să fi avut o operație cezariană anterioară; să alăpteze un copil. O diagramă de flux care demonstrează recrutarea participanților la studiu este prezentată în Fig. 1.

Expand

Când femeile gravide eligibile în vârstă de 34 de săptămâni de gestație au vizitat secția de ambulatoriu pentru un control prenatal, am explicat verbal cercetarea noastră într-un loc fără o asistentă sau un obstetrician. După ce am obținut consimțământul, am decis împreună cu participantele prima zi de intervenție după 38 de săptămâni de gestație. Femeile au primit, de asemenea, un formular de refuz în acel moment, cu explicația că se pot retrage în orice moment fără niciun dezavantaj. În unitatea de colectare a datelor din acest studiu, examinarea pelviană este efectuată pentru toate femeile însărcinate după controlul de 37 de săptămâni. Măturarea membranelor poate fi efectuată la discreția unui obstetrician după 39 de săptămâni de gestație.

Experimentele s-au desfășurat în spital timp de 3 zile consecutive. Au existat câțiva subiecți care au avut controale perinatale efectuate de obstetricieni înainte și după experiment. Datele au fost colectate la o singură maternitate din Kanagawa, Japonia, între iunie 2015 și august 2015.

Protocolul studiului a fost aprobat de Comitetul de evaluare instituțională al Universității Internaționale St. Luke’s, Tokyo, Japonia (nr. 15-011). Acest studiu a fost înregistrat în Registrul de studii clinice al University Hospital Medical Information Network din Japonia (UMIN000017911).

Proceduri

Durata intervenției de stimulare mamară a fost de 3 zile. S-a folosit același moment al zilei pentru a controla efectele diurne. Saliva a fost colectată în intervalul 10:00 – 16:00 ore. Participantele au fost rugate să se abțină de la relații sexuale și de la consumul de alcool înainte de ziua intervenției. De asemenea, au fost instruiți să își termine masa, să se spele pe dinți și să nu fumeze cu 1 oră înainte de intervenție. De asemenea, li s-a cerut să nu folosească ruj. Experimentul a fost început la 30 de minute după ingerarea a 100 ml de apă.

La începutul studiului, a fost evaluat scorul colului uterin pentru maturarea colului uterin (Fig. 2; verificarea colului uterin) folosind un scor Bishop modificat. Maturarea colului uterin poate fi o opțiune posibilă pentru evaluarea intervenției în raport cu punctul final. Evaluatorii au fost compuși din 3 moașe care au o experiență de 10 ani pentru a standardiza evaluarea.

Expand

Participantele au efectuat stimularea sânului timp de 3 zile împreună cu o moașă însoțitoare în spital. Pentru a standardiza tehnica de intervenție, o moașă a demonstrat cum să efectueze stimularea sânilor timp de 10 minute folosind un model de sân pregătit din lână și un instrument de măsurare a presiunii (Perineometer, OWOMED, Gyeonggido, Coreea de Sud). Presiunea de stimulare recomandată a fost între 20 și 50 mmHg, ceea ce reprezintă o presiune blândă și nu lezează mamelonul. Pentru a obține un ritm de stimulare de 69 de bătăi pe minut, s-a folosit ca ghid un metronom electric de iluminat (SQ50V, Seiko Watch Corporation, Tokyo, Japonia) fără sunet. Fiecare sân a fost stimulat timp de 15 minute, începând cu cel din dreapta, alternând între sâni pentru a preveni hiperstimularea uterină, pentru un total de 1 oră pe zi. Stimularea sânilor a fost realizată prin ciupirea sânului până la un grad care să nu doară, începând de la areola exterioară până la mamelon, folosind degetul mare, arătătorul și degetul mijlociu. Autostimularea directă a sânului a fost efectuată folosind fie mâna stângă, fie mâna dreaptă, cu Pure Horse Oil (Sonbahyu; Yakushido, Fukuoka, Japonia). Pentru a aborda preocupările sau grijile legate de prezența altor persoane în timpul stimulării sânilor, s-a folosit un capac de alăptare. Am gestionat timpul și am anunțat participanții.

În timpul intervenției au fost obținute citiri de cardiotocografie (CTG) pentru a înregistra activitatea uterină și a verifica ritmul cardiac fetal. Contracția uterină adecvată a fost definită ca având cel puțin 3 contracții cu durata de 40 de secunde fiecare care au avut loc în decurs de 10 minute. Frecvența contracției uterine poate fi, de asemenea, o opțiune posibilă pentru evaluarea intervenției în raport cu punctul final. Participantele au vizionat un film pregătit (de exemplu, excursii cu trenul prin Europa) pentru a controla factorii externi care pot afecta mediul experimental. După intervenție, participanții au răspuns la un chestionar privind fezabilitatea intervenției experimentale. Maturarea colului uterin a fost reevaluată la finalul intervenției.

După intervenția experimentală, toate participantele au primit o taxă prin transfer bancar pentru participarea la studiu (3.000 de euro sau aproximativ 30 de dolari).

Intervenția a fost realizată de 3 moașe formate din primul autor și 2 asistenți de cercetare. Acestea aveau o capacitate adecvată de citire a CTG-ului dobândită în urma experienței lor clinice de peste 5 ani și a peste 100 de cazuri de conducere a travaliului pentru acest studiu de fezabilitate. Pentru standardizarea intervenției, explicațiile pentru participanți și detaliile intervenției au fost unificate. Mai mult, primul autor a participat în mod constant la experimente de două ori la început pentru a se asigura că asistenții de cercetare pot implementa corect procedura de intervenție. Asistentul de cercetare A a fost responsabil pentru 30,3% din experimente, B pentru 3,0%, iar primul autor pentru restul experimentelor. În plus, în 40% din zilele în care asistentul de cercetare A a fost responsabil de experimente, primul autor a fost în spital și a confirmat standardizarea experimentelor.

Procedura de recoltare a salivă

Sesizările salivare sunt relativ ușor de realizat și sunt minim invazive pentru femeile gravide. A fost raportată o corelație moderată (r = 0,41-0,59) între nivelul de OT salivar și nivelul de OT plasmatic . Mai mult decât atât, a fost demonstrată o corelație pozitivă (r = 0,89) între OT salivar și OT plasmatic la pacientele fără antecedente de vărsături autoprovocate în anorexia nervoasă .

Eșantioanele de salivă au fost colectate cu 10 minute înainte și cu 15, 30, 30, 60, 75 și 90 de minute după intervenția de stimulare a sânilor, pentru un total de 18 probe per participant. Un mililitru de salivă a fost colectat prin salivare pasivă nestimulată pentru măsurarea nivelului de OT prin testul imunoenzimatic (ELISA; ENZO Life Sciences, NY, SUA). Manualul ELISA precizează că coeficienții de variabilitate intra- și inter-teste sunt de 12,6 % – 13,3 % și, respectiv, 11,9 % – 20,9 %.

Pentru a standardiza procedura de colectare a salivei, participanților li s-a cerut să își adune saliva în gură timp de 3 minute. Ulterior, participanții au colectat aproximativ 1,0 ml din saliva lor pentru fiecare probă într-un tub de polipropilenă de 1,5 ml (Eppendorf, NY, SUA), folosind un dispozitiv de ajutor pentru colectarea salivă (Salimetrics, PA, SUA). În cazul în care acest volum nu a putut fi colectat după 3 minute, participanții au repetat procedura de colectare a salivei. Probele colectate au fost depozitate imediat într-un congelator (Cryo Porter CS-80C, Scinics Corp., Tokyo, Japonia) la -80°C. Nivelul de OT a fost analizat folosind metoda lui Carter et al. Pentru alte procese experimentale, am adăugat 500 KIU/μL aprotinină după decongelare pentru a preveni degradarea proteolitică.

Polimorfismele receptorului de oxitocină

S-a raportat că polimorfismul nucleotidic unic al receptorului OT reduce sensibilitatea la OT . În special, s-a raportat că femeile cu tipuri homozigote GG la gena receptorului OT rs53576 au trecut la travaliu activ târziu. În studiul de față, au fost obținute probe de mucoasă bucală pentru analiza a 3 polimorfisme ale genei receptorului OT (adică rs53576, rs2254298 și rs1042778) prin genotipare cu ajutorul testului SNP TaqMan (Applied Biosystems, Thermo Fisher, MA, SUA).

Fezabilitatea din punct de vedere practic și acceptabilitate

Am evaluat fezabilitatea protocolului de intervenție pentru stimularea sânilor din punct de vedere practic și acceptabilitate . Pentru caracterul practic al metodei experimentale, au fost luate în considerare proporția de probe analizabile și apariția evenimentelor adverse. Pentru acceptabilitatea metodei experimentale, a fost luată în considerare rata de abandon după intervenție. Scala analogică vizuală (VAS), care este unul dintre cele mai valide, fiabile și frecvent utilizate instrumente de măsurare pentru o măsură de auto-raportare, a fost utilizată în prezentul studiu pentru a evalua oboseala și durerea . Femeile au răspuns la următoarele comentarii și întrebări folosind următoarele scale sau : „Vă rugăm să vă oferiți feedback-ul cu privire la masajul mamar; 1) V-ați obosit brațele și degetele? 2) Ați avut dureri la nivelul mamelonului?” și „Vă rugăm să vă oferiți feedback-ul cu privire la recoltarea de salivă; 1) Ați resimțit oboseală în urma recoltării de salivă?”. La răspunsurile la următoarele întrebări s-a folosit o scală Likert cu 4 niveluri: 1) „A fost incomodă atingerea mamelonului?”, 2) „Instrucțiunile pentru metoda de stimulare au fost ușor de înțeles?”, 3) „Doriți să faceți din nou această procedură la următoarea sarcină?” și 4) „Ați dori să oferiți informații despre această tehnică prietenilor dumneavoastră?”. Având în vedere contextul cultural al asiaticilor din Est care tind să aleagă punctul mediu , pentru măsurarea atitudinii a fost utilizată o scală Likert cu 4 niveluri pentru a evita ambiguitatea acestor întrebări. Pe de altă parte, pentru ritmul și intensitatea stimulării, a fost utilizată o scară Likert cu 5 niveluri, care include „moderat” ca alegere intermediară. În plus, participanții au răspuns la întrebări despre mediul în care s-a desfășurat intervenția.

Analiza datelor

Au fost calculate mediile (M), deviațiile standard (SD), erorile standard (SE) și medianele tuturor variabilelor. Am utilizat un model linear mixt folosind structura de covarianță AR (1) cu nivelul OT ca variabilă dependentă și ziua și ora intervenției ca efecte fixe. A fost efectuat testul MCAR al lui Little. În plus față de toate nivelurile OT, vârsta, săptămânile gestaționale la intervenție, istoricul obstetrical, starea civilă, traiul cu partenerul și educația ≥ 12 ani au fost incluse în procedura de imputare ca factori care influențează nivelul OT. Rezultatul a fost p = 0,980, iar ipoteza nulă nu a fost respinsă. Principala cauză a datelor lipsă a fost volumul insuficient de salivă și nu datele lipsă din cauza valorii OT, astfel că datele lipsă din acest studiu au reflectat lipsa completă la întâmplare (MCAR). Am utilizat procedura de imputare multiplă în SPSS Missing Values pentru a imputa datele lipsă. Au fost create cinci seturi de date imputate. Datele au avut o distribuție non-normală. Coeficientul de corelație Spearman a fost utilizat pentru a testa corelația dintre nivelul OT salivar și scorul sau caracteristicile cervicale. Analizele statistice au fost efectuate utilizând IBM SPSS Statistics (versiunea 22.0; Static Base și Advanced Statistics, IBM Japan, Tokyo, Japonia).

.