Microscopy U – The source for microscopy education

Imagistica digitală se aplică din ce în ce mai mult la captarea de imagini pentru microscopie – un domeniu care necesită o rezoluție ridicată, fidelitate a culorilor și o gestionare atentă a condițiilor de lumină, adesea limitate. Acestea sunt cerințe dificile, chiar și pentru fotografia tradițională bazată pe film, deci de ce să luați în considerare imagistica digitală? Acest articol abordează modul în care imagistica digitală se comportă în aceste condiții și care sunt avantajele imagisticii digitale pentru microscopistul optic.

În figura 1 este ilustrată o imagine digitală a unei secțiuni groase de intestin de șoarece colorată cu trei fluorofori și înregistrată cu un sistem de cameră digitală Nikon DXM1200 cuplat la stereomicroscopul SMZ1500. Imaginea a fost captată utilizând o combinație de tehnici de fluorescență și de iluminare cu contrast coerent oblic (OCC), brevetate de Nikon. Au fost efectuate în total patru integrări, iar imaginea a fost compusă în Photoshop pentru a obține versiunea finală prezentată în figură.

De ce să luăm în considerare imagistica digitală?

Este important să subliniem faptul că calitatea imaginii finale, fie că este digitală sau pe film, depinde de calitatea imaginii microscopice originale. Indiferent cât de bună este camera digitală sau convențională, aceasta nu poate produce imagini remarcabile de la un microscop prost configurat. În plus, atât sistemele de formare a imaginilor pe peliculă, cât și cele digitale, pot dezvălui imperfecțiuni care nu sunt vizibile imediat atunci când se privesc prin ocularul microscopului.

Cu creșterea generală a comunicațiilor electronice, există o cerință reală pentru imagini digitale, care pot fi transmise cu ușurință către un număr mare de utilizatori. Imaginile digitale, de exemplu, pot fi pur și simplu trimise prin e-mail pentru consultare și discuții, încorporate în alte documente digitale, exportate în sisteme de analiză a imaginilor sau postate pe un site web, deoarece sunt ușor de copiat, stocat și arhivat. De asemenea, ele pot fi ușor adnotate cu ajutorul unui software adecvat pentru a fi incluse în prezentări sau arhive. În timp ce imaginile fotografice pot fi scanate într-un computer pentru a produce imagini digitale – captarea digitală a imaginilor de la început economisește timp și efort.

Majoritatea aparatelor foto digitale sunt de principiul „point and click” – este nevoie de puțină sau deloc expertiză fotografică. Fotomicrografia tradițională, în schimb, necesită anumite cunoștințe de tehnici fotografice. Utilizatorii trebuie să înțeleagă avantajele și dezavantajele diferitelor tipuri de filme fotografice, trebuie să acorde o atenție deosebită filtrelor pe care le folosesc și să aibă o oarecare înțelegere a relației dintre diafragmele obiectivelor, vitezele de declanșare, adâncimea de câmp și, pentru fotomicrografia color, temperatura de culoare. Rezultatele pot fi variabile, în special pentru începători, de unde și importanța practicii de „bracketing” a expunerilor pentru imaginile critice, adică realizarea a cel puțin trei fotografii separate pentru a se asigura că cel puțin una dintre ele este reușită. Acest lucru crește însă costurile de film și de procesare. Imagistica digitală nu implică costuri permanente – nu există taxe de film sau de procesare.

Imagistica digitală este aproape instantanee. Majoritatea aparatelor foto au un ecran LCD care permite vizualizarea imaginii, iar imaginile pot fi transferate rapid pe un PC. Se poate lua imediat o decizie cu privire la faptul că imaginea este satisfăcătoare. Filmul, pe de altă parte, are nevoie de developare și prelucrare înainte de a putea fi văzut. În acest timp, subiectul poate să nu mai existe, mai ales în cazurile în care microscopiștii înregistrează evenimente dinamice în celule vii.

Ce trebuie să căutați la o cameră digitală

Camerele foto sunt disponibile fie cu ieșire digitală, fie cu ieșire analogică. Pentru ieșirea analogică există mai multe standarde diferite, cum ar fi PAL, NTSC sau RS-170, iar pentru transmiterea datelor există, de asemenea, diferite formate, cum ar fi RGB, S-VHS sau compozit. Semnalele analogice trebuie să fie transformate în semnale digitale cu ajutorul unui frame grabber înainte de a putea fi trimise la un computer, în timp ce într-o cameră digitală semnalul către computer este deja în format digital. Acest lucru reduce zgomotul și, evident, omite necesitatea unui frame grabber. Semnalele digitale pot fi transferate la computer folosind porturi seriale sau paralele (ambele lente), USB (mai rapid, dar disponibil pe aproape toate computerele moderne), Fire Wire (mai rapid decât USB, dar nu atât de răspândit) sau prin intermediul unor plăci pentru magistrala PCI (cele mai rapide, disponibile pe scară largă, dar necesită instalarea unei plăci).

.