Hemagglutinina

E. FHA

FHA este o moleculă în formă de ac de păr neobișnuit de mare și foarte imunogenă care a fost inclusă ca o componentă primară în vaccinurile acelulare împotriva pertussisului . Este sintetizată sub forma unui precursor de 367 kDa, FhaB, care este modificat la extremitatea sa N și scindat la extremitatea sa C pentru a forma proteina FHA matură de 220 kDa. Deși secretată eficient printr-un proces care necesită proteina de membrană externă FhaC, o cantitate semnificativă de FHA rămâne asociată cu suprafața celulară printr-un mecanism necunoscut . Studiile in vitro care utilizează o varietate de tipuri de celule de mamifere sugerează că FHA posedă cel puțin patru activități distincte de atașare și au fost propuse patru domenii separate de legare a FHA. Tripletul Arg-Gly-Asp (RGD) , situat în mijlocul FHA și localizat la un capăt al structurii în ac de păr propuse, stimulează aderența la monocite/macrofage și posibil la alte leucocite prin intermediul LRI/IAP și CR3 . Domeniul de recunoaștere a CR3 din FHA nu a fost încă identificat. FHA posedă, de asemenea, un domeniu de recunoaștere a carbohidraților (CRD), care mediază atașarea la celulele epiteliale respiratorii ciliate, precum și la macrofage in vitro . În cele din urmă, a fost identificată o activitate de tip lectină pentru heparină și alți carbohidrați sulfatați, care poate media aderența la liniile de celule epiteliale necilare . Acest situs de legare a heparinei este diferit de situsurile CRD și RGD și este necesar pentru hemaglutinarea mediată de FHA.

Evidențele privind fenotipurile dependente de FHA in vivo au fost mai greu de obținut. Folosind un model de iepure, Saukkonen și colab. au găsit mai puțini mutanți FHA decât B. pertussis de tip sălbatic în plămâni la 24 de ore după inocularea intratraheală . Pe baza caracteristicilor de legare determinate in vitro ale diferiților mutanți utilizați în studiul lor, ei au dedus că B. pertussis de tip sălbatic a aderat atât la celulele epiteliale ciliate, cât și la macrofage, iar experimentele de competiție cu lactoză și anticorp anti-CR3 au sugerat că a fost implicată atât legarea dependentă de CRD, cât și de RGD . Cu toate acestea, utilizând modele de șoareci, alții au descoperit că mutanții FHA nu se disting de B. pertussis de tip sălbatic în ceea ce privește capacitatea lor de a persista în plămâni, dar sunt defectuoși în ceea ce privește colonizarea traheală . Alții, folosind de asemenea modele de șoareci, nu au observat nicio diferență între mutanții FHA și B. pertussis de tip sălbatic. Dificultatea de a obține o înțelegere completă și detaliată a rolului FHA în localizarea anatomică a B. pertussis în timpul infecției reflectă probabil absența unei gazde animale naturale (altele decât oamenii), precum și complexitatea acestei molecule și a activităților biologice asociate.

Am explorat recent rolul FHA în patogeneză prin construirea a două tipuri de derivați mutanți FHA de B. bronchiseptica: unul care conține o deleție in-frame în fhaB, gena structurală FHA, și unul în care FHA este exprimată ectopic în faza Bvg-, în absența matricei de factori de virulență din faza Bvg+ cu care este exprimată în mod normal . Compararea acestor mutanți cu B. bronchiseptica de tip sălbatic a arătat că FHA este atât necesar, cât și suficient pentru a media aderența la celulele epiteliale pulmonare de șobolan in vitro. Utilizând un model de infecție respiratorie la șobolani, am arătat că FHA este absolut necesar, dar nu suficient, pentru colonizarea traheală la animalele sănătoase, neanesteziate. Cu toate acestea, FHA nu a fost necesar pentru colonizarea traheală inițială la animalele anesteziate, sugerând că rolul său în stabilirea poate fi dedicat depășirii activității de eliminare a escalatorului mucociliar. Utilizarea șobolanilor anesteziați a evidențiat, de asemenea, un rol al FHA în persistență. S-a demonstrat recent că B. pertussis inhibă in vitro proliferarea celulelor T la antigeni exogeni într-o manieră dependentă de FHA . Luate împreună, aceste date sugerează că FHA poate îndeplini, de asemenea, funcții imunomodulatoare in vivo.

.