Bazele DIGE 2D
Tehnica electroforezei pe gel bidimensionale (2D) este un instrument puternic pentru separarea amestecurilor complexe de proteine, dar de la începuturile sale, la mijlocul anilor 1970, a dobândit stigmatul de a fi o aplicație foarte dificil de stăpânit și a fost, în general, utilizată în cel mai bun mod de către experți. Introducerea gradienților de pH imobilizați disponibili în comerț la începutul anilor 1990 a oferit o reproductibilitate sporită și protocoale mai ușoare, ceea ce a dus la o creștere pronunțată a popularității acestei tehnici. Cu toate acestea, variația de la gel la gel era încă dificil de controlat fără utilizarea replicilor tehnice. La mijlocul anilor 1990 (în același timp cu nașterea „proteomicii”), conceptul de multiplexare a proteinelor marcate fluorescent pentru separarea pe gel 2D a fost realizat de grupul lui Jon Minden și a condus la capacitatea de a proiecta experimente pentru a elimina practic variația de la gel la gel, ceea ce a dus la utilizarea replicilor biologice pentru analiza statistică cu capacitatea de a detecta schimbări foarte mici în abundența relativă a proteinelor. Această tehnologie este denumită electroforeză pe gel de diferență 2D (2D DIGE).
Leave a Reply