OMIM Entrada – * 601509 – GAMMA-GLUTAMYL HIDROLASE; GGH

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Gama-glutamil hidrolase (EC 3.4.19.9) catalisa a hidrólise de folilpoli-gama-glutamatos e antifolilpoli-gama-glutamatos pela remoção de poliglutamatos e glutamato ligados por gama.

Yao et al. (1996) clonaram e caracterizaram um cDNA para GGH humano. O cDNA codifica uma proteína 318-aminoácida com uma sequência deduzida de aminoácidos 67% idêntica à da enzima rato. Os resíduos N-terminais 24 são provavelmente uma sequência líder que medeia a translocação do GGH para o retículo endoplasmático para secreção. O GGH também contém 4 potenciais locais de glicosilação de N. A análise Western blot analysis detectou GGH a uma massa molecular aparente de cerca de 35 kD.

Rhee et al. (1995) determinaram que, ao contrário da enzima rato, o GGH humano mostrou maior atividade em direção à derivada pentaglutamato de metotrexato e teve pouca atividade contra a derivada diglutamato. Mais de 60% da atividade total do GGH foi secretada no meio das 5 linhas tumorais examinadas.

Yao et al. (1996) caracterizaram a hidrólise do pentaglutamato de metotrexato pelo GGH. O GGH funcionou principalmente como uma exopeptidase, produzindo inicialmente o tetraglutamato de metotrexato, seguido pelo triglutamato, e depois o diglutamato e o metotrexato. Por outro lado, o Ggh de rato mostrou exclusivamente atividade endopeptidase, clivando a mais interna ligação gama-glutamil, resultando no monoglutamato de metotrexato como o único produto contendo pteroyl.

Cheng et al. (2005) utilizaram polimorfismos nos genes que codificam a tiopurina S-metiltransferase (TPMT; 187680), GGH e o portador de folato reduzido (SLC19A1; 600424) para avaliar a natureza da aquisição cromossômica e sua influência na concordância genótipo-fenótipo nas células cancerosas. As atividades de TPMT e GGH em células somáticas foram concordantes com os genótipos da linha germinal, enquanto as atividades em células de leucemia foram determinadas pelo número cromossômico e se os cromossomos adquiridos continham um alelo do tipo selvagem ou variante. As células leucêmicas que haviam adquirido um cromossomo adicional contendo um alelo de tipo selvagem TPMT ou GGH tinham acúmulo significativamente menor de nucleotídeos tioguaninos ou poliglutamatos metotrexato, respectivamente. Entre esses genes, havia um número considerável de cromossomos adquiridos com alelos do tipo selvagem e alelos variantes. Portanto, o ganho cromossômico pode alterar a concordância do genótipo germinal e dos fenótipos das células cancerígenas, indicando que a genotipagem quantitativa específica dos alelos pode ser necessária para definir inequivocamente a farmacogenômica do câncer.

Yin et al. (1999) determinaram que o gene GGH contém 9 exons e abrange 24 kb. A seqüência a montante do exon 1 consiste de uma região rica em GC e um número de elementos ativos cis putativos, incluindo Sp1 (189906), AP1 (165160) e MZF1 (194550); não há uma seqüência TATA.

Yin et al. (1999) afirmaram que o gene GGH mapeia o cromossomo 8q12.23-q13.1.

Gama-glutamil hidrolase catalisa a degradação dos poliglutamatos activos dos folatos naturais e do metotrexato antifolato (MTX). Cheng et al. (2006) descobriram que a atividade do GGH está diretamente relacionada à expressão do mRNA do GGH em células de leucemia linfoblástica aguda (ALL) em pacientes com genótipo de GGH de linha germinativa do tipo selvagem. Eles identificaram 2 ilhas CpG na região que se estendem do promotor do GGH até o primeiro exon e até o intron 1 e mostraram que a metilação de ambas as ilhas CpG no promotor do GGH (vista nas células de leucemia de aproximadamente 15% dos pacientes com linhagem B não hiperdiplóide ALL) está associada com uma redução significativa da expressão e atividade catalítica do mRNA do GGH e com um acúmulo significativamente maior de poliglutamatos MTX em TODAS as células. Além disso, a metilação de 1 ilha de CpG foi específica para células de leucemia e teve um efeito pronunciado na expressão do GGH, enquanto a metilação da segunda foi comum em células de leucemia e leucócitos normais, mas não alterou significativamente a expressão do GGH. Estes achados indicaram que a atividade do GGH nas células de leucemia humana é regulada por mudanças epigenéticas, além de polimorfismos genéticos previamente reconhecidos e anormalidades cariotípicas, que determinam coletivamente diferenças interindividuais na atividade do GGH e influenciam o acúmulo de poliglutamatos MTX nas células de leucemia.