PLOS ONE

Materialien und Methoden

Studiendesign

Diese Studie verwendete ein quasi-experimentelles einarmiges Zeitreihendesign.

Teilnehmer und Umfeld

Diese Untersuchung war eine Durchführbarkeitsstudie. Die Stichprobengröße basierte auf früheren Studien, die über den OT-Spiegel im Speichel von 11 stillenden Frauen berichteten. Frühere Studien, die über den OT-Plasmaspiegel bei Schwangeren berichteten, umfassten etwa 10 bis 20 Probanden. Die Teilnahmekriterien waren wie folgt: Geplante Einlingsgeburt durch spontane Entbindung; zwischen 38 und 40 Schwangerschaftswochen; Asiatinnen, die Japanisch lesen und schreiben können; Erlaubnis des Geburtshelfers oder der Hebamme zur Teilnahme. Die Ausschlusskriterien waren: Einnahme von Medikamenten im Zusammenhang mit der Schwangerschaft; medizinische oder Schwangerschaftskomplikationen und psychische Erkrankungen; medizinische Vorgeschichte einer Behandlung mit assistierter Reproduktionstechnologie; BMI vor der Schwangerschaft > 25; geplante eingeleitete Wehen; verlängerte Schwangerschaft; vorheriger Kaiserschnitt; Stillen eines Kindes. Ein Flussdiagramm, das die Rekrutierung der Studienteilnehmer zeigt, ist in Abb. 1 dargestellt.

Aufklappen

Wenn in Frage kommende schwangere Frauen in der 34. Schwangerschaftswoche die Ambulanz für eine vorgeburtliche Untersuchung aufsuchten, erklärten wir unsere Forschung mündlich an einem Ort ohne Krankenschwester oder Geburtshelfer. Nachdem wir die Einwilligung eingeholt hatten, vereinbarten wir mit der Teilnehmerin den ersten Interventionstag nach der 38. Die Frauen erhielten zu diesem Zeitpunkt auch ein Ablehnungsformular mit der Erklärung, dass sie jederzeit ohne Nachteile zurücktreten können. In der Datenerhebungseinrichtung dieser Studie wird bei allen schwangeren Frauen nach der Untersuchung in der 37. Eine Membranpunktion kann nach 39 Schwangerschaftswochen nach Ermessen des Geburtshelfers durchgeführt werden.

Die Versuche wurden an drei aufeinanderfolgenden Tagen im Krankenhaus durchgeführt. Einige Probandinnen wurden vor und nach dem Experiment von Geburtshelfern perinatal untersucht. Die Daten wurden zwischen Juni 2015 und August 2015 in einer einzigen Entbindungsklinik in Kanagawa, Japan, erhoben.

Das Studienprotokoll wurde vom Institutional Review Board der St. Luke’s International University, Tokio, Japan, genehmigt (Nr. 15-011). Diese Studie wurde im Clinical Trials Registry des University Hospital Medical Information Network in Japan registriert (UMIN000017911).

Verfahren

Die Interventionszeit der Bruststimulation betrug 3 Tage. Es wurde die gleiche Tageszeit verwendet, um tageszeitliche Effekte zu kontrollieren. Der Speichel wurde in der Zeit von 10:00 bis 16:00 Uhr gesammelt. Die Teilnehmerinnen wurden gebeten, vor dem Tag der Intervention auf Geschlechtsverkehr und Alkohol zu verzichten. Sie wurden außerdem angewiesen, eine Stunde vor dem Eingriff ihre Mahlzeit zu beenden, sich die Zähne zu putzen und nicht zu rauchen. Sie wurden auch gebeten, keinen Lippenstift zu benutzen. Der Versuch wurde 30 Minuten nach der Einnahme von 100 ml Wasser gestartet.

Zu Beginn der Studie wurde der Zervix-Score mit Hilfe eines modifizierten Bishop-Scores auf zervikale Reifung untersucht (Abb. 2; Zervixkontrolle). Die zervikale Reifung kann eine mögliche Option zur Bewertung der Intervention in Bezug auf den Endpunkt sein. Die Beurteiler setzten sich aus 3 Hebammen zusammen, die 10 Jahre Erfahrung haben, um die Beurteilung zu standardisieren.

Erweitern

Die Teilnehmerinnen führten die Bruststimulation 3 Tage lang zusammen mit einer Beleghebamme im Krankenhaus durch. Um die Interventionstechnik zu standardisieren, demonstrierte eine Hebamme 10 Minuten lang die Durchführung der Bruststimulation mit einem aus Wolle vorbereiteten Brustmodell und einem Druckmessgerät (Perineometer, OWOMED, Gyeonggido, Südkorea). Der empfohlene Stimulationsdruck lag zwischen 20 und 50 mmHg, was ein sanfter Druck ist und die Brustwarze nicht verletzt. Um einen Stimulationsrhythmus von 69 Schlägen pro Minute zu erreichen, wurde ein elektrisches Lichtmetronom (SQ50V, Seiko Watch Corporation, Tokio, Japan) ohne Ton als Leitfaden verwendet. Jede Brust wurde 15 Minuten lang stimuliert, beginnend auf der rechten Seite, abwechselnd zwischen den Brüsten, um eine Hyperstimulation des Uterus zu vermeiden, insgesamt 1 Stunde pro Tag. Die Stimulation der Brüste erfolgte, indem die Brust mit Daumen, Zeige- und Mittelfinger vom äußeren Warzenhof bis zur Brustwarze so stark gekniffen wurde, dass sie nicht schmerzte. Die direkte Selbststimulation der Brust erfolgte entweder mit der linken oder rechten Hand mit reinem Pferdeöl (Sonbahyu; Yakushido, Fukuoka, Japan). Um Bedenken oder Sorgen bezüglich der Anwesenheit anderer Personen während der Bruststimulation auszuräumen, wurde eine Stilldecke verwendet. Wir überwachten die Zeit und informierten die Teilnehmerinnen.

Während des Eingriffs wurden Kardiotokographie-Messungen (CTG) durchgeführt, um die Uterusaktivität aufzuzeichnen und die fetale Herzfrequenz zu überprüfen. Eine adäquate Uteruskontraktion wurde definiert als mindestens 3 Kontraktionen von je 40 Sekunden Dauer innerhalb von 10 Minuten. Die Häufigkeit der Uteruskontraktion kann auch eine mögliche Option zur Bewertung der Intervention in Bezug auf den Endpunkt sein. Die Teilnehmerinnen sahen sich einen vorbereiteten Film an (z. B. eine Zugfahrt durch Europa), um externe Faktoren zu kontrollieren, die die experimentelle Umgebung beeinflussen könnten. Nach der Intervention beantworteten die Teilnehmerinnen einen Fragebogen über die Durchführbarkeit der experimentellen Intervention. Die zervikale Reifung wurde am Ende der Intervention erneut bewertet.

Nach der experimentellen Intervention erhielten alle Teilnehmerinnen per Banküberweisung eine Gebühr für die Teilnahme an der Studie (3.000 Euro oder etwa 30 US-Dollar).

Die Intervention wurde von drei Hebammen, bestehend aus der Erstautorin und zwei Forschungsassistenten, durchgeführt. Sie verfügten über ausreichende CTG-Lesefähigkeiten, die sie durch ihre mehr als 5-jährige klinische Erfahrung und die Durchführung von über 100 Fällen von Wehenmanagement für diese Machbarkeitsstudie erworben hatten. Zur Standardisierung der Intervention wurden die Erklärungen für die Teilnehmer und die Details der Intervention vereinheitlicht. Darüber hinaus nahm der Erstautor zu Beginn zweimal an den Experimenten teil, um sicherzustellen, dass die Forschungsassistenten das Interventionsverfahren ordnungsgemäß durchführen können. Forschungsassistent A war für 30,3 % der Experimente verantwortlich, B für 3,0 % und der Erstautor für den Rest der Experimente. Außerdem war an 40 % der Tage, an denen die Forschungsassistentin A für die Experimente verantwortlich war, die Erstautorin im Krankenhaus und bestätigte die Standardisierung der Experimente.

Speichelsammelverfahren

Speicheltests sind relativ einfach durchzuführen und sind für schwangere Frauen minimal invasiv. Es wurde eine mäßige Korrelation (r = 0,41-0,59) zwischen dem OT-Spiegel im Speichel und dem OT-Spiegel im Plasma festgestellt. Darüber hinaus wurde eine positive Korrelation (r = 0,89) zwischen OT im Speichel und OT im Plasma bei Patientinnen ohne selbst herbeigeführtes Erbrechen bei Anorexia nervosa nachgewiesen.

Speichelproben wurden 10 Minuten vor und 15, 30, 60, 75 und 90 Minuten nach der Bruststimulation entnommen, insgesamt 18 Proben pro Teilnehmerin. Ein Milliliter Speichel wurde durch unstimulierten passiven Sabber für die Messung des OT-Spiegels mittels eines enzymatischen Immunoassays (ELISA; ENZO Life Sciences, NY, USA) gesammelt. Das ELISA-Handbuch gibt an, dass die Variabilitätskoeffizienten zwischen den Tests 12,6 % – 13,3 % bzw. 11,9 % – 20,9 % betragen.

Um das Verfahren der Speichelsammlung zu standardisieren, wurden die Teilnehmer gebeten, ihren Speichel 3 Minuten lang im Mund zu sammeln. Anschließend sammelten die Teilnehmer für jede Probe etwa 1,0 ml ihres Speichels in einem 1,5-mL-Polypropylenröhrchen (Eppendorf, NY, USA) unter Verwendung einer Speichelsammelhilfe (Salimetrics, PA, USA). Konnte diese Menge nach 3 Minuten nicht aufgefangen werden, wiederholten die Teilnehmer die Speichelsammlung. Die gesammelten Proben wurden sofort in einem Gefrierschrank (Cryo Porter CS-80C, Scinics Corp., Tokio, Japan) bei -80°C gelagert. Der OT-Gehalt wurde nach der Methode von Carter et al. bestimmt. Für andere experimentelle Verfahren fügten wir nach dem Auftauen 500 KIU/μL Aprotinin hinzu, um einen proteolytischen Abbau zu verhindern.

Polymorphismen des Oxytocin-Rezeptors

Einzelnukleotid-Polymorphismus des OT-Rezeptors verringern die Empfindlichkeit gegenüber OT . Insbesondere Frauen mit homozygoten GG-Typen am OT-Rezeptor-Gen rs53576 gingen Berichten zufolge zu späten aktiven Wehen über. In der vorliegenden Studie wurden Wangenschleimhautproben für die Analyse von 3 OT-Rezeptor-Gen-Polymorphismen (d.h. rs53576, rs2254298 und rs1042778) durch Genotypisierung mittels TaqMan SNP-Assay (Applied Biosystems, Thermo Fisher, MA, USA) gewonnen.

Durchführbarkeit in Bezug auf Praktikabilität und Akzeptanz

Wir haben die Durchführbarkeit des Interventionsprotokolls zur Bruststimulation in Bezug auf Praktikabilität und Akzeptanz bewertet. Für die Praktikabilität der experimentellen Methode wurden der Anteil der analysierbaren Proben und das Auftreten von unerwünschten Ereignissen berücksichtigt. Für die Akzeptanz der experimentellen Methode wurde die Abbrecherquote nach der Intervention berücksichtigt. Die visuelle Analogskala (VAS), die zu den validesten, zuverlässigsten und am häufigsten verwendeten Messinstrumenten für eine Selbstauskunft zählt, wurde in der vorliegenden Studie zur Bewertung von Müdigkeit und Schmerzen verwendet. Die Frauen beantworteten die folgenden Kommentare und Fragen mit Hilfe der folgenden Skalen oder: „Bitte geben Sie Ihr Feedback zur Brustmassage: 1) Waren Ihre Arme und Finger ermüdet? 2) Hatten Sie Schmerzen in der Brustwarze?“ und „Bitte geben Sie Ihr Feedback zur Speichelentnahme: 1) Waren Sie von der Speichelentnahme ermüdet?“. Für die Beantwortung der folgenden Fragen wurde eine 4-stufige Likert-Skala verwendet: 1) „War es unangenehm, die Brustwarze zu berühren?“, 2) „War die Anleitung für die Stimulationsmethode leicht zu verstehen?“, 3) „Würden Sie diese Prozedur bei Ihrer nächsten Schwangerschaft wieder durchführen wollen?“ und 4) „Würden Sie Ihre Freunde über diese Technik informieren wollen?“. In Anbetracht des kulturellen Hintergrunds von Ostasiaten, die dazu neigen, die Mitte zu wählen, wurde für die Messung der Einstellung eine 4-stufige Likert-Skala verwendet, um Mehrdeutigkeiten bei diesen Fragen zu vermeiden. Für den Rhythmus und die Intensität der Stimulation wurde hingegen eine 5-stufige Likert-Skala verwendet, die „mäßig“ als Zwischenwert enthält. Darüber hinaus beantworteten die Teilnehmer Fragen zur Umgebung, in der die Intervention durchgeführt wurde.

Datenanalyse

Die Mittelwerte (M), Standardabweichungen (SD), Standardfehler (SE) und Mediane aller Variablen wurden berechnet. Wir verwendeten ein lineares gemischtes Modell mit der AR(1)-Kovarianzstruktur mit dem OT-Niveau als abhängige Variable und dem Tag und der Uhrzeit der Intervention als feste Effekte. Der MCAR-Test von Little wurde durchgeführt. Zusätzlich zu allen OT-Werten wurden das Alter, die Schwangerschaftswochen zum Zeitpunkt der Intervention, die Geburtsvorgeschichte, der Familienstand, das Zusammenleben mit dem Partner und die Schulbildung ≥ 12 Jahre als Faktoren, die den OT-Wert beeinflussen, in das Imputationsverfahren einbezogen. Das Ergebnis war p = 0,980, und die Nullhypothese wurde nicht verworfen. Die Hauptursache für die fehlenden Daten war ein unzureichendes Speichelvolumen und nicht fehlende Daten aufgrund des OT-Wertes, so dass die fehlenden Daten in dieser Studie vollständig zufällig fehlende Daten (MCAR) widerspiegelten. Wir verwendeten das Verfahren der multiplen Imputation in SPSS Missing Values, um die fehlenden Daten zu imputieren. Es wurden fünf imputierte Datensätze erstellt. Die Daten wiesen eine nicht normale Verteilung auf. Der Spearman-Korrelationskoeffizient wurde verwendet, um die Korrelation zwischen dem OT-Spiegel im Speichel und dem Zervix-Score oder den Merkmalen zu testen. Statistische Analysen wurden mit IBM SPSS Statistics (Version 22.0; Static Base and Advanced Statistics, IBM Japan, Tokio, Japan) durchgeführt.