Przeciwciała przeciw fosfatydyloserynie/protrombinie są związane z niekorzystnymi wynikami ciąży

Abstrakt

Cel. Określenie częstości występowania i związku klinicznego przeciwciał antyfosfatydyloseryna/protrombina (aPS/PT) u pacjentek z powikłaniami ciąży związanymi z zespołem antyfosfolipidowym (APS) w wywiadzie. Materiał i metody. Do badania włączono 21 pacjentek, u których w wywiadzie stwierdzono (a) trzy lub więcej kolejnych poronień przed 10. tygodniem ciąży (WG) (), (b) śmierć morfologicznie prawidłowego płodu po 10. tygodniu ciąży (WG) (), (c) przedwczesny poród morfologicznie prawidłowego noworodka przed 34. tygodniem ciąży z powodu rzucawki, stanu przedrzucawkowego i niewydolności łożyska (WG) () oraz (d) mniej niż trzy niewyjaśnione kolejne poronienia przed 10. tygodniem ciąży (WG) (). Surowice badanych analizowano w kierunku antykoagulantu toczniowego (LA), antykardiolipiny (aCL), antyglikoproteiny I (anty-GPI) oraz przeciwciał aPS/PT. Wyniki. 41/169 (24,3%) pacjentów miało dodatni wynik przynajmniej jednego oznaczenia aPL. Najwyższą częstość występowania stwierdzono dla aPS/PT i aCL (odpowiednio 13,0% i 12,4%), następnie dla LA (7,7%) i anty-GPI (7,1%). 11/169 pacjentek z objawami położniczymi związanymi z APS miało tylko aPS/PT. U 17,8% pacjentek stwierdzono dodatni wynik LA lub aCL i/lub anty-GPI, jednak po dodaniu wyników aPS/PT dodatkowe 7% pacjentek można było poddać ocenie w kierunku APS. Wnioski. aPS/PT są związane z nawracającymi wczesnymi lub późnymi poronieniami oraz z porodem przedwczesnym niezależnie od innych aPL.

1. Wprowadzenie

Pacjentki z podwyższonym poziomem przeciwciał antyfosfolipidowych (aPL) często doświadczają powikłań ciąży obejmujących nawracające poronienia samoistne, wewnątrzmaciczne zahamowanie wzrostu i stan przedrzucawkowy, co sugeruje, że przeciwciała te mogą wpływać na implantację zarodka i indukować zakrzepicę naczyń maciczno-łożyskowych. Międzynarodowe kryteria klasyfikacji zespołu antyfosfolipidowego (APS) łączą występowanie powikłań położniczych i/lub zakrzepicy z utrzymywaniem się aPL w APS . Laboratoryjne kryteria APS obejmują antykoagulanty toczniowe (LA), przeciwciała antykardiolipinowe (aCL) i przeciwciała przeciwko -glikoproteinie I (anty-GPI). Uważa się, że z APS może być związanych kilka innych „niekryterialnych” aPL, jednak dotychczasowy brak dowodów potwierdzających ich przydatność diagnostyczną uniemożliwia włączenie ich do kryteriów klasyfikacyjnych. W ostatnich latach wiele badań wykazało związek przeciwciał antyprotrombinowych z patogenezą APS, a niektóre z nich zaproponowały ich korzystną rolę w diagnostyce APS. Przeciwciała te mogą być wykrywane za pomocą testu ELISA skierowanego na samą protrombinę (aPT-A) lub na kompleks fosfatydyloseryna/protrombina (aPS/PT); jednak te ostatnie są częściej wykrywane u pacjentów z APS. Nasza grupa przedstawiła wewnętrzny test ELISA aPS/PT jako optymalną metodę oznaczania klinicznie istotnych przeciwciał antyprotrombinowych, wykazujących najwyższy odsetek LA w naszej populacji pacjentów. Znaczenie kliniczne przeciwciał antyprotrombinowych opisywano głównie w odniesieniu do pacjentek z APS i zakrzepicą, ale tylko w nielicznych badaniach opisywano ich związek z niekorzystnymi wynikami ciąży. Kompleksowy przegląd haseł „przeciwciała antyprotrombinowe” i „ciąża/położnictwo/poronienia/utrata płodu” ujawnił 12 badań obejmujących 1031 pacjentek i 988 osób z grupy kontrolnej (tab. 1). W połowie z tych badań nie stwierdzono istotnego związku między przeciwciałami antyprotrombinowymi a chorobami związanymi z ciążą. Przeciwnie, Akimoto i wsp. wykazali silny i specyficzny związek pomiędzy różnymi typami przeciwciał antyprotrombinowych z ciężkim stanem przedrzucawkowym i poronieniami samoistnymi. Jedynie badanie Bertolaccini i wsp. różnicowało różne powikłania położnicze i wykazało istotny związek zarówno aPS/PT, jak i aPT-A z niewyjaśnionym zgonem morfologicznie prawidłowego płodu po 10. tygodniu ciąży. Znaczenie kliniczne przeciwciał antyprotrombinowych u pacjentek z niekorzystnym przebiegiem ciąży potwierdzili później także Marozio i wsp. badający aPT-A oraz Vlagea i wsp. badający aPS/PT. Co więcej, nasza grupa niedawno doniosła, że aPS/PT jest najsilniejszym niezależnym czynnikiem ryzyka powikłań położniczych w porównaniu z LA, aCL i anty-GPI . Nie znaleziono jednak dotychczas doniesień opisujących związek przeciwciał antyprotrombinowych z niewyjaśnionymi kolejnymi poronieniami w pierwszym trymestrze ciąży.

W związku z tym niniejsze badanie ma na celu zbadanie związku aPS/PT z historią określonych idiopatycznych powikłań ciąży w większej grupie pacjentek oraz ustalenie, czy obecność aPS/PT wiąże się ze zwiększonym ryzykiem wystąpienia manifestacji położniczych istotnych dla APS.

2. Materiały i metody

2.1. Subjects

This study included 402 sera samples which were prospectively collected from 211 consecutive female patients (median age 33 years, IQR: 7 years) referred between 2005 and 2013 to our clinic due to possible obstetric APS (Table 2). Wśród nich 169 miało manifestacje położnicze uwzględnione w kryteriach klasyfikacyjnych APS. W szczególności u 64 pacjentek wystąpiły trzy lub więcej niewyjaśnionych kolejnych poronień przed 10. tygodniem ciąży (ZM), u 72 pacjentek doszło do niewyjaśnionego obumarcia morfologicznie prawidłowego płodu po 10. tygodniu ciąży, a 33 pacjentki urodziły przedwcześnie morfologicznie prawidłowego noworodka przed 34. tygodniem ciąży z powodu rzucawki, stanu przedrzucawkowego lub niewydolności łożyska. Wśród 33 porodów przedwczesnych w 10 przypadkach doszło do śmierci płodu z powodu odklejenia się łożyska lub zahamowania wzrostu, przy czym wykluczono wszelkie nieprawidłowości morfologiczne. W 16 przypadkach wystąpił poród indukowany z powodu stanu przedrzucawkowego lub rzucawki, a w 7 przypadkach poród samoistny. Pozostałe 42 pacjentki doświadczyły mniej niż trzech poronień przed 10. WG i nie spełniały kryteriów klasyfikacji APS.

Wszystkie pacjentki i ich partnerzy byli badani pod kątem nieprawidłowości genetycznych. Większość pacjentów otrzymała wyniki analizy genetycznej w czasie wizyty w naszej klinice, a pacjenci z potwierdzonymi nieprawidłowościami zostali wykluczeni z badania.

Do grupy kontrolnej włączono 87 zdrowych dawczyń krwi (mediana wieku 42 lata, IQR: 18 lat) bez historii choroby autoimmunologicznej, zaburzeń krwawienia, zakrzepicy i/lub zachorowalności w czasie ciąży.

U wszystkich pacjentów surowica została pobrana podczas badania klinicznego w Klinice Reumatologii (University Medical Centre, Ljubljana). Próbki zostały podzielone na mniejsze części, przechowywane w temperaturze -20°C, a następnie poddane analizie. Badanie zostało przeprowadzone w ramach Narodowego Programu Badawczego „Systemowe choroby autoimmunologiczne” (#P3-0314). Uczestnicy podpisali świadomą zgodę, a badanie zostało zatwierdzone przez National Medical Ethics Committee, Ljubljana, Słowenia.

2.2. Oznaczanie LA

Próbki osocza analizowano przy użyciu analizatora krzepnięcia BCS Siemens zgodnie z wytycznymi obowiązującymi w momencie rozpoczęcia badania. Uproszczony rozcieńczony test na jad żmii Russella (dRVVT) przeprowadzono przy użyciu odczynnika przesiewowego LA 1 i odczynnika potwierdzającego LA 2 (Siemens) zgodnie z instrukcjami producenta. Stosunek dRVVT (LA1 screen/LA2 confirmation) powyżej 1,2 uznawano za pozytywny dla aktywności LA. Aktywność LA określono ilościowo w następujący sposób: wynik słabo dodatni (LA1/LA2 = 1,2-1,5), średnio dodatni (LA1/LA2 = 1,5-2,0) i wysoko dodatni (LA1/LA2 > 2,0).

2.3. An In-House aPS/PT ELISA

Zostało to wykonane zgodnie z wcześniej opisanym protokołem i zwalidowaną metodą. W szczególności, średnie współczynniki zmienności między- i wewnątrz oznaczeń wynosiły odpowiednio <3,3% i <8,2%. Swoistość diagnostyczna dla APS wynosiła 92,5%, a czułość diagnostyczna 59,0%. Istotny diagnostycznie punkt odcięcia aPS/PT ustalono na 99. percentylu 222 dawców krwi. W skrócie, fosfatydyloseryna została pokryta na polistyrenowych płytkach mikromiareczkowych (medium binding, Costar, Cambridge, MA, USA) i inkubowana przez noc w temperaturze 4 ° C. Po zablokowaniu za pomocą soli fizjologicznej buforowanej Tris (TBS) zawierającej 1% surowiczej albuminy bydlęcej (BSA) i 5 mM CaCl2 (1% BSA-TBS-Ca++) płytki płukano w TBS zawierającym 0,05% Tween-20. Ludzka protrombina (10 mg/L) (Enzyme Research Laboratories, Wielka Brytania) i surowice pacjentów rozcieńczone 1 : 100 w 1% BSA-TBS-Ca++ nanoszono do dołków bezpośrednio jeden po drugim i inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej (RT). Następnie płytki przemywano i inkubowano z fosfatazą alkaliczną sprzężoną z kozią antyludzką IgG lub IgM (ACSC, Westbury, USA) przez 30 minut w temperaturze pokojowej (RT). Po ostatnim płukaniu jako substrat zastosowano para-nitrofenylofosforan (Sigma Chemical Company, USA) w buforze dietyloaminowym (pH 9,8), a OD405 mierzono kinetycznie za pomocą czytnika płytek mikrotitracyjnych (Tecan, Grödig, Austria).

2.4. IgG i IgM aCL

Zostały one określone w surowicy za pomocą wewnętrznego testu ELISA aCL w fazie stałej. W skrócie, mikropłytki polistyrenowe (średnio wiążące, Costar, Cambridge, MA, USA) zostały pokryte kardiolipiną (Sigma, St. Louis, USA) i zablokowane 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS) (Sigma, St. Louis, USA) w soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS). Po przemyciu PBS, nakładano rozcieńczone próbki w 10% FBS-PBS i inkubowano przez 2,5 godziny w RT. System wykrywania był taki sam jak w przypadku aPS/PT ELISA.

2.5. IgG i IgM anty-GPI

Zostały one zmierzone za pomocą wewnętrznego testu ELISA. W skrócie, wysoko wiążące polistyrenowe płytki mikromiareczkowe pokryte 50 uL/basenik GPI (10 mg/L) w PBS inkubowano przez dwie godziny w temperaturze RT. Następnie płytki przemywano PBS zawierającym 0,05% Tween-20 (PBS-Tween) i inkubowano z próbkami rozcieńczonymi w PBS-Tween przez 30 minut w temperaturze RT. System detekcji był taki sam jak w aPS/PT ELISA.

Wszystkie testy aPL były wykonywane w tych samych próbkach surowicy. Pacjenci i kontrole byli badani w tym samym czasie. Żaden z pacjentów ani kontroli nie był w ciąży w czasie oznaczania aPL.

2.6. Analiza statystyczna

Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu programu SPSS 15.0. Do oceny skuteczności diagnostycznej mierzonych markerów zastosowano analizę ROC (receiver operating characteristic) oraz pole pod krzywą (area under the curve – AUC). Wyniki wieloczynnikowych modeli logistycznych przybliżono za pomocą ilorazu szans i jego 95% przedziału ufności (OR ). Dwustronna wartość < 0,05 była uznawana za istotną statystycznie.

3. Wyniki

Każdy pacjent dodatni dla któregokolwiek z badanych aPL był badany ponownie co najmniej 12 tygodni po pierwszej wizycie i tylko trwale podwyższone poziomy aPL były uznawane za wynik dodatni. Częstość występowania wszystkich badanych aPL jest przedstawiona w Tabeli 3. W sumie 169 pacjentek doświadczyło zachorowalności na ciążę definiowanej według kryteriów APS, a 41 (24%) z nich wykazało trwałe dodatnie wyniki dla co najmniej jednego z mierzonych aPL. Najwyższą częstość występowania stwierdzono dla aCL i aPS/PT (13%), podczas gdy częstość występowania dla LA i anty-GPI była niższa (7%) (tab. 3). Jedenaście pacjentek (6,5%) było dodatnich pod względem aPS/PT, podczas gdy wszystkie pozostałe badane aPL były ujemne. Sześć z nich miało nawracające poronienia przed 10. tygodniem ciąży, dwie doświadczyły niewyjaśnionego zgonu morfologicznie prawidłowego płodu po 10. tygodniu ciąży, jedna urodziła przedwcześnie, a dwie doświadczyły zarówno nawracających poronień, jak i porodu przedwczesnego. Biorąc pod uwagę zrewidowane kryteria laboratoryjne APS z Sydney, u 17,8% (30/169) pacjentek stwierdzono dodatni wynik testu na obecność LA lub aCL i/lub anty-GPI. Spośród nich 22 były leczone heparyną drobnocząsteczkową (LMWH) i małą dawką aspiryny (LDA), co doprowadziło do udanego zajścia w ciążę. Sześć kobiet nie zaszło w kolejne ciąże; trzy z nich przeżyły udaną ciążę przed wystąpieniem powikłań po APS. U dwóch kobiet kolejne ciąże pojedyncze nie powiodły się mimo leczenia przeciwzakrzepowego. Po dołączeniu wyników aPS/PT ujawniono dodatkowe 6,5% (11/169) pacjentek z niekorzystnym wynikiem ciąży, który był pozytywny dla aPL.

Częstość występowania aPL wśród 42 pacjentek, które doświadczyły mniej niż trzech poronień przed 10. WG (i nie spełniały kryteriów klasyfikacji APS) była bardzo niska i nie wykazywała różnic w porównaniu ze zdrowymi kobietami.

Analizy statystyczne nie wykazały związku wyższych poziomów aPL z niekorzystnym wynikiem ciąży.

Poddając analizie każdą z trzech kategorii zachorowalności w ciąży uwzględnionych w kryteriach klasyfikacji APS tylko przeciwciała aPS/PT były statystycznie istotnie związane z jednym z trzech rodzajów niekorzystnego wyniku ciąży (skorygowane o wiek) (Tabela 4). W rzeczywistości są to jedyne aPL o istotnie wyższej częstości występowania u pacjentek doświadczających nawracających poronień przed 10. tygodniem ciąży w porównaniu ze zdrowymi kobietami. Przeciwnie, przeciwciała anty-GPI nie wykazywały związku z żadnym rodzajem zachorowalności w ciąży. aCL i LA były związane z powikłaniami położniczymi pojawiającymi się w późnym okresie ciąży, natomiast nie wykazywały związku z zachorowalnością we wczesnym okresie ciąży.

W celu oszacowania względnego ryzyka pozytywnego wyniku w różnych testach aPL (LA, aCL, anty-GPI i aPS/PT) dla powikłań położniczych charakterystycznych dla APS przedstawionych jako OR z 95% przedziałem ufności przeprowadzono analizy skorygowane względem wieku. Jak pokazano w tabeli 5, tylko przeciwciała aCL i aPS/PT prezentowały podwyższone ryzyko powikłań położniczych (OR 7,4 i OR 7,4 , odpowiednio).

W naszej grupie 169 pacjentów, 12 (6%) miało historię zakrzepicy, a częstość występowania wszystkich badanych aPL była wśród nich wyższa w porównaniu ze zdrowymi kontrolami (). Wyłączenie tych 12 pacjentów z analiz regresji logistycznej wykazało, że częstości występowania przeciwciał aCL i aPS/PT były nadal istotnie wyższe w porównaniu ze zdrowymi kontrolami ( i , resp.).

4. Dyskusja

Podczas gdy w kilku badaniach oceniano dodatniość aPL u pacjentów z APS z historią zakrzepicy, tylko w kilku badaniach ustalono związek różnych aPL z poszczególnymi nieprawidłowościami położniczymi charakterystycznymi dla APS. Powstaje pytanie, czy taki sam profil aPL występuje u pacjentów z APS z zakrzepicą w wywiadzie w porównaniu z APS położniczym. Istnieje powszechna zgoda co do konieczności wykonywania badań przesiewowych w kierunku LA, aCL i anty-GPI, ale rola innych autoprzeciwciał pozostaje kontrowersyjna. Dlatego też zasugerowano konieczność przeprowadzenia większej liczby badań kohortowych w celu określenia częstości występowania niekryterialnych aPL w utracie ciąży. Od tego czasu nasza grupa skupiła się na ocenie częstości występowania przeciwciał aPS/PT wśród pacjentek doświadczających różnych powikłań położniczych w czasie ciąży.

Stwierdziliśmy ogólną częstość występowania aPS/PT wynoszącą 13,0%, aCL wynoszącą 12,4%, LA i anty-GPI mniejszą niż 8,0% w naszej grupie pacjentek z powikłaniami położniczymi charakterystycznymi dla APS. Zarówno aPS/PT, jak i aCL występowały znamiennie częściej w naszej kohorcie pacjentek w porównaniu z grupą zdrowych dawców krwi. Jednakże aCL korelował jedynie z późną zachorowalnością na ciążę i wcześniactwem, podczas gdy aPS/PT były jedynymi przeciwciałami związanymi z wczesną nawracającą utratą ciąży, jak również z późną zachorowalnością na ciążę i wcześniactwem. Nasze wyniki są zgodne z sugestią Clarka i wsp., aby wczesna nawracająca utrata ciąży związana z aCL została wycofana z kryteriów klasyfikacyjnych ze względu na niespójną częstość występowania aCL w tej populacji, a rosnąca liczba dowodów wskazuje na fakt, że ta kliniczna manifestacja APS jest odmienna od późnej utraty lub wczesnego porodu z zawałem łożyska. Niemniej jednak, jak wynika z naszych wyników, oznaczanie aPS/PT w związku z wczesną nawracającą utratą ciąży może być korzystne. Stwierdziliśmy, że 7% (11/169) pacjentek było dodatnich pod względem aPS/PT i ujemnych pod względem wszystkich innych badanych aPL, a 63% (7/11) z nich doświadczyło wczesnej nawracającej utraty ciąży. Tylko jedno opublikowane badanie również potwierdziło związek przeciwciał antyprotrombinowych z wczesną utratą ciąży, jednak różniło się ono od obecnego badania tym, że mierzyło aPT-A i obejmowało pacjentki, których ciąże zakończyły się spontanicznie w ciągu 20 WG . Biorąc pod uwagę zrewidowane kryteria laboratoryjne APS z Sydney, tylko 17,8% (30/169) pacjentek w naszym badaniu było dodatnich dla LA lub aCL i/lub anty-GPI, ale gdy aPS/PT był oceniany jako dodatkowy parametr, 24,8% (41/169) pacjentek było dodatnich dla aPL.

Określiliśmy również częstość aPL wśród 42 pacjentek, które doświadczyły mniej niż 3 poronień przed 10. WG i nie spełniały kryteriów klasyfikacji APS. Zgodnie z naszymi oczekiwaniami częstość występowania wszystkich aPL w tej grupie była bardzo niska (<7%) i nie odbiegała od częstości stwierdzanych u zdrowych kobiet.

Przegląd piśmiennictwa ujawnił 12 badań datowanych od 1997 do 2013 roku. Ponad połowa artykułów została opublikowana przed 2006 rokiem, kiedy to przyjęto nowe, zmienione kryteria klasyfikacyjne. W pięciu badaniach badano tylko przeciwciała aPT-A, które (według nowszych danych) mają mniejsze znaczenie dla APS . Wśród pięciu większych badań, rekrutujących ponad 100 pacjentów, trzy wykazały znaczący związek aPS/PT lub aPT-A z powikłaniami położniczymi; jedno nie wykazało żadnego znaczącego związku; jednak mierzyły one tylko przeciwciała aPT-A , a jedno zostało przeprowadzone przed 2006 r. i rekrutowało pacjentki z więcej niż dwoma nawracającymi poronieniami, zamiast trzech . Sprzeczne dane w piśmiennictwie oraz brak badań nad rolą przeciwciał antyprotrombinowych w położniczym APS skłoniły nas do przeanalizowania występowania tych przeciwciał w różnych wczesnych i późnych niekorzystnych następstwach ciąży. Ogólna częstość występowania przeciwciał aPS/PT w naszym badaniu wyniosła 13,0%. Liczba ta jest wyższa od podanej przez Andreoli i wsp., którzy dokonali przeglądu 120 badań dotyczących LA, aCL i anty-GPI i podali ogólną częstość występowania aPL szacowaną na 6% dla zachorowalności w ciąży. Rzadkie badania dotyczyły znaczenia klinicznego przeciwciał antyprotrombinowych w odniesieniu do niekorzystnych wyników położniczych. Akimoto i wsp. stwierdzili, że średnie miano przeciwciał antyprotrombiny-1 u pacjentek z poronieniami samoistnymi było większe niż u kobiet w ciąży prawidłowej. Kolejne badania nie wykazały jednak związku przeciwciał antyprotrombinowych (aPT lub aPS/PT) z wczesną nawracającą utratą ciąży. Bertolaccini i wsp. stwierdzili korelację między aPS/PT a śmiercią płodu po 10. tygodniu ciąży, ale nie z wczesną utratą ciąży lub wcześniactwem. Marozio i wsp. wykazali dodatnią korelację między aPT-A a niekorzystnym wynikiem późnej ciąży. W dwóch ostatnich badaniach stwierdzono korelację między aPS/PT a nieprawidłowościami położniczymi, jednak w żadnym z nich nie określono rodzaju powikłań ciąży.

Nasze badanie nie potwierdziło związku anty-GPI lub LA z żadnym z niekorzystnych wyników ciąży. Jest to zgodne z wnioskami z przeglądu systematycznego, co sugeruje, że obecnie nie ma wystarczających danych, aby ustalić jakikolwiek istotny związek między anty-GPI a zachorowalnością w ciąży. Również w badaniu Clarka i wsp. , które objęło 2257 kobiet uczęszczających do kliniki wysokiego ryzyka ciąży, mniej niż 1% pacjentek z wczesnym poronieniem nawracającym uzyskało pozytywny wynik testu na obecność LA, podczas gdy z drugiej strony pacjentki z pozytywnym wynikiem testu na obecność LA istotnie częściej miały w wywiadzie zakrzepicę. Możliwe, że LA i anty-GPI są znacznie bardziej związane z zakrzepowym APS niż położniczym APS, podczas gdy aCL i aPS/PT wydają się być związane z oboma typami APS.

Dokładność diagnostyczna poszczególnych aPL dla strat ciąż zdefiniowanych przez kryteria klasyfikacji APS, określona przez AUC, była niska, wahając się od 0,499 dla anty-GPI do 0,549 dla aCL lub aPS/PT (Tabela 5). W naszym poprzednim badaniu AUC dla różnych aPL i APS (zakrzepowych lub położniczych) wahało się od 0,88 dla IgG aCL do 0,55 dla IgM anty-GPI, podczas gdy Otomo i wsp. określili AUC (dla zmienionych kryteriów z Sydney) na 0,688 . Niektóre pacjentki z objawami klinicznymi znamiennymi dla APS, spełniające kryteria kliniczne, są ujemne dla wszystkich badanych aPL i w tej grupie aPS/PT mimo niższego AUC może poprawić rozpoznanie APS zwiększając czułość całkowitego aPL.

Do tej pory nie wyjaśniono mechanizmu, w jakim przeciwciała antyprotrombinowe mogą brać udział w zachorowalności w ciąży. Jest jednak bardzo prawdopodobne, że istnieje więcej możliwych dróg ich działania. Sugerowano, że mogą one prowadzić do utraty ciąży poprzez promowanie mikronaczyniowej zakrzepicy łożyskowej, co zostało poparte wynikami badań histologicznych. Trofoblast łożyskowy jest głównym organem, w którym fosfatydyloseryna jest silnie wyeksponowana na zewnętrznym listku błony. Podczas różnicowania embrionalnego i łożyskowego dochodzi do zaburzenia asymetrii lipidów, co prowadzi do ekspozycji fosfatydyloseryny na zewnętrznej powierzchni. Przeciwciała przeciw protrombinie mogą krzyżować protrombinę na powierzchni komórek, gdzie mogą komplikować ciążę poprzez aktywację dopełniacza lub poprzez zakłócanie sygnalizacji, co wydaje się być istotnym czynnikiem manifestacji choroby na podstawie wyników eksperymentów in vivo. Zaobserwowano zwiększoną liczbę zdarzeń apoptotycznych komórek olbrzymich w ektopacencie eksponowanym na fosfatydyloserynę, co może prowadzić do niedostatecznego rozwoju łożyska, skutkującego małowodziem lub utratą płodu. Z drugiej strony, zaobserwowano, że u myszy protrombina odgrywa ważną rolę w rozwoju zarodka i że niedobór protrombiny powoduje śmiertelność zarodka i noworodka. Nie ma wątpliwości, że wyjaśnienie szlaków, w których przeciwciała przeciw protrombinie są zaangażowane w patogenezę APS wymaga dalszych badań, niemniej jednak wykazano, że pacjenci leczeni z powodu APS mają dobre wyniki ciąż. W przeglądzie dokonanym przez Marchetti i wsp. stwierdzono, że konieczne jest prowadzenie badań przesiewowych u pacjentek z APS wysokiego ryzyka w celu poprawy wyników ciąż, a my wykazaliśmy, że badania przesiewowe profilu aPL obejmujące aPS/PT, oprócz LA, aCL i anty-GPI, mogą umożliwić lepszą ocenę pacjentek z APS wysokiego ryzyka i ewentualnie przewidywać dalsze straty ciąż. Podobnie Ulcova-Gallova i wsp. zasugerowali, że oznaczanie aPL tylko przeciwko kardiolipinie u pacjentek z niepowodzeniami rozrodu nie jest wystarczające dla diagnostyki położniczo-ginekologicznej; dlatego też badanie aPS/PT w tej grupie pacjentek może być uzasadnione.

5. Wnioski

aPS/PT są związane z niekorzystnym wynikiem ciąży niezależnie od innych przeciwciał antyfosfolipidowych. Dlatego pomiar aPS/PT może poprawić ocenę pacjentek z wczesną nawracającą utratą ciąży, niewykrytą za pomocą innych testów aPL. Konieczne są dalsze badania obejmujące większą liczbę pacjentek z powikłaniami ciąży i/lub niepowodzeniami rozrodu oraz pozornie zdrowych dawców, aby określić niezależny wpływ różnych przeciwciał antyfosfolipidowych, jak również aPS/PT, i potwierdzić ich potencjalne zastosowanie w praktyce klinicznej.

Skróty

Konflikt interesów

Autorzy oświadczają, że nie mają konfliktu interesów.

Podziękowania

Ta praca została wsparta przez Ministerstwo Szkolnictwa Wyższego, Nauki i Technologii Słowenii poprzez Narodowy Program Badawczy Grant (nr P3-0314).

.