— FRAPcms

FRAP は生きた細胞の中で蛍光標識した分子の移動度を調べる蛍光顕微鏡法である。

原理：

FRAP は最新の共焦点顕微鏡を使って実施することができます。 例えば、GFPタグの付いた抗体によって、目的の分子を蛍光標識する必要がある。 典型的なFRAP実験では、3つの異なる段階を経る。 まず、対象領域の初期蛍光が測定される。 次に、選択された領域内で蛍光分子を光退色させる。 これは、レーザービームを各領域に集光することによって行われ、強い光照射と蛍光物質の消滅が起こる。 その結果、蛍光を発しているはずの試料に暗い領域が観察される。 最後に、周囲の蛍光性分子が試料中を拡散し、光退色した分子を無傷の分子と交換することができる。 この蛍光回復は時間とともに測定される。

多くの要因が回復速度論に影響するため、FRAP実験は十分に計画し、得られたデータを慎重に分析する必要がある。 そうすれば、数学的モデリングを用いて拡散係数や分子の移動度パラメータを求めることができる

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