FPLCとHPLCの違いについて

FPLCは高速タンパク質液体クロマトグラフィー、HPLCは高速液体クロマトグラフィーを意味します。 両者の手法は似ていますが、そのクロマトグラフィー手法には大きな違いがあります。 HPLCは、主に液体サンプルの定量・定性分析に用いられる分析技術である。 一方、FPLCはタンパク質混合物を分離し、分離した目的成分を回収する精製技術である。 HPLCもFPLCもポンプ、検出器、バルブ、ソフトウェアなどを使用しますが、FPLCではフラクションコレクターだけでなく、pHモニターや導電率モニターも使用します。 HPLCとFPLCを区別するもう一つの方法は、HPLCが分析技術であるのに対し、FPLCは分取技術と考えられていることです。

HPLCでは、逆相クロマトグラフィーが最も一般的で、いくつかの方法が分離に使用されています。 HPLCは移動相に溶媒を使用し、FPLCは移動相に塩緩衝液を使用します。 FPLCでは、イオン交換、ゲルろ過、アフィニティなどの精製方法と、あまり使用されない他の方法が使用されます。

HPLCポンプヘッドはステンレス製で、流量は通常10ml/minを超えませんが、背圧性能は通常6000psi以上となります。 FPLCポンプヘッドはチタンまたはPEEK材料で作られており、ベンチトップポンプは150 mls/分という高い流量を供給できますが、この高流量での背圧はおよそ725 psiになります。 FPLCの流量は通常HPLCよりも高く、背圧は通常低くなります。

カラムもカラム材料や粒子径と同様に異なります。 HPLCカラムはステンレス鋼で作られています。 FPLCカラムは、ガラス製で上下に高性能樹脂を使用したもの、またはPEEK製です。

ほとんどのHPLC樹脂は、非常に高い背圧に耐えられる小さな粒子サイズのシリカビーズでできています。 FPLCでは、アガロース、ポリマー材料、またはシリカ材料が使用されています。 FPLCでは、アガロースや高分子材料、シリカ材料などを使用します。 FPLCの樹脂は、前述の材料とサイズのために、非常に高い背圧に対応することができません。

HPLC では通常、流路にステンレスを使用しますが、FPLCの樹脂はどのようなものですか。 FPLCの流路では、ステンレス鋼は使用せず、チタン、PEEK、その他の高性能複合材料に置き換えます。

HPLCは低分子化合物の分離に使用されます。 FPLCは、タンパク質、ヌクレオチド、ペプチドなどの大きな生体分子の精製に使用されます。

ソフトウェアも2つの技術で異なっています。 HPLCクロマトグラフィーソフトウェアは、装置を制御し、データを分析します。 FPLCのソフトウェアは、モジュールを制御するとともに、精製されたサンプルをフラクションコレクターに集める作業を統合的に行います。 FPLCシステムでは、UV吸収のモニタリングに加えて、pHと導電率もモニタリングします。

HPLCとFPLCの性能は、その導入以来、向上しています。 1969年、最初のHPLCがWaters Corporationによって商業的に導入された。 最初のFPLCシステムは1982年にファルマシア社によって開発された。 今日、より多くの企業がHPLCソリューションを提供し、FPLCソリューションを提供しています。