PLOS ONE

Materials and methods

Study design

This trial used a quasi-experimental single-arm time series design.

Participants and setting

This research was a feasibility study. A minta nagysága 11 szoptató nő nyál OT-szintjéről beszámoló korábbi kutatáson alapult . A terhes nők plazma OT-szintjéről beszámoló korábbi tanulmányok körülbelül 10-20 alanyra terjedtek ki . A részvételi kritériumok a következők voltak: egyszülős szülést terveztek spontán koponyaszüléssel; a terhesség 38. és 40. hete között; ázsiaiak és tudnak japánul írni és olvasni; engedélyt kaptak a szülészorvostól vagy a szülésznőtől a részvételre. A kizárási kritériumok a következők voltak: a várandóssággal kapcsolatos bármilyen gyógyszert szednek; orvosi vagy terhességi szövődményekkel és mentális betegséggel küzdenek; a kórtörténetükben szerepel az asszisztált reprodukciós technológiával történő kezelés; a terhesség előtti BMI > 25; tervezett megindított szülés; elhúzódó terhességet tapasztaltak; korábban császármetszésen estek át; szoptatják gyermeküket. A vizsgálatban résztvevők toborzását bemutató folyamatábra az 1. ábrán látható.

Expand

Amikor a 34. terhességi hétnél járóbeteg-szakrendelésre jogosult terhes nők terhesgondozásra jelentkeztek, szóban ismertettük a kutatásunkat egy nővér és szülészorvos nélküli helyen. A beleegyezés megszerzése után a résztvevővel együtt határoztuk meg a 38. terhességi hét utáni első beavatkozási napot. A nők ekkor kaptak egy visszautasítási űrlapot is, azzal a magyarázattal, hogy bármikor visszaléphetnek mindenféle hátrány nélkül. A vizsgálat adatgyűjtő létesítményében a 37. heti szűrés után minden terhes nőnél kismedencei vizsgálatot végeztek. A 39. terhességi hét után a szülészorvos döntése alapján membrántisztítás végezhető.

A kísérleteket a kórházban 3 egymást követő napon keresztül tartották. Voltak olyan alanyok, akik a kísérlet előtt és után szülészorvosok által végzett perinatális ellenőrzésen vettek részt. Az adatokat a japán Kanagawa város egyetlen szülészeti kórházában gyűjtötték 2015 júniusa és 2015 augusztusa között.

A vizsgálati protokollt a tokiói Szent Lukács Nemzetközi Egyetem (Tokió, Japán) intézményi felülvizsgálati bizottsága hagyta jóvá (No. 15-011). A vizsgálatot regisztrálták a japán egyetemi kórházak orvosi információs hálózatának klinikai kísérleti nyilvántartásában (UMIN000017911).

Eljárások

A mellstimulációs beavatkozás időtartama 3 nap volt. A napszakos hatások ellenőrzésére ugyanazt a napszakot használták. A nyálgyűjtés a 10:00 és 16:00 óra közötti időszakban történt. A résztvevőket megkérték, hogy a beavatkozás napja előtt tartózkodjanak a nemi közösüléstől és az alkoholfogyasztástól. Arra is utasították őket, hogy a beavatkozás előtt 1 órával fejezzék be az étkezést, mossanak fogat, és ne dohányozzanak. Arra is megkérték őket, hogy ne használjanak rúzst. A kísérletet 30 perccel 100 ml víz bevitele után kezdték el.

A vizsgálat kezdetén a méhnyak pontszámát a méhnyak érettségét (2. ábra; méhnyakellenőrzés) módosított Bishop-pontszámmal értékelték. A méhnyak érése egy lehetséges lehetőség lehet a beavatkozás értékelésére a végponthoz képest. Az értékelők 3 bábából álltak, akik 10 éves tapasztalattal rendelkeznek az értékelés standardizálása érdekében.

Kiterjesztés

A résztvevők 3 napon keresztül végezték a mellstimulációt egy kísérő szülésznővel együtt a kórházban. A beavatkozási technika standardizálása érdekében egy szülésznő 10 percen keresztül bemutatta, hogyan kell elvégezni a mellstimulációt egy gyapjúból készített mellmodell és egy nyomásmérő műszer (Perineométer, OWOMED, Gyeonggido, Dél-Korea) segítségével. Az ajánlott stimulációs nyomás 20 és 50 mmHg között volt, ami kíméletes nyomás, és nem károsítja a mellbimbót. A percenkénti 69 ütéses stimulációs ritmus eléréséhez egy világító elektromos metronómot (SQ50V, Seiko Watch Corporation, Tokió, Japán) használtak irányadónak hang nélkül. Mindkét mellet 15 percig stimuláltuk, a jobb oldalon kezdve, váltakozva a mellek között, hogy megelőzzük a méh túlstimulációját, összesen napi 1 órán keresztül. Az emlőstimulációt úgy végeztük, hogy a külső areolától a mellbimbóig a hüvelyk-, a mutató- és a középső ujj segítségével olyan mértékben csíptük az emlőt, hogy az ne fájjon. A mell közvetlen önstimulációját a bal vagy a jobb kézzel, tiszta lóolajjal (Sonbahyu; Yakushido, Fukuoka, Japán) végeztük. A mellstimuláció során mások jelenlétével kapcsolatos aggályok vagy aggodalmak eloszlatása érdekében szoptatós fedelet használtak. Kezeltük az időt és értesítettük a résztvevőket.

A beavatkozás során kardiotokográfiás (CTG) méréseket végeztünk a méh aktivitásának rögzítésére és a magzati szívfrekvencia ellenőrzésére. A megfelelő méhösszehúzódást úgy definiáltuk, hogy 10 percen belül legalább 3, egyenként 40 másodpercig tartó összehúzódás történt. A méhösszehúzódás gyakorisága szintén egy lehetséges lehetőség a beavatkozás értékelésére a végponthoz képest. A résztvevők egy előkészített filmet néztek (pl. vonatutazás Európa-szerte), hogy kontrollálják a kísérleti környezetet esetlegesen befolyásoló külső tényezőket. A beavatkozás után a résztvevők egy kérdőívre válaszoltak a kísérleti beavatkozás megvalósíthatóságáról. A méhnyak érését a beavatkozás végén újraértékelték.

A kísérleti beavatkozás után minden résztvevő banki átutalással kapott díjat a vizsgálatban való részvételért (3000 \ vagy kb. 30 USD).

A beavatkozást 3 szülésznő végezte, akik az első szerzőből és 2 kutatóasszisztensből álltak. Megfelelő CTG-olvasási képességgel rendelkeztek, amelyet több mint 5 éves klinikai tapasztalatukból és több mint 100 esetben végzett vajúdásirányításból szereztek ehhez a megvalósíthatósági tanulmányhoz. A beavatkozás standardizálása érdekében a résztvevőknek szóló magyarázatokat és a beavatkozás részleteit egységesítették. Ezenkívül az első szerző következetesen részt vett a kísérletekben kétszer az elején, hogy biztosítsa, hogy a kutatási asszisztensek megfelelően végre tudják hajtani a beavatkozási eljárást. Az A kutatási asszisztens a kísérletek 30,3%-áért, B a 3,0%-áért, az első szerző pedig a többi kísérletért volt felelős. Ezenkívül a napok 40%-ában, amikor A kutatóasszisztens volt felelős a kísérletekért, az első szerző a kórházban tartózkodott, és megerősítette a kísérletek standardizálását.

Saliva gyűjtési eljárás

A nyálvizsgálatok viszonylag könnyen elvégezhetők és minimálisan invazívak a terhes nők számára. Mérsékelt korrelációról (r = 0,41-0,59) számoltak be a nyál OT-szintje és a plazma OT-szintje között . Továbbá pozitív korrelációt (r = 0,89) mutattak ki a nyál OT és a plazma OT szintje között olyan betegeknél, akiknek anorexia nervosa esetén nem volt önhánytatásuk .

A nyálmintákat 10 perccel a mellstimulációs beavatkozás előtt és 15, 30, 60, 75 és 90 perccel azt követően vették, összesen 18 mintát résztvevőnként. Egy milliliter nyálat gyűjtöttünk stimulálatlan passzív nyálból az OT-szint méréséhez enzimhez kötött immunszorbiens teszttel (ELISA; ENZO Life Sciences, NY, USA). Az ELISA kézikönyv szerint a vizsgálaton belüli és a vizsgálatok közötti variabilitási együttható 12,6% – 13,3%, illetve 11,9% – 20,9%.

A nyálgyűjtési eljárás standardizálása érdekében a résztvevőket arra kérték, hogy a nyálukat 3 percig a szájukban egyesítsék. Ezt követően a résztvevők nyálgyűjtő segédeszköz (Salimetrics, PA, USA) segítségével 1,5 ml-es polipropilén csőbe (Eppendorf, NY, USA) gyűjtöttek kb. 1,0 ml nyálat minden egyes mintához. Ha ezt a mennyiséget 3 perc után nem sikerült összegyűjteni, a résztvevők megismételték a nyálgyűjtési eljárást. A begyűjtött mintákat azonnal fagyasztóban (Cryo Porter CS-80C, Scinics Corp., Tokió, Japán) -80°C-on tárolták. Az OT-szintet a Carter et al. módszerével határozták meg. A többi kísérleti eljáráshoz 500 KIU/μL aprotinint adtunk a felolvasztás után, hogy megakadályozzuk a proteolitikus degradációt.

Az oxitocin receptor polimorfizmusai

Az OT receptor egynukleotid polimorfizmusáról azt jelentették, hogy csökkenti az OT iránti érzékenységet . Különösen az OT receptor gén rs53576 GG homozigóta típusával rendelkező nők jelentették a késői aktív szülésbe való átmenetet. A jelen vizsgálatban bukkális nyálkahártya-mintákat nyertünk 3 OT receptor gén polimorfizmus (azaz rs53576, rs2254298 és rs1042778) elemzéséhez TaqMan SNP assay (Applied Biosystems, Thermo Fisher, MA, USA) segítségével történő genotipizálással.

Megvalósíthatóság a gyakorlatiasság és elfogadhatóság szempontjából

Az emlőstimulációs beavatkozási protokoll megvalósíthatóságát a gyakorlatiasság és elfogadhatóság szempontjából értékeltük . A kísérleti módszer gyakorlatiassága szempontjából az elemezhető minták arányát és a nemkívánatos események előfordulását vettük figyelembe. A kísérleti módszer elfogadhatósága szempontjából a beavatkozás utáni lemorzsolódási arányt vettük figyelembe. A jelen vizsgálatban a fáradtság és a fájdalom értékelésére a vizuális analóg skálát (VAS) használták, amely az egyik legérvényesebb, legmegbízhatóbb és leggyakrabban használt mérőeszköz az önbevallás mérésére. A nők a következő megjegyzésekre és kérdésekre válaszoltak a következő skálák vagy : “Kérjük, adja meg visszajelzését a mellmasszázzsal kapcsolatban; 1) Fáradtak-e a karjai és az ujjai? 2) Volt-e fájdalma a mellbimbójában?” és “Kérjük, adja meg visszajelzését a nyálgyűjtéssel kapcsolatban; 1) Tapasztalt-e fáradtságot a nyálgyűjtés során?”. A következő kérdések megválaszolásánál egy 4 fokozatú Likert-skálát használtunk: 1) “Kellemetlen volt-e a mellbimbó érintése?”, 2) “Könnyen érthető volt-e a stimulációs módszerre vonatkozó utasítás?”, 3) “Szeretné-e ezt az eljárást a következő terhessége során újra elvégezni?”, és 4) “Szeretne-e tájékoztatást adni erről a technikáról a barátainak?”. Figyelembe véve a kelet-ázsiaiak kulturális hátterét, akik hajlamosak a középpontot választani, az attitűd mérésére egy 4 fokozatú Likert-skálát használtak, hogy elkerüljék a kétértelműséget ezeknél a kérdéseknél. Másrészt az ingerlés ritmusára és intenzitására vonatkozóan egy 5 fokozatú Likert-skálát használtunk, amely a “mérsékelten” válaszlehetőséget is tartalmazza. Ezenkívül a résztvevők válaszoltak a környezetre vonatkozó kérdésekre is, ahol a beavatkozást végezték.

Adatelemzés

Az összes változó átlagát (M), szórását (SD), standard hibáját (SE) és mediánját kiszámították. Lineáris kevert modellt alkalmaztunk AR (1) kovariancia struktúrát alkalmazva, amelyben az OT szint volt a függő változó, a beavatkozás napja és időpontja pedig a fix hatások. A Little-féle MCAR-tesztet végeztük el. Az összes OT-szint mellett az életkor, a terhességi hetek a beavatkozáskor, a szülészeti anamnézis, a családi állapot, a partnerrel való együttélés és az ≥ 12 éves iskolai végzettség is bekerült az imputációs eljárásba, mint az OT-szintet befolyásoló tényezők. Az eredmény p = 0,980 volt, és a nullhipotézist nem utasították el. A hiányzó adatok fő oka az elégtelen nyálmennyiség volt, és nem az OT-érték miatt hiányzó adatok, így a hiányzó adatok ebben a vizsgálatban a teljesen véletlenszerűen hiányzó adatokat tükrözték (MCAR). A hiányzó adatok imputálásához az SPSS Missing Values többszörös imputálási eljárását használtuk. Öt imputált adatkészletet hoztunk létre. Az adatok nem normális eloszlásúak voltak. A Spearman-féle korrelációs együtthatót használtuk a nyál OT-szint és a nyaki pontszám vagy jellemzők közötti korreláció tesztelésére. A statisztikai elemzéseket az IBM SPSS Statistics (22.0 verzió; Static Base and Advanced Statistics, IBM Japan, Tokió, Japán) segítségével végeztük.