Hemagglutinin

E. FHA

A FHA egy szokatlanul nagy és erősen immunogén hajtű alakú molekula, amely az acelluláris pertussis vakcinák elsődleges összetevőjeként szerepel . Az FHAB 367 kDa prekurzorként szintetizálódik, amelyet az N-terminusán módosítanak és a C-terminusán hasítanak, hogy az érett 220 kDa FHA fehérjét alkossák. Bár hatékonyan szekretálódik az FhaC külső membránfehérjét igénylő folyamat révén, az FHA jelentős része ismeretlen mechanizmus révén a sejtfelszínen marad . Különböző emlőssejttípusokon végzett in vitro vizsgálatok szerint az FHA legalább négy különböző kötődési aktivitással rendelkezik, és négy különálló FHA-kötő doménre tettek javaslatot. Az Arg-Gly-Asp (RGD) triplett , amely az FHA közepén helyezkedik el és a javasolt hajtűszerkezet egyik végére lokalizálódik , az LRI/IAP és a CR3 segítségével serkenti a monocitákhoz/macrofágokhoz és valószínűleg más leukocitákhoz való tapadást. Az FHA CR3-felismerő doménjét még nem sikerült azonosítani. Az FHA rendelkezik egy szénhidrát-felismerő doménnel (CRD) is, amely in vitro közvetíti a csillós légúti hámsejtekhez, valamint a makrofágokhoz való kötődést . Végül azonosítottak egy lektinszerű aktivitást a heparin és más szulfátos szénhidrátok számára, amely közvetítheti a nem nyálkás hámsejtvonalakhoz való tapadást . Ez a heparinkötő hely különbözik a CRD és az RGD helyektől, és szükséges az FHA által közvetített hemagglutinációhoz .

Az FHA-függő fenotípusok in vivo bizonyítása nehezebben volt elérhető. Egy nyúlmodell segítségével Saukkonen és munkatársai 24 órával az intratracheális beoltás után kevesebb FHA mutánst találtak a tüdőben, mint a vad típusú B. pertussis . A vizsgálatukban használt különböző mutánsok in vitro meghatározott kötődési jellemzői alapján arra következtettek, hogy a vad típusú B. pertussis mind a csillós hámsejtekhez, mind a makrofágokhoz tapad, és a laktózzal és anti-CR3 antitesttel végzett versengési kísérletek azt sugallták, hogy mind a CRD-, mind az RGD-függő kötődés szerepet játszik . Egérmodelleket használva azonban mások azt találták, hogy az FHA mutánsok a vad típusú B. pertussis-tól megkülönböztethetetlenek a tüdőben való megmaradás képességét illetően, de a légcső kolonizációban hibásak . Ismét mások , szintén egérmodelleket használva, nem figyeltek meg különbséget az FHA mutánsok és a vad típusú B. pertussis között. Az FHA-nak a B. pertussis anatómiai lokalizációjában a fertőzés során betöltött szerepének teljes és részletes megértésének nehézsége valószínűleg a természetes állati gazdaszervezet (az emberen kívül) hiányát, valamint e molekula és a hozzá kapcsolódó biológiai tevékenységek összetettségét tükrözi.

A közelmúltban a B. bronchiseptica kétféle FHA mutáns származékának létrehozásával vizsgáltuk az FHA szerepét a patogenezisben: az egyik az fhaB, az FHA szerkezeti génjének in-frame delécióját tartalmazza, a másikban pedig az FHA ektopikusan expresszálódik a Bvg- fázisban, a Bvg+ fázis virulenciafaktorainak azon csoportja hiányában, amellyel együtt normálisan expresszálódik . E mutánsok és a vad típusú B. bronchiseptica összehasonlítása azt mutatta, hogy az FHA szükséges és elégséges a patkány tüdőhámsejtekhez való tapadás közvetítéséhez in vitro. A légúti fertőzés patkánymodelljét használva kimutattuk, hogy az FHA feltétlenül szükséges, de nem elegendő a légcső kolonizációhoz egészséges, altatás nélküli állatokban. Az FHA azonban nem volt szükséges a kezdeti tracheális kolonizációhoz altatott állatokban, ami arra utal, hogy a letelepedésben betöltött szerepe a nyálkahártya eszkalátor clearance-aktivitásának leküzdésére irányulhat. Az altatott patkányok használata szintén feltárta az FHA szerepét a perzisztenciában. A B. pertussisról nemrégiben kimutatták, hogy FHA-függő módon gátolja a T-sejtek exogén antigénekre történő proliferációját in vitro . Ezek az adatok együttesen arra utalnak, hogy az FHA in vivo is immunmoduláló funkciókat tölthet be.