Fluorométer

A fluorométer összetevőinek egyszerűsített felépítése

A fluorométerek jellemzően kettős sugárnyalábot használnak. Ez a két sugár együtt dolgozik, hogy csökkentse a sugárzási teljesítmény ingadozásából eredő zajt. A felső sugár áthalad egy szűrőn vagy monokromátoron, és áthalad a mintán. Az alsó sugár egy csillapítón halad át, és úgy van beállítva, hogy megpróbálja a minta által kibocsátott fluoreszcens teljesítményt megfeleltetni. A minta fluoreszcenciájából és az alsó, csillapított sugárból származó fényt külön átalakítók érzékelik, és elektromos jellé alakítják, amelyet egy számítógépes rendszer értelmez.

A gépben a felső sugár által létrehozott fluoreszcenciát érzékelő átalakító a mintától távolabb és a beeső felső sugárhoz képest 90 fokos szögben helyezkedik el. A gépet így építették fel, hogy csökkentsék a felső sugárból származó, a detektorra esetlegesen ráeső szórt fényt. Az optimális szög 90 fok.A beeső fény kiválasztásának kezelésére két különböző megközelítés létezik, ami különböző típusú fluorométereket eredményez. Ha szűrőket használnak a fény hullámhosszának kiválasztására, akkor a készüléket fluorométernek nevezik. Míg egy spektrofluorométer általában két monokromátort használ, egyes spektrofluorométerek egy szűrőt és egy monokromátort használhatnak. Ahol ebben az esetben a széles sávú szűrő a szórt fény csökkentésére szolgál, többek között a monokromátorban lévő diffrakciós rács nem kívánt diffrakciós rendjei miatt.

A fluorométerek fényforrásai gyakran a vizsgált minta típusától függnek. A fluorométerek leggyakoribb fényforrásai közé tartozik a kisnyomású higanylámpa. Ez számos gerjesztési hullámhosszt biztosít, így a legsokoldalúbb. Ez a lámpa azonban nem folyamatos sugárforrás. A xenon ívlámpát akkor használják, ha folyamatos sugárforrásra van szükség. Mindkét forrás megfelelő spektrumú ultraibolya fényt biztosít, amely kemilumineszcenciát indukál. Ez csak kettő a sok lehetséges fényforrás közül.

Az üveg- és szilikaküvetták gyakran azok az edények, amelyekbe a mintát helyezik. Ügyelni kell arra, hogy a küvetta külsején ne hagyjunk ujjlenyomatot vagy bármilyen más nyomot, mert ez nem kívánt fluoreszcenciát eredményezhet. Az edények felületének tisztítására néha “spektro minőségű” oldószereket, például metanolt használnak, hogy minimalizálják ezeket a problémákat.