Sähköakupunktio vähentää maksan ja munuaisten oksidatiivista stressiä nukutetuilla rotilla

13 -ORIGINAL ARTICLE
METABOLISMI

Elektroakupunktio lieventää maksan ja munuaisten oksidatiivista stressiä nukutetuilla rotilla1

Eletroakupuntura atenua o estresse oxidativo no fígado e no rim em ratos anestesiados

Agamenon Honório SilvaI; Lanese Medeiros FigueiredoI; Paulo Araujo DiasI; Alberico Ximenes do Prado NetoII; Paulo Roberto Leitão de VasconcelosIII; Sérgio Botelho GuimarãesIV

IFellow Master Degree, kirurgian osasto, jatko-ohjelma, UFC, Ceara, Brasilia. Tekniset menettelyt, tietojen hankinta ja tulkinta. Artikkeli on osa maisterin tutkinnon väitöskirjaa (AHS)
IIGraduate student, UFC, Ceara, Brasilia. Auttanut teknisissä menettelyissä, tietojen hankinnassa
IIIPhD, apulaisprofessori, koordinaattori, jatko-ohjelma, kirurgian laitos, UFC, Ceara, Brasilia. Tietojen kriittinen tarkistus ja tulkinta
IVPhD, apulaisprofessori, kirurgian laitos, johtaja, LABCEX, UFC, Ceara, Brasilia. Ohjaaja, konseptointi, suunnittelu, tutkimuksen älyllinen ja tieteellinen sisältö, käsikirjoituksen kirjoittaminen, tilastollinen analyysi

Kirjeenvaihto

ABSTRACT

TARKKOITUS: Tutkia yksittäisen sähköakupunktio (EA) -istunnon vaikutuksia akupisteisiin Zusanli (ST-36) ja Zhongwan (CV-12) yhdistettyinä oksidatiivisen stressin säätelemisessä maksassa ja munuaisissa nukutetuilla rottia.
MENETELMÄT: Kahdeksantoista tervettä rottaa, jotka oli satunnaisesti jaettu kolmeen ryhmään (n=6), nukutettiin vatsansisäisesti ketamiinilla (90mg kg-1 ruumiinpaino) + ksylatsiinilla (10mg/kg ruumiinpaino): G-1: kontrolli (anestesia), G-2: anestesia +EA10Hz ja 10 mA, 10 Hz), jota sovellettiin oikeisiin ST-36- ja CV-12-akupisteisiin 30 minuutin ajan. G-3 käsiteltiin samoin käyttäen kymmenkertaisesti korkeampaa taajuutta (100 Hz). G6PDH-aktiivisuus, malondialdehydin (MDA) ja glutationin (GSH) pitoisuudet määritettiin spektrofotometrisesti.
TULOKSET: Maksan MDA- ja GSH-pitoisuudet kasvoivat merkittävästi rotilla, joille annettiin EA 10 Hz (p<0,01) ja EA 100 Hz (p<0,001), verrattuna kontrolliin G-1. Maksan ja munuaisten G6GPH-aktiivisuus väheni merkittävästi G-2:ssa (p<0.01) ja G-3:ssa (p<0.001) verrattuna G-1:een EA100Hz-rotilla. Samanlainen kuvio havaittiin munuaisten G6PDH-aktiivisuudessa EA10Hz-rotilla.
YHTEENVETO: Yksittäinen 30 minuutin EA 10/100Hz-istunto tehostaa lipidiperoksidaatiota ja vähentää samanaikaisesti oksidatiivista stressiä maksa- ja munuaiskudoksissa rotan mallissa.

Avainsanat: Avainsanat: Akupunktio. Sähköakupunktio. Lipidiperoksidaatio. Oksidatiivinen stressi. Rotat.

RESUMO

OBJETIVO: Investigar os efeitos de uma única sessão de eletroacupuntura (EA) aplicada nos acupontos Zusanli (E-36) e Zhongwan (RM-12) simultaneamente, na regulação do estresse oxidativo no fígado e rins em ratos anestesiados.
MENETELMÄT: Kahdeksantoista tervettä rottaa, jotka jaettiin satunnaisesti kolmeen ryhmään (n = 6), nukutettiin ketamiinilla (90 mg / kg ruumiinpainoa) + ksylatsiinilla (10 mg / kg ruumiinpainoa): G-1: kontrolli (anestesia), G-2: anestesia + EA10Hz ja G-3: anestesia + EA100Hz. G-2-ryhmän rotat altistettiin EA:lle (pulssimuotoiset neliöaallot, 10 mA, 10 Hz), jota annettiin oikeaan ST-36- ja VC-12-akupisteeseen 30 minuutin ajan. G-3-ryhmän rotilla käytettiin 10 kertaa korkeampaa taajuutta (100 Hz). G6PDH-entsyymin aktiivisuus sekä malondialdehydin (MDA) ja glutationin (GSH) pitoisuudet tarkistettiin spektrofotometrisesti.
TULOKSET: MDA:n ja GSH:n maksakonsentraatiot kasvoivat merkitsevästi rotilla, jotka altistuivat 10 Hz:n (p <0,01) ja 100 Hz:n (p <0,001) AE:lle, verrattuna kontrolliin. G6GPH-aktiivisuus väheni merkittävästi G-2 (p <0.01) ja G-3 (p <0.001) -ryhmässä maksassa ja munuaisissa verrattuna G-1-ryhmään rotilla, joita hoidettiin 100 Hz:llä.
YHTEENVETO: Yksittäinen 10/100 Hz EA-istunto 30 minuutin ajan lisää lipidiperoksidaatiota ja vähentää samanaikaisesti oksidatiivista stressiä terveiden rottien maksassa ja munuaisissa.

Descriptors: Akupunktio. Sähköakupunktio. Lipidiperoksidaatio. Oksidatiivinen stressi. Rotat.

Esittely

Manuaalinen akupunktio (MA) on yksi perinteisen kiinalaisen lääketieteen tärkeimmistä hoitomuodoista. Siinä käytetään teräviä, ohuita neuloja, jotka työnnetään kehoon hyvin tiettyihin kohtiin (akupisteisiin). MA:ta on käytetty useiden vuosituhansien ajan itämaisissa maissa, ja lääkärit ja potilaat hyväksyvät sen yhä enemmän myös länsimaissa1. Sähköakupunktio (EA) on tämän tekniikan muunnos, jossa pientä sähkövirtaa käytetään kehoon aiemmin työnnettyihin neuloihin, ja sen tulokset näyttävät olevan johdonmukaisemmin toistettavissa monissa kliinisissä ja tutkimusasetelmissa2-4. Zusanli-akupisteeseen (ST-36) kohdistettu EA vähensi lipidiperoksidaatiota iskemian/reperfuusion kokeellisissa malleissa, kuten rotan selkäytimessä5, aivoissa6 ja veriseerumissa7 sekä sian sydänlihaksessa8.

Chakrabarti et al.9. tutkivat yksittäisen, akuutin (7 pulssia/sek., 0,75 volttia) ja kroonisen (4 pulssia/sek., 0,75 volttia) sähköakupunktiohoidon vaikutusta rottien maksan toimintaan vuoropäivinä 21 päivän ajan. Käytettiin kahta selän akupistettä yhdessä ST-36:n kanssa. Kroonisen hoidon jälkeen maksan mikrosomaalinen lipidiperoksidaatioarvo laski merkittävästi. Kun lisäksi otetaan huomioon, että akupisteen ST-36 manuaalinen stimulaatio kykenee vaimentamaan sepsiksen aiheuttamaa munuaisvauriota10, on mahdollista, että kyseisen akupisteen sähköinen stimulaatio voi muuttaa solukalvovaurion indikaattorina toimivan MDA:n pitoisuuksia munuaiskudoksessa.

Fysiologisia prosesseja säätelevät entsyymit. NADPH on tärkein solunsisäinen pelkistysaine, ja sen tuotanto riippuu pääasiassa glukoosi-6-fosfaattidehydrogenaasista. Jos G6PDH:n aktiivisuus estyy, samanaikaisesti vähenee NADPH:n aktiivisuus, joka on olennainen koentsyymi hapettumisvaurioilta suojautumisessa. Solujen eheys ja koko antioksidanttijärjestelmä ovat riippuvaisia NADPH:n riittävästä saannista11. Monissa artikkeleissa on osoitettu ST-36-akupisteen MA:n ja EA:n vaikutukset oksidatiivisen stressin lieventämiseen erilaisissa kokeellisissa sairauksissa5-9. Lisäksi kokeellisissa tutkimuksissa usein käytetyn anestesiaseoksen, ketamiinin ja ksylatsiinin, käyttö voi aiheuttaa jonkinasteista oksidatiivista stressiä terveessä eläimessä12-13.

Vaiemmin on osoitettu, että lisämunuaisista erittyy suuria määriä endogeenisia opioidipeptidejä, kun CV-12-akupistettä stimuloidaan akupunktiolla 2 Hz:n taajuudella14. Kun akupistettä CV-12 stimuloitiin korkeataajuisella EA:lla (15 Hz), havaittiin useita endogeenisten opioidipeptidien lähteitä15. Näin ollen tavoitteenamme oli tutkia, voiko sekä ST36- että CV-12-akupisteitä stimuloiva EA:n käyttö kahdella eri taajuudella, 10 Hz ja 100 Hz, muuttaa maksan ja munuaisten MDA- ja GSH-pitoisuutta ja onko 10 Hz:n ja 100 Hz:n EA:n välillä eroa lipidiperoksidaatiossa ja oksidatiivisessa stressissä terveillä jyrsijöillä.

Menetelmät

Eläinten valmistelu

Lääketieteellisen tiedekunnan pieneläinjalostuslaitoksen (Cearan liittovaltion yliopisto) toimittamia 280-400 g painavia urospuolisia Wistar-rotteja pidettiin kontrolloiduissa ympäristöolosuhteissa (24 °C _suhteellinen kosteus 40-60 %, 12 tunnin vuorotteleva valo- ja pimeyssykli, ruoka ja vesi ad libitum). Ihmisen oikeaa ST-36- ja CV-12-akupistettä vastaavat akupisteet valittiin neulomista ja sähköistä stimulaatiota varten. Käytetty akupisteiden nimikkeistö noudattaa WHO:n nimikkeistöä16. ST-36-akupiste sijaitsee 5 mm sääriluun pään alapuolella polvinivelen alapuolella ja 2 mm lateraalisesti sääriluun etukyhmyyn nähden. ST-36-akupisteen pistäminen stimuloi lateraalista suraalista ihonalaista hermoa, sapheneushermon ihonalaista haaraa ja syvemmällä sijaitsevaa syvää peroneushermoa17-18. CV-12-akupiste sijaitsee ylävatsan anteriorisella keskiviivalla 20 mm rintalastan synkondroosin alapuolella. Tätä aluetta hermottaa 8. interkostaalihermon etummainen ihonalainen haara18.

Materiaalit

Käytettiin kertakäyttöisiä ruostumattomasta teräksestä valmistettuja neuloja (0,20×30 mm, 0,5 cm, DongBang Acupuncture Inc., Chung Nam, Korea). Sähköstimulaattori EL-608 ostettiin NKL Produtos Eletrônicos Ltda:lta, Brusque, Santa Catarina, Brasilia.

Kokeelliset ryhmät

Eläimet nukutettiin vatsansisäisesti ketamiinin (90 mg kg/ruumiinpaino) ja ksylatsiinin (10 mg kg/ruumiinpaino) tuoreella seoksella. Rotat jaettiin satunnaisesti kolmeen yhtä suureen ryhmään seuraavasti:

* Ryhmä 1 (anestesia) – 6 rottaa

* Ryhmä 2 (EA 10Hz) – 6 rottaa

* Ryhmä 3 (EA 100Hz) – 6 rottaa

Ryhmä 1 (kontrolli) rotat anestesoitiin kuvatulla tavalla. Kuusikymmentä minuuttia myöhemmin rottien vatsa avattiin ja maksa ja oikeat munuaiset poistettiin. Ryhmä 2 (EA10Hz) rotat nukutettiin kuvatulla tavalla. Rutiininomaisen ihon desinfioinnin jälkeen 75-prosenttisella etanolilla steriloidut kertakäyttöiset ruostumattomasta teräksestä valmistetut neulat (0,25 mm × 30 mm) työnnettiin kohtisuoraan niin syvälle kuin 2-3 mm oikeaan ST-36- ja CV-12-akupisteeseen. Molempiin neuloihin ja sähköstimulaattoriin (NKL EL-608) kytkettiin elektrodit; pulssitettuja neliöaaltoja, 10 Hz, 10 mA, käytettiin 30 minuutin ajan. Näytteet kerättiin 30 minuuttia myöhemmin. Ryhmän 3 (EA100Hz) rotille tehtiin EA kuten ryhmälle 2. Käytettiin kuitenkin kymmenkertaisesti suurempaa taajuutta (100 Hz).

Biokemialliset määritykset

Määritetyt parametrit olivat G6PDH-aktiivisuus, malondialdehydin (MDA) ja glutationin (GSH) pitoisuudet. Kudosnäytteet pakastettiin nestemäisessä typessä ja säilytettiin lasiputkissa -70º:ssa, kunnes maksan ja munuaisten homogenaatit valmistettiin ja analysoitiin myöhemmin. Lipidiperoksidaatio määritettiin mittaamalla malondialdehydi TBA-reaktiivisina aineina19. Lyhyesti sanottuna 10-prosenttiseen homogenaattiin (0,5 ml) lisättiin H3PO4 (1 %, 3 ml) ja TBA:n vesiliuosta (0,6 %, 3 ml). Määritysalustaa ravisteltiin ja kuumennettiin kiehuvassa vesihauteessa 45 minuutin ajan. Jäähdytyksen jälkeen lisättiin 4 ml n-butanolia ja seosta ravisteltiin. Kun n-butanolikerros oli erotettu sentrifugoimalla 1200 g:n nopeudella 15 minuutin ajan, sen optinen tiheys määritettiin spektrofotometrillä (Beckman DU 640 B; Beckman Instruments, nykyisin Beckman Coulter, Inc., Fullerton, CA, USA), jonka absorptioaallonpituudet olivat 535 nm ja 520 nm. Kahden optisen tiheyden määrityksen tulosten erotus otettiin TBA-arvoksi, ja malondialdehydin (MDA) määrä kiveksissä laskettiin, verrattiin MDA-standardeihin ja ilmaistiin mikromooleina MDA:ta grammaa märkää kudosta kohti. GSH-pitoisuudet arvioitiin Sedlakin ja Lindsayn20 menetelmällä, joka perustuu tioliryhmien ja 5-5-ditiobis(2-nitrobentsoehapon) väliseen reaktioon, jossa syntyy yhdiste, joka absorboi valoa 412 nm:ssä. GSH:n määrä määritettiin standardikäyrästä, joka saatiin samanaikaisesti samoissa olosuhteissa eri GSH-pitoisuuksilla. G6PDH:n aktiivisuus arvioitiin aiemmin kuvatuilla menetelmillä21. Entsyymiaktiivisuus luettiin spektrofotometrisesti.

Data-analyysi

Laskennassa ja tilastollisessa analyysissä käytettiin GraphPad Prism 5.0 -ohjelmaa (GraphPad Software, San Diego California USA, www.graphpad.com). Kaikki tulokset ilmaistiin keskiarvona±SD. Kaikki tiedot testattiin jakauman suhteen (Kolmorogov-Smirnovin testi Dallal-Wilkinson-Lilliefor P-arvolla). Yksisuuntainen ANOVA tai Kruskal-Wallisin testi suoritettiin tarpeen mukaan ryhmien välisten erojen määrittämiseksi MDA- ja GSH-pitoisuuksissa ja G6PDH-aktiivisuudessa maksa- ja munuaiskudoksissa. Post hoc -analyysissä (Tukey tai Dunn) todennäköisyysarvon p<0,05 katsottiin merkitsevän tilastollista merkitsevyyttä.

Tulokset

GSH-määritys

Maksan GSH-pitoisuudet kasvoivat merkitsevästi rotilla, joille annettiin EA 10Hz ja EA 100Hz (p<0,001), verrattuna kontrolliin (kuva 1). Samanlaisia lisäyksiä munuaisten GSH-pitoisuuksissa tapahtui sekä EA10Hz- että EA100Hz-ryhmissä (kuva 2). Lisäksi maksan ja munuaisten GSH-pitoisuudet kasvoivat merkittävästi EA100Hz:llä hoidetuilla rotilla verrattuna EA10Hz-ryhmään.

MDA-analyysi

Maksan MDA-pitoisuudet kasvoivat merkittävästi rotilla, joille annettiin EA10Hz:tä (p<0.01) ja EA100Hz:tä (p<0.001), verrattuna kontrolliryhmään (kuva 3). Munuaisten MDA-pitoisuudet kasvoivat samalla tavalla sekä EA10Hz- että EA100Hz-ryhmissä (kuva 4). Munuaisten MDA-pitoisuudet kasvoivat merkittävästi EA100Hz-ryhmässä verrattuna EA10Hz-ryhmään.

G6PDH Assay

Maksan G6GPH-aktiivisuus väheni merkittävästi EA100Hz-ryhmissä (p<0.001) verrattuna kontrolliryhmään (kuva 5). Samanlainen kuvio havaittiin munuaisten G6PDH-aktiivisuudessa EA10Hz-rotilla. Munuaisten G6PDH-aktiivisuus ei eronnut molemmissa ryhmissä (kuva 6).

Keskustelu

Kokeessamme oksidatiivinen stressi indusoitiin käyttämällä ketamiinia, joka on dissosiatiivinen anestesia-aine, jota käytetään usein joko eläinlääketieteellisissä toimenpiteissä tai kokeellisissa tarkoituksissa. Alva ym.12 osoittivat, että ketamiini johtaa plasman typpioksidipitoisuuksien nousuun, aiheuttaa metabolisen asidoosin ja aiheuttaa oksidatiivisia vaurioita, vaikkakaan saavuttamatta maksatoksisuutta.

Matalataajuisen EA:n antiperoksidatiiviset vaikutukset on osoitettu. Siu ym.6 sähköstimuloivat akupisteitä GB-20, jotka sijaitsevat kaulan takaosassa, takaraivoluun alapuolella, rintalihaksen ja trapeziuslihaksen välisessä syvennyksessä ja ST-36:ssa, käyttäen useita sovelluksia ennen aivojen iskemiaa ja päättelivät, että 2 Hz:n EA:lla pystyttiin osittain säätelemään lipidiperoksidaatiota aivojen iskemiassa. GB-20:llä ja ST-36:lla oli samanlainen hyödyllinen vaikutus6. Tutkimuksessamme EA:n käyttö aiheutti merkittävän MDA-pitoisuuden nousun maksassa (kuva 3) ja munuaisissa (kuva 4) EA10Hz- ja EA100Hz-ryhmissä. Lisäksi lipidiperoksidaatio lisääntyi EA100Hz-ryhmässä EA10Hz-rottiin verrattuna. Tämä viittaa siihen, että munuaiset ovat herkempiä lipidiperoksidaatiolle kuin maksa. Näyttää siltä, että suuria taajuuksia hyödyntävän sähköisen stimulaation käyttö yhdellä istunnolla lisää lipidien peroksidaatiota tässä rotan mallissa.

Yu ym.22 arvioivat neljän eri akupisteen neulastimulaation merkitystä: GB-34 (Yanglingquan), LR-3 (Taichong), ST-36 (Zusanli) ja SP-10 (Xuehai) akupisteiden vaikutusta oksidatiivisen stressin säätelyyn nigrostriataalisessa järjestelmässä 6-hydroksidopamiinia vaurioituneella rotalla ja päättelivät, että akupunktiostimulaatio esti GSH:n tason pienenemisen sekä MDA:n tason nousun.

Kun tutkimme yksittäisen sähköakupunktioistunnon vaikutuksia, kun taas Yu et al.22 arvioi klassisen akupunktiohoidon vaikutuksia, joka suoritettiin kahdesti päivässä 14 päivän ajan, uskomme, että sähköisen stimulaation käyttö yhdessä istunnossa voi olla vastuussa MDA-tasojen noususta. Toisaalta yhdessä istunnossa käytetty EA aiheutti merkittävän GSH-pitoisuuden nousun sekä maksan (kuva 1) että munuaisten (kuva 2) kudoksissa. EA:n suojaava vaikutus on suurempi korkeammilla taajuuksilla, kuten osoittaa EA100Hz-rottien munuaisten lisääntynyt GSH-pitoisuus verrattuna EA10Hz-eläimiin.

G6PDH:lla on erittäin tärkeä rooli solujen vasteessa oksidatiiviseen stressiin. Viime aikoihin asti vallitsi yleinen käsitys, että tämän entsyymin merkitys rajoittuu ihmisen erytrosyytteihin, joilla ei ole muita NADPH:ta tuottavia reittejä23. Viimeaikaiset havainnot ovat osoittaneet, että G6PDH:lla on suojaava rooli reaktiivisia happilajeja vastaan eukaryoottisoluissa, joilla on vaihtoehtoisia reittejä NADPH:n tuottamiseen24. Tässä tutkimuksessa G6PDH-aktiivisuus väheni merkittävästi EA10Hz- ja EA100Hz-ryhmien maksassa. Samanlainen aktiivisuuden lasku havaittiin EA10Hz-rottien munuaisissa. Munuaisten GSH-pitoisuudet kasvoivat EA100Hz-rotilla samaan aikaan, kun samassa ryhmässä osoitettiin samanaikaista G6PDH:n vähenemistä.

Yu ym.25 ovat osoittaneet, että G6PDH:n aktivaatio korreloi käänteisesti GSH:n solunsisäisten tasojen kanssa, kun he käyttivät Taxus chinensis -kasvin solususpensioviljelmiä. On mahdollista, että eläinsoluilla voisi olla samanlainen käyttäytyminen.

Tämän tutkimuksen vahvuuksista ja heikkouksista suhteessa muihin, ei ole olemassa yhtään julkaistua tutkimusta, jota voitaisiin suoraan verrata tähän tutkimukseen. Huolimatta siitä, että EA:n peroksidatiiviset vaikutukset osoitettiin tässä, toisin kuin muissa tutkimuksissa6, muut tutkijat eivät käyttäneet 10 Hz:n sähköstimulaatiota. Julkaistuissa tutkimuksissa käytettiin matalataajuista EA:ta (2 Hz) useissa istunnoissa. Tutkimuksessamme käytettiin yhtä istuntoa. Toisaalta G6PDH-aktiivisuuden väheneminen 100 Hz:llä ja 10 Hz:llä hoidettujen rottien maksassa ja munuaisissa sekä samanaikainen GSH-tasojen nousu yhden EA-istunnon jälkeen viittaavat siihen, että korkeammat taajuudet voisivat antaa paremman suojan oksidatiivista stressiä vastaan. Tähän liittyvät mekanismit eivät ole toistaiseksi selvillä. Lisätutkimukset voivat tuoda uutta valoa sähköakupunktion suojaaviin vaikutuksiin.

Johtopäätös

Kerätyt tiedot tukevat hypoteesia, jonka mukaan yksittäinen 30 minuutin EA 10/100 Hz -istunto tehostaa lipidiperoksidaatiota ja vähentää samanaikaisesti oksidatiivista stressiä lisäämällä GSH-tasoja maksa- ja munuaiskudoksissa rotan mallissa.

1. Campbell A. Akupunktuurin alkuperä. Acupunct Med. 2002;20(2-3):141

6. Siu FK, Lo SC, Leung MC. Moninkertaisen esi-iskemiaa edeltävän sähköakupunktion tehokkuus aivojen iskemian aiheuttaman lipidiperoksidaation vaimentamisessa aikuisilla rotilla. Life Sci. 2004;75(11):1323-32.

8. Wang XR, Xiao J, Sun DJ. Sähköakupunktion ja hypotermian sydänlihasta suojaavat vaikutukset sian sydämeen iskemian/reperfuusion jälkeen. Acupunct Electrother Res. 2003;28(3-4):193-200.

12. Alva N, Palomeque J, Carbonell T. Ketamiini/ksylatsiinipuudutuksen aiheuttama typpioksidi ylläpitää maksan verenkiertoa hypotermian aikana. Nitric Oxide. 2006;15(1):64-9.

14. Lin JG, Chang SL, Cheng JT. Beeta-endorfiinin vapautuminen lisämunuaisesta plasman glukoosipitoisuuden alentamiseksi Zhongwan-akupisteen sähköakupunktiolla rotilla. Neurosci Lett. 2002;326(1):17-20.

15. Lin JG, Chen WC, Hsieh CL, Tsai CC, Cheng YW, Cheng JT, Chang SL. Useat endogeenisen opioidipeptidin lähteet, jotka osallistuvat hypoglykeemiseen vasteeseen 15 Hz:n elektroakupunktiolle Zhongwan-akupisteessä rotilla. Neurosci Lett. 2004;366(1):39-42.

16. Maailman terveysjärjestö (WHO). Standard Acupuncture Nomenclature: Lyhyt selitys 361 klassisesta akupunktiopisteestä ja niiden monikielisestä vertailuluettelosta. 2ed. WHO:n Länsi-Tyynenmeren aluetoimisto; 1993.

23. Xu Y, Osborne BW, Stanton RC. Diabetes aiheuttaa glukoosi-6-fosfaattidehydrogenaasin estoa PKA:n aktivaation kautta, mikä edistää hapetusstressiä rotan munuaiskuoressa. Am J Physiol Renal Physiol. 2005;289(5):F1040-7.

24. Salvemini F, Franzé A, Iervolino A, Filosa S, Salzano S, Ursini MV. Lisääntyneet glutationitasot ja hapettumisresistenssi, joita välittää lisääntynyt glukoosi-6-fosfaattidehydrogenaasin ilmentyminen. J Biol Chem. 1999;274(5):2750-7.

25. Yu LJ, Lan, WZ, Chen C, Yang Y. Glutationitasot kontrolloivat glukoosi-6-fosfaattidehydrogenaasiaktiivisuutta elisitori-indusoidun oksidatiivisen stressin aikana Taxus chinensis -kasvin solususpensioviljelmissä. Plant Sci. 2004;167:329-35.