Fluorometri
Tyypillisesti fluorometrit käyttävät kaksoissädettä. Nämä kaksi sädettä toimivat yhdessä vähentääkseen säteilytehon vaihteluista aiheutuvaa kohinaa. Ylempi säde johdetaan suodattimen tai monokromaattorin läpi ja kulkee näytteen läpi. Alempi säde johdetaan vaimentimen läpi ja säädetään vastaamaan näytteestä lähtevää fluoresenssitehoa. Näytteen fluoresenssivalo ja alemman, vaimennetun säteen valo havaitaan erillisillä antureilla ja muunnetaan sähköiseksi signaaliksi, jota tietokonejärjestelmä tulkitsee.
Koneessa anturi, joka havaitsee ylemmän säteen synnyttämän fluoresenssin, sijaitsee kaukana näytteestä ja 90 asteen kulmassa osuvaan ylempään säteen nähden. Kone on rakennettu näin, jotta ylemmän säteen hajavalo, joka voi osua ilmaisimeen, vähenisi. Optimaalinen kulma on 90 astetta.Tulevan valon valintaa käsitellään kahdella eri tavalla, mikä johtaa erityyppisiin fluorometreihin. Jos valon aallonpituuksien valintaan käytetään suodattimia, laitetta kutsutaan fluorometriksi. Spektrofluorometrissä käytetään yleensä kahta monokromaattoria, mutta joissakin spektrofluorometreissä voidaan käyttää yhtä suodatinta ja yhtä monokromaattoria. Tällöin laajakaistasuodatin toimii vähentääkseen hajavaloa, myös monokromaattorissa olevan diffraktioristikon ei-toivotuista diffraktiojärjestyksistä.
Fluorometrien valonlähteet ovat usein riippuvaisia testattavan näytteen tyypistä. Yleisimpiä fluorometrien valonlähteitä on matalapaine-elohopealamppu. Se tarjoaa monia heräteaallonpituuksia, mikä tekee siitä monipuolisimman. Tämä lamppu ei kuitenkaan ole jatkuva säteilylähde. Ksenonkaarilamppua käytetään, kun tarvitaan jatkuvaa säteilylähdettä. Molemmat näistä lähteistä tuottavat sopivan spektrin ultraviolettivaloa, joka indusoi kemiluminesenssin. Nämä ovat vain kaksi monista mahdollisista valonlähteistä.
Lasi- ja piikyvetit ovat usein astioita, joihin näyte asetetaan. On huolehdittava siitä, ettei kyvettien ulkopuolelle jää sormenjälkiä tai muita jälkiä, sillä ne voivat aiheuttaa ei-toivottua fluoresenssia. ”Spektrilaatuisia” liuottimia, kuten metanolia, käytetään joskus astioiden pintojen puhdistamiseen näiden ongelmien minimoimiseksi.
Leave a Reply