Compared use of HPLC and FZCE for the cluster analysis of Triticum spp and for the identification of T. durum adulteration

Vehnän laatukriteerit kehittyvät jatkuvasti markkinoiden paineen ja kuluttajien mieltymysten mukaan. Viljalajikkeiden laadun ja agronomisten ominaisuuksien karakterisointi on osoittanut laajalti proteiinipitoisuuden merkityksen laadukkaiden tuotteiden varmistamiseksi. Tämän työn tavoitteena on verrata käänteisfaasimenetelmällä tapahtuvaa korkean suorituskyvyn nestekromatografiaa (RP-HPLC) ja vapaan vyöhykkeen kapillaarielektroforeesia (FZCE) italialaisten vehnälajikkeiden tunnistamisessa ja durumvehnäjauhojen väärennösten havaitsemisessa. Pääasiassa alkoholiliukoiset (gliadiinit) ja vesiliukoiset (albumiinit) proteiinit uutettiin 14 tavallisesta vehnälajikkeesta ja 9 durumvehnälajikkeesta. RP-HPLC-kromatogrammeissa vehnäalbumiinit eluoituivat 3-9 minuutissa ja gliadiinit 10-42 minuutissa. Vaikka valitut kromatografiset olosuhteet (käänteisfaasi) eivät mahdollistaneet hydrofiilisten proteiinien, kuten albumiinien, täydellistä erottelua, havaittiin hyvä toistettavuus sekä albumiinien että gliadiinien osalta. FZCE-elektroferogrammeissa vehnäalbumiinit siirtyivät 8-14 minuutin ja gliadiinit 16-25 minuutin välillä. Vehnäalbumiinien toistettavuus oli hyvä, kun taas gliadiinifraktioiden suhteellisen huono toistettavuus oli seurausta valituista erotusolosuhteista, joilla pyrittiin erottamaan samassa ajossa joko hydrofiiliset (albumiinit) ja alkoholiliukoiset (gliadiinit) proteiinit. HPLC- ja FZCE-tietojen pääkomponenttianalyysi (PCA) osoitti, että molemmilla tekniikoilla voitiin yksiselitteisesti tunnistaa suuri osa tutkituista vehnälajikkeista. Tavallisten vehnälajikkeiden RP-HPLC-kromatogrammeissa havaittiin yksinomaan kolme piikkiä, kun taas tavallisten vehnälajikkeiden FZCE-elektroferogrammeissa havaittiin kolme ainutlaatuista piikkiä. Näitä piikkejä tutkittiin pohjana durumvehnäjauhon ja tavallisesta vehnästä saadun jauhon väärentämisen havaitsemiselle ja arvioimiselle. Huippujen pinta-alan ja väärennösasteen välinen suora yhteys mahdollisti standardikäyrien laatimisen. Standardikäyrät osoittivat, että väärennös voidaan kvantifioida joko RP-HPLC:llä tai FZCE:llä.