CD16 – löydä minut makrofageista, neutrofiileistä ja NK-soluista

CD16 on lymfosyyttien Fc gamma tyypin III matala-affiniteettireseptori IgG:lle, ja sitä edustaa kaksi samankaltaista geeniä, CD16A (Fc gamma RIII A) ja CD16B (Fc gamma RIIIB). CD16A esiintyy heterooligomeerisena polypeptidiin kiinnittyneenä muotona makrofageissa ja NK-soluissa. CD16B esiintyy monomeerisena glykosyylifosfatidyyliinositoliin (GPI) ankkuroituneena muotona neutrofiileissä. CD16 sitoo IgG:tä immuunikompleksien tai vapaan vasta-aineen muodossa. Se sitoutuu ensisijaisesti IgG1- ja IgG3-isotyyppeihin, ja IgG2- ja IgG4-isotyypit sitoutuvat vain vähän. IgG:n sitoutuessa molemmat CD16-isomuodot käynnistävät signaalikaskadeja, jotka tuottavat monenlaisia vasteita, kuten vasta-aineesta riippuvaista soluvälitteistä sytotoksisuutta (ADCC), fagosytoosia, degranulaatiota ja proliferaatiota. CD16 ilmentyy makrofageissa, luonnollisissa tappajasoluissa (NK-soluissa) ja neutrofiileissä. Niiden ilmentyminen on konstitutiivista, vaikka sytokiinit ja lymfokiinit voivat moduloida niiden ilmentymistasoja.

Flow Cytometry: CD16/CD32-vasta-aine (2.4G2) – Hiiren makrofagien värjäys Hiiren luuydinperäiset makrofagit (BMDM) värjättiin anti-CD16/32-vasta-aineella (sekä isotyyppikontrollilla) ja sidottu vasta-aine havaittiin käyttämällä vuohen IgG-anti-rotan IgG:tä (H&L-ketju) polyklonaalista vasta-ainetta, joka oli konjugoitunut suoraan Alexa Fluor 647:ään (AF647), joka on saatavilla suoraan yhdeltä kilpailijalta. Verrattaessa isotyyppikontrolliin ja vain sekundaarikontrolliin on havaittavissa CD16/32-positiivinen populaatio.

Ensimmäisissä CD16:n molekyylitutkimuksissa CD16-vasta-ainetta käytettiin ligandien ja reseptorien sitoutumiskohtien karakterisoimiseksi ja molekyylimallinnuksen avuksi1. deHaasin ryhmä Alankomaissa käytti CD16-vasta-ainetta arvioidakseen CD16A-geenin polymorfismien vaikutuksia luovuttajien joukossa2. Heidän tutkimuksensa viittaavat siihen, että triallelinen polymorfismi vaikuttaa CD16A:n sitoutumiseen IgG-vasta-aineisiin. Lisäksi Gasdaska et al. käyttivät CD16-vasta-ainetta uuden afukosyloidun rituksimabin (BLX-300) karakterisointitutkimuksissaan3. He vertasivat toksisuuskokeissa tämän yhdisteen suorituskykyä itse rituksimabiin ja havaitsivat, että sillä oli korkeampi vasta-aineesta riippuvainen solusytotoksisuus (ADCC), mutta myös B-solujen köyhtyminen.

Explore more Innate Immunity Markers