Uso comparado de HPLC y FZCE para el análisis de cluster de Triticum spp y para la identificación de la adulteración de T. durum

Los criterios de calidad del trigo evolucionan continuamente en respuesta a la presión del mercado y a las preferencias del consumidor. La caracterización de los cultivares de cereales en cuanto a calidad y propiedades agronómicas, han mostrado ampliamente la importancia del contenido en proteínas para asegurar productos de buena calidad. El objetivo de este trabajo es una comparación de la cromatografía líquida de alto rendimiento en fase inversa (RP-HPLC) y la electroforesis capilar de zona libre (FZCE) en la identificación de los cultivares de trigo italianos y la detección de la adulteración de la harina de trigo duro. Se extrajeron proteínas principalmente solubles en alcohol (gliadinas) e hidrosolubles (albúminas) de 14 cultivares de trigo blando y de 9 cultivares de trigo duro. En los cromatogramas RP-HPLC, las albúminas y gliadinas de trigo eluyeron entre 3 y 9 minutos y entre 10 y 42 minutos, respectivamente. Aunque las condiciones cromatográficas elegidas (fase inversa) no permitieron una resolución completa de las proteínas hidrofílicas como las albúminas, se observó una buena reproducibilidad tanto para las albúminas como para las gliadinas. En los electroferogramas FZCE, las albúminas de trigo y las gliadinas migraron entre 8 y 14 min y 16-25 min, respectivamente. Se encontró una buena reproducibilidad para las albúminas de trigo, mientras que la reproducibilidad relativamente pobre de las fracciones de gliadinas fue una consecuencia de las condiciones de separación seleccionadas para separar en la misma corrida las proteínas hidrofílicas (albúminas) y las solubles en alcohol (gliadinas). El análisis de componentes principales (PCA) de los datos de HPLC y FZCE evidenció que ambas técnicas permitieron la identificación unívoca de la gran proporción de cultivares de trigo investigados. Se detectaron tres picos exclusivamente en los cromatogramas de RP-HPLC de los cultivares de trigo común, mientras que se encontraron tres picos únicos en los electroferogramas de FZCE de los cultivares de trigo común. Estos picos se investigaron como base para detectar y estimar la adulteración de la harina de trigo duro con harina de trigo blando. La relación directa entre el área de los picos y el nivel de adulteración permitió construir curvas estándar. Las curvas estándar mostraron que la adulteración puede ser cuantificada tanto por RP-HPLC como por FZCE.