Porovnání použití HPLC a FZCE pro shlukovou analýzu Triticum spp a pro identifikaci falšování T. durum

Kritéria kvality pšenice se neustále vyvíjejí v závislosti na tlaku trhu a preferencích spotřebitelů. Charakterizace odrůd obilovin z hlediska kvality a agronomických vlastností široce ukázala význam obsahu bílkovin pro zajištění dobré kvality výrobků. Cílem této práce je porovnání vysokoúčinné kapalinové chromatografie na obrácené fázi (RP-HPLC) a kapilární elektroforézy s volnou zónou (FZCE) při identifikaci italských odrůd pšenice a detekci falšování mouky z tvrdé pšenice. Ze 14 běžných odrůd pšenice a z 9 odrůd pšenice tvrdé byly extrahovány bílkoviny rozpustné hlavně v alkoholu (gliadiny) a ve vodě (albuminy). V chromatogramech RP-HPLC se pšeničné albuminy a gliadiny eluovaly mezi 3 a 9 min a mezi 10 a 42 min. I když zvolené chromatografické podmínky (obrácená fáze) neumožňovaly úplné rozlišení hydrofilních proteinů, jako jsou albuminy, byla u albuminů i gliadinů pozorována dobrá reprodukovatelnost. V elektroferogramech FZCE pšeničné albuminy a gliadiny migrovaly mezi 8 a 14 min, resp. 16-25 min. Dobrá reprodukovatelnost byla zjištěna u pšeničných albuminů, zatímco relativně špatná reprodukovatelnost gliadinových frakcí byla důsledkem zvolených separačních podmínek, jejichž cílem bylo separovat ve stejném cyklu buď hydrofilní (albuminy), nebo v alkoholu rozpustné (gliadiny) proteiny. Analýza hlavních komponent (PCA) dat HPLC a FZCE prokázala, že obě techniky umožnily jednoznačnou identifikaci velké části zkoumaných odrůd pšenice. V chromatogramech RP-HPLC běžných odrůd pšenice byly zjištěny výhradně tři píky, zatímco v elektroferogramech FZCE běžných odrůd pšenice byly nalezeny tři jedinečné píky. Tyto píky byly zkoumány jako základ pro detekci a odhad falšování mouky z pšenice tvrdé moukou z pšenice obecné. Přímý vztah mezi plochou píků a mírou falšování umožnil sestrojit standardní křivky. Standardní křivky ukázaly, že falšování lze kvantifikovat pomocí RP-HPLC nebo FZCE.