PLOS ONE

Materiál a metody

Design studie

V této studii byl použit kvaziexperimentální design časové řady s jedním ramenem.

Účastníci a prostředí

Tento výzkum byl studií proveditelnosti. Velikost vzorku vycházela z předchozího výzkumu, který informoval o hladině OT ve slinách 11 kojících žen . Předchozí studie uvádějící hladinu OT v plazmě u těhotných žen zahrnovaly přibližně 10 až 20 subjektů . Kritéria způsobilosti byla následující: plánovaný porod jednoho dítěte spontánním porodem hlavičkou; mezi 38. a 40. týdnem těhotenství; Asiatka, která umí číst a psát japonsky; obdržela povolení k účasti od porodníka nebo porodní asistentky. Vylučovací kritéria byla následující: užívání jakýchkoli léků souvisejících s těhotenstvím; zdravotní nebo těhotenské komplikace a duševní onemocnění; anamnéza léčby metodami asistované reprodukce; BMI před těhotenstvím > 25; plánovaný vyvolávaný porod; zkušenost s prodlouženým těhotenstvím; předchozí císařský řez; kojení dítěte. Schéma znázorňující nábor účastnic studie je uvedeno na obr. 1.

Rozbalit

Když způsobilé těhotné ženy ve 34. týdnu těhotenství navštívily ambulantní oddělení za účelem prenatální kontroly, vysvětlili jsme jim ústně náš výzkum v místě bez přítomnosti sestry nebo porodníka. Po získání souhlasu jsme se s účastnicí dohodli na prvním intervenčním dni po 38. týdnu těhotenství. Ženy tehdy také obdržely formulář pro odmítnutí s vysvětlením, že mohou kdykoli odstoupit bez jakéhokoli znevýhodnění. V zařízení pro sběr dat této studie se u všech těhotných žen po 37. týdnu provádí vyšetření pánve. Zametení blan může být provedeno podle uvážení porodníka po 39. gestačním týdnu.

Experimenty probíhaly v nemocnici 3 dny po sobě. Byly zde některé subjekty, které absolvovaly perinatální kontroly u porodníků před a po experimentu. Údaje byly shromážděny v jedné porodnici v japonském městě Kanagawa v období od června 2015 do srpna 2015.

Protokol studie byl schválen Institutional Review Board of St Luke’s International University, Tokio, Japonsko (č. 15-011). Tato studie byla zaregistrována v registru klinických studií lékařské informační sítě univerzitních nemocnic v Japonsku (UMIN000017911).

Procedury

Doba intervence stimulace prsu byla 3 dny. Pro kontrolu denních vlivů byla použita stejná denní doba. Sliny byly odebírány v době od 10:00 do 16:00 hod. Účastnice byly požádány, aby se před dnem intervence zdržely pohlavního styku a pití alkoholu. Byli také poučeni, aby 1 hodinu před intervencí dojedli, vyčistili si zuby a nekouřili. Byli také požádáni, aby nepoužívali rtěnku. Experiment byl zahájen 30 minut po požití 100 ml vody.

Na začátku studie bylo vyhodnoceno skóre zrání děložního hrdla (obr. 2; cervikální kontrola) pomocí modifikovaného Bishopova skóre. Zrání děložního hrdla může být možnou variantou hodnocení intervence ve vztahu ke konečnému bodu. Hodnotitelé byli složeni ze 3 porodních asistentek, které mají 10 let zkušeností, aby bylo hodnocení standardizováno.

Rozšířit

Učastnice prováděly stimulaci prsu po dobu 3 dnů společně s ošetřující porodní asistentkou v nemocnici. Pro standardizaci techniky zákroku předvedla porodní asistentka, jak provádět stimulaci prsu po dobu 10 minut pomocí modelu prsu připraveného z vlny a přístroje pro měření tlaku (Perineometer, OWOMED, Gyeonggido, Jižní Korea). Doporučený stimulační tlak byl mezi 20 a 50 mmHg, což je jemný tlak a nepoškozuje bradavku. K dosažení stimulačního rytmu 69 úderů za minutu byl jako vodítko použit osvětlovací elektrický metronom (SQ50V, Seiko Watch Corporation, Tokio, Japonsko) bez zvuku. Každý prs byl stimulován po dobu 15 minut, počínaje pravým, střídavě mezi prsy, aby se zabránilo hyperstimulaci dělohy, celkem 1 hodinu denně. Stimulace prsou byla prováděna štípáním prsu do té míry, aby to nebolelo, počínaje vnější areolou k bradavce pomocí palce, ukazováčku a prostředníčku. Přímá autostimulace prsu byla prováděna buď levou, nebo pravou rukou pomocí čistého koňského oleje (Sonbahyu; Yakushido, Fukuoka, Japonsko). K odstranění obav nebo strachu z přítomnosti jiných osob během stimulace prsu byl použit kryt na kojení. Řídili jsme čas a informovali účastnice.

Během intervence byly prováděny kardiotokografické (CTG) snímky pro záznam děložní činnosti a kontrolu srdeční frekvence plodu. Adekvátní děložní kontrakce byla definována jako přítomnost alespoň 3 kontrakcí trvajících po dobu 40 sekund, které se vyskytly během 10 minut. Frekvence děložních kontrakcí může být také možnou variantou hodnocení intervence ve vztahu k cílovému bodu. Účastníci sledovali připravený film (tj. zájezdy vlakem po Evropě), aby se kontrolovaly vnější faktory, které mohou ovlivnit experimentální prostředí. Po skončení intervence účastníci vyplnili dotazník týkající se proveditelnosti experimentální intervence. Na konci intervence bylo znovu vyhodnoceno zrání děložního hrdla.

Po skončení experimentální intervence obdržely všechny účastnice bankovním převodem poplatek za účast ve studii (3 000 \, tj. asi 30 $).

intervenci prováděly 3 porodní asistentky, které se skládaly z první autorky a 2 výzkumných asistentek. Pro tuto studii proveditelnosti měly odpovídající schopnost čtení CTG získanou na základě své více než 5leté klinické praxe a více než 100 případů vedení porodu. Pro standardizaci intervence bylo vysvětlení pro účastníky a detaily intervence sjednoceno. První autor se navíc na začátku důsledně dvakrát účastnil experimentů, aby se ujistil, že výzkumní asistenti mohou správně provádět postup intervence. Výzkumný asistent A byl zodpovědný za 30,3 % experimentů, B za 3,0 % a první autor za zbytek experimentů. Navíc ve 40 % dnů, kdy byl za experimenty zodpovědný výzkumný asistent A, byl první autor v nemocnici a potvrdil standardizaci experimentů.

Postup při odběru slin

Salivární testy se provádějí relativně snadno a jsou pro těhotné ženy minimálně invazivní. Byla zaznamenána mírná korelace (r = 0,41-0,59) mezi hladinou OT ve slinách a hladinou OT v plazmě . Kromě toho byla prokázána pozitivní korelace (r = 0,89) mezi slinným OT a plazmatickým OT u pacientek bez anamnézy sebevyvolávání zvracení při mentální anorexii .

Vzorky slin byly odebrány 10 minut před a 15, 30, 60, 75 a 90 minut po zásahu stimulace prsu, celkem 18 vzorků na účastníka. Jeden mililitr slin byl odebrán nestimulovaným pasivním sliněním pro měření hladiny OT pomocí enzymatické imunosorbční analýzy (ELISA; ENZO Life Sciences, NY, USA). Příručka ELISA uvádí, že koeficienty variability v rámci testu a mezi testy jsou 12,6 % – 13,3 % a 11,9 % – 20,9 %.

Pro standardizaci postupu sběru slin byli účastníci požádáni, aby po dobu 3 minut shromažďovali své sliny v ústech. Poté účastníci odebrali asi 1,0 ml svých slin pro každý vzorek do polypropylenové zkumavky o objemu 1,5 ml (Eppendorf, NY, USA) pomocí pomůcky pro odběr slin (Salimetrics, PA, USA). Pokud se tento objem nepodařilo nasbírat po 3 minutách, účastníci postup sběru slin opakovali. Odebrané vzorky byly okamžitě uloženy do mrazničky (Cryo Porter CS-80C, Scinics Corp., Tokio, Japonsko) při teplotě -80 °C. Hladina OT byla stanovena metodou podle Cartera et al. . Při dalších experimentálních postupech jsme po rozmrazení přidali 500 KIU/μl aprotininu, abychom zabránili proteolytické degradaci.

Bylo zjištěno, že polymorfismus oxytocinového receptoru

Polymorfismus jednoho nukleotidu receptoru OT snižuje citlivost na OT . Zejména ženy s homozygotním typem GG v genu pro receptor OT rs53576 údajně přecházejí do pozdního aktivního porodu. V této studii byly získány vzorky bukální sliznice pro analýzu 3 polymorfismů genu pro receptor OT (tj. rs53576, rs2254298 a rs1042778) genotypizací pomocí TaqMan SNP testu (Applied Biosystems, Thermo Fisher, MA, USA).

Proveditelnost z hlediska praktičnosti a přijatelnosti

Vyhodnotili jsme proveditelnost intervenčního protokolu stimulace prsu z hlediska praktičnosti a přijatelnosti . Z hlediska praktičnosti experimentální metody byl posuzován podíl analyzovatelných vzorků a výskyt nežádoucích účinků. Pro přijatelnost experimentální metody byla zvažována míra odpadnutí po intervenci. K hodnocení únavy a bolesti byla v této studii použita vizuální analogová škála (VAS), která je jedním z nejplatnějších, nejspolehlivějších a nejčastěji používaných měřicích nástrojů pro sebehodnocení . Ženy odpovídaly na následující komentáře a otázky pomocí následujících škál nebo : „Vyjádřete se, prosím, k masáži prsou; 1) Byly vaše ruce a prsty unavené? 2) Cítila jste bolest bradavek?“ a „Vyjádřete se, prosím, k odběru slin; 1) Cítila jste únavu z odběru slin?“. Při zodpovídání následujících otázek byla použita čtyřstupňová Likertova škála: 1) „Bylo vám nepříjemné dotýkat se bradavky?“, 2) „Bylo poučení o stimulační metodě srozumitelné?“, 3) „Chcete tuto proceduru opakovat v příštím těhotenství?“ a 4) „Chcete poskytnout informace o této technice svým známým?“. Vzhledem ke kulturnímu prostředí východních Asiatů se sklonem k volbě středního bodu , byla pro měření postoje použita čtyřstupňová Likertova škála, aby se předešlo nejednoznačnosti těchto otázek. Na druhou stranu pro rytmus a intenzitu stimulace byla použita 5-stupňová Likertova škála, která zahrnuje „středně“ jako prostřední volbu. Kromě toho účastníci odpovídali na otázky týkající se prostředí, kde byla intervence prováděna.

Analýza dat

Byly vypočteny průměry (M), směrodatné odchylky (SD), směrodatné chyby (SE) a mediány všech proměnných. Použili jsme lineární smíšený model s použitím kovarianční struktury AR (1) s úrovní OT jako závislou proměnnou a dnem a časem zásahu jako fixními efekty. Byl proveden Littleův MCAR test. Kromě všech úrovní OT byly do postupu imputace zahrnuty věk, gestační týdny při intervenci, porodní anamnéza, rodinný stav, soužití s partnerem a vzdělání ≥ 12 let jako faktory ovlivňující úroveň OT. Výsledek byl p = 0,980 a nulová hypotéza nebyla zamítnuta. Hlavní příčinou chybějících údajů byl nedostatečný objem slin a nikoli chybějící údaje v důsledku hodnoty OT, chybějící údaje v této studii tedy odrážely chybějící zcela náhodně (MCAR). K imputování chybějících údajů jsme použili proceduru vícenásobné imputace v programu SPSS Missing Values. Bylo vytvořeno pět imputovaných souborů dat. Data měla nenormální rozdělení. Spearmanův korelační koeficient byl použit k testování korelace mezi hladinou slinného OT a cervikálním skóre nebo charakteristikami. Statistické analýzy byly provedeny pomocí programu IBM SPSS Statistics (verze 22.0; Static Base and Advanced Statistics, IBM Japan, Tokio, Japonsko).

.