Fluorometr

Zjednodušená konstrukce součástí fluorometru

Typicky fluorometry využívají dvojitý paprsek. Tyto dva paprsky pracují v tandemu, aby se snížil šum vznikající v důsledku kolísání zářivého výkonu. Horní paprsek prochází filtrem nebo monochromátorem a prochází vzorkem. Dolní paprsek prochází atenuátorem a je nastaven tak, aby odpovídal fluorescenčnímu výkonu vyzařovanému vzorkem. Světlo z fluorescence vzorku a spodní, zeslabený paprsek jsou detekovány samostatnými snímači a převedeny na elektrický signál, který je interpretován počítačovým systémem.

Ve stroji je snímač, který detekuje fluorescenci vytvořenou horním paprskem, umístěn ve vzdálenosti od vzorku a v úhlu 90 stupňů od dopadajícího horního paprsku. Stroj je takto konstruován, aby se snížilo rozptýlené světlo z horního paprsku, které může dopadnout na detektor. Optimální úhel je 90 stupňů.Existují dva různé přístupy k řešení výběru dopadajícího světla, které dávají vzniknout různým typům fluorometrů. Pokud se k výběru vlnových délek světla používají filtry, nazývá se přístroj fluorometr. Zatímco spektrofluorometr obvykle používá dva monochromátory, některé spektrofluorometry mohou používat jeden filtr a jeden monochromátor. Kde v tomto případě širokopásmový filtr slouží k omezení rozptýleného světla, včetně světla z nežádoucích difrakčních řádů difrakční mřížky v monochromátoru.

Světelné zdroje pro fluorometry často závisí na typu testovaného vzorku. Mezi nejběžnější světelné zdroje pro fluorometry patří nízkotlaká rtuťová výbojka. Ta poskytuje mnoho excitačních vlnových délek, takže je nejuniverzálnější. Tato lampa však není nepřetržitým zdrojem záření. Pokud je zapotřebí nepřetržitý zdroj záření, používá se oblouková xenonová výbojka. Oba tyto zdroje poskytují vhodné spektrum ultrafialového světla, které indukuje chemiluminiscenci. To jsou jen dva z mnoha možných zdrojů světla.

Skleněné a křemenné kyvety jsou často nádoby, do kterých se vzorek umístí. Je třeba dbát na to, aby na vnější straně kyvety nezůstaly otisky prstů nebo jiné druhy stop, protože to může vyvolat nežádoucí fluorescenci. K čištění povrchu nádobek se někdy používají rozpouštědla „spektrální kvality“, jako je metanol, aby se tyto problémy minimalizovaly.

.